血管内皮細胞が発現する2種類のラミニン複合体の構造と機能

血管内皮细胞表达的两类层粘连蛋白复合物的结构和功能

• 批准号: 04263220
• 负责人: 北川 泰雄
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04263220/
• 关键词: 血管内皮細胞; 平滑筋細胞; 基底膜; ラミニン; 血管新生; 分子シャペロン

基底膜は血管内壁を形成している内皮細胞の表裏極性決定、増殖や遊走に作用するだけでなく、外側にある平滑筋細胞との隔壁としても重要である。基底膜の主要糖タンパク質であるラミニンはA、B1とB2鎖が会合した十字架構造をしているが、最近、多様な異型体が発見された。これらには、筋肉膜のメロシン、シナプス基底膜のS-ラミニンや真皮基底膜のカリニンなどがある。我々はこれらが同じ会合機構を共有して「サブユニットすりかえ」によって多様な複合体を作ることを要した。血管内皮細胞ではA鎖に加えてA'鎖が発現され、AB1B2とA'B1B2の2種類の複合体が同時に形成されている。この事実によれば、「内皮細胞は血管新生における脱着、極性喪失、遊走と再接着などの諸過程に応じて異なるラミニンを使い分けている」という仮説が可能である。ラミニン各鎖の会合領域にはheptad repeatがあり、これで形成される疎水性面が鎖間会合力になる。この機構では、会合前の単量体や2量体を可溶状態に保つために分子シャペロンが必要である。このような分子シャペロンをDithiobisSuccinimidyl Pronionate(DSP)処理で細胞内ペプチド間に架橋を形成させる手法で検索したところ、約80、60と50kDのペプチドがラミニン鎖に架橋されていることが判明した。これらのペプチドは以下のような特徴を示した。1)約50kDaのペプチドはHSP47抗体と交差反応を示さない。2)各分子シャペロン様ペプチドとラミニン各鎖間の相互作用の選択性は低い。3)1分子のラミニン鎖に対して多数の分子シャペロン様ペプチドが架橋される。4)モネンシンなどのイオノフォア添加で細胞内小胞のpHを攪乱するとこの相互作用は消失する。

Basement membrane は vascular wall を form し て い る endothelial cell polarity decision の list, raised colonization や wander に role す る だ け で な く, lateral に あ る smooth muscle cells と の door と し て も important で あ る. Basement membrane の main sugar タ ン パ ク qualitative で あ る ラ ミ ニ ン は meet A, B1 と B2 lock が し た cross structure を し て い る が, recently, many others な isoforms が 発 see さ れ た. こ れ ら に は, brawn membrane の メ ロ シ ン, シ ナ プ ス basement membrane の S - ラ ミ ニ ン や leather basement membrane の カ リ ニ ン な ど が あ る. I 々 は こ れ ら が meet with じ institutions を mutual し て "サ ブ ユ ニ ッ ト す り か え" に よ っ て others more な complex を as る こ と を to し た. Vascular endothelial cell で は A lock に え て A 'lock が 発 now さ れ, AB1B2 と A' B1B2 の 2 kinds の complex が に formed at the same time さ れ て い る. こ の things be に よ れ ば, "は angiogenic endothelial cells に お け る wander off the loss, polarity, と then な ど の the process に 応 じ て different な る ラ ミ ニ ン を make い points け て い る" と い う 仮 said が may で あ る. ラ ミ ニ ン meet each lock の field に は heptad repeat が あ り, こ れ で form さ れ る 疎 will force between water surface が lock に な る. こ の institutions で は, meet the former の 単 quantity body や 2 quantity body を soluble state に bartender つ た め に molecular シ ャ ペ ロ ン が necessary で あ る. こ の よ う な molecular シ ャ ペ ロ ン を DithiobisSuccinimidyl Pronionate (DSP) 処 Richard で intracellular ペ プ チ ド に Bridges between を form さ せ る gimmick で 検 cable し た と こ ろ, about 80, 60 と 50 kd の ペ プ チ ド が ラ ミ ニ ン lock に bridging さ れ て い る こ と が.at し た. The following <s:1> ような features を indicate た. Youdaoplaceholder0 ペプチド ペプチド ペプチド. 1) Approximately 50kDa <s:1> ペプチド HSP47 antibody と cross reaction 応を shows さな さな. 2) The <s:1> interaction <e:1> between each molecule and each lock should be selected with low 択 property <e:1>. 3) One molecule of <s:1> ラ, ニ, <s:1> locks に against the <s:1> て majority of <s:1> molecules シャペロ <e:1> bridge される. 4)モネ シ シ <e:1> な <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> ノフォア ノフォア addition of で intracellular small cell <s:1> pHを disrupts すると <s:1> <s:1> interaction <e:1> disappears する.

项目成果

Taniguchi,Y.,Miki,K.and Kitagawa,Y.: "Trausieut goue cxpression by SV40 pranoter haracteri2es Sezueutial differentiation or embrgonal corcinoma F9 cells into Primitire and Visceral ondoderm" Experimentol cell Rosearch. 204. (1993)

Taniguchi，Y.，Miki，K. 和 Kitakawa，Y.：“SV40 pranoter haacteri2es Sezueutical 分化或胚胎癌 F9 细胞转化为原始和内脏 ondoderm 的 Trausieut goue 表达”实验细胞 Rosearch。

北川 泰雄,佐野 祐子,岡野 正樹,上田 正次,佐々木 隆造: "細胞のうらおもてとエリスロポエチン生産" 化学と生物. (1993)

Yasuo Kitakawa、Yuko Sano、Masaki Okano、Masatsugu Ueda、Ryuzo Sasaki：“细胞的 Urafront 和促红细胞生成素的产生”化学与生物学（1993 年）。

Tanguchi,Y.,and Kitagawa,Y.: "The differentiation-dependent inhibition of SV40 promctor/euhauer activity in 3T3-L1 cols is mediated through Promotet and not Ouhaucer Soquence" Cytotechuology. (1993)

Tanguchi, Y. 和 Kitakawa, Y.：“3T3-L1 cols 中 SV40 promctor/euhauer 活性的分化依赖性抑制是通过Promotet 而不是 Ouhaucer Soquence 介导的”细胞技术学。

Ono,H.,Jeou,H.,Yamada,Y.,and Kitagawa,Y.: "Ascorbic and Phosphate increases the Syuthesis of type IV cellsgen by Dreveuting the precursors from intracellular dogradation" Experiwental cell Rosearch. 205. (1993)

Ono,H.、Jeou,H.、Yamada,Y. 和 Kitakawa,Y.：“抗坏血酸和磷酸盐通过消除细胞内降解前体来增加 IV 型细胞的合成”实验细胞研究。

Jeon,H.,Ono,M,Kumagai,C.,and Kitagawa,Y.: "Subunit assembly of laminin Subunits in cultured animal cells" Animal cell Techuology. (1993)

Jeon,H.、Ono,M、Kumagai,C. 和 Kitakawa,Y.：“培养动物细胞中层粘连蛋白亚基的亚基组装”动物细胞技术。