単一シナプス内酵素反応と蛋白間相互作用の可視化による神経可塑性シグナリングの解析

通过可视化单个突触内酶反应和蛋白质-蛋白质相互作用来分析神经可塑性信号传导

基本信息

  • 批准号:
    18650101
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.18万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2006
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2006 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究を通じ、神経可塑性を担うシグナル分子が、シナプス蛋白複合体内で、あるいは単一スパインや単一シナプス近傍にて、どのように挙動するかを可視化・定量測定する新規技術を開発することを試みた.まず樹状突起スパインに存在するCaMKIIとその類縁キナーゼについて、スパインやミクロドメイン内相互作用を検出できるFRETプローブ作成を行った。その結果、脂質ラフト近傍におけるCLICK-III/CaMKIgammaの分子間相互作用やCaMKIIとArcのスパイン内相互作用を定量的に計測することに成功した(Takemoto-Kimura et al.改訂中).また、PSD局在が報告されているにCaMK類似キナーゼがCREB転写を抑制的に制御する機構を明らかにした(Ohmae et al.,J. Biol. Chem.2006).さらに、プルキンエ細胞スパインにおけるアクチン動態の可視化を実施し、これに基づき新たな制御因子の探索を実施した(Fuse et al.準備中).共同研究においては、我々の開発したEGFP-actinプローブを用い、東京医科歯科大学岡部繁男研究室と共同で、アクチン線維と興奮性シナプス機能分子複合体の相互作用を単一スパインレベルで解析した。(Kuriu et al. J. Neurosci.,2006).一方、シナプスでのカルシウムチャンネル局在制御について京都大学工学部森泰生研究室と共同で探索し、RIM1がカルシウムチャンネルとの相互作用により、プレシナプスへ集積する機構を明らかにした(Kiyonaka et al. Nature Neurosci. inpress).
This study を じ, god 経 plasticity を bear う シ グ ナ ル molecular が, シ ナ プ ス protein complex in vivo で, あ る い は 単 a ス パ イ ン や 単 a シ ナ プ ス nearly alongside に て, ど の よ う に 挙 dynamic す る か を visualization, quantitative determination of す る を open new rules technology 発 す る こ と を try み た. ま ず dendritic protrusions ス パ イ ン に exist す る CaMKII と そ の class try キ ナ ー ゼ に つ い て, ス パ イ ン や ミ ク ロ ド メ イ ン interactions within を 検 out で き る FRET プ ロ ー ブ made line を っ た. そ の results, lipid ラ フ ト nearly alongside に お け る CLICK - III/CaMKIgamma の intermolecular interactions や CaMKII と Arc の ス パ イ ン interactions within を quantitative に measuring す る こ と に successful し た (Takemoto - Kimura et al. Revises). ま た, PSD report by が さ れ て い る に CaMK similar キ ナ ー ゼ が after CREB planning write を inhibit に suppression す る institutions を Ming ら か に し た (Ohmae et al., j. Biol. Chem., 2006). さ ら に, プ ル キ ン エ cells ス パ イ ン に お け る ア ク チ ン の dynamic visualization を be し, こ れ に base づ き new た な suppression factor の explore を be applied し た (Fuse et al. Prepare). Research on common に お い て は, I 々 の open 発 し た EGFP - actin プ ロ ー ブ を with medical 歯 い, Tokyo university of numerous male laboratory と common で okabe, ア ク チ ン line d と excitatory シ ナ プ ス functional molecular complex の interaction を 単 a ス パ イ ン レ ベ ル で parsing し た. (Kuriu et al. J. Neurosci.,2006). Side, シ ナ プ ス で の カ ル シ ウ ム チ ャ ン ネ ル bureau in royal に つ い て Kyoto university engineering department's Thai production laboratory と common で exploring し, RIM1 が カ ル シ ウ ム チ ャ ン ネ ル と の interaction に よ り, プ レ シ ナ プ ス へ set product す る institutions を Ming ら か に し た (Kiyonaka et al. Nature Neurosci. inpress).

项目成果

期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
The active zone protein RIMl confers sustained activity and neurotransmitter vesicle anchoring to presynaptic Ca^<2+> channels.
活性区蛋白RIM1赋予持续的活性和锚定于突触前Ca 2 通道的神经递质囊泡。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Sakane;A. et al.;神谷温之;Kiyonaka S. et al.
  • 通讯作者:
    Kiyonaka S. et al.
Molecular identification and characterization of a family of kinases with homology to Ca2+/calmodulin-dependent protein kinases I/IV
  • DOI:
    10.1074/jbc.m513212200
  • 发表时间:
    2006-07-21
  • 期刊:
  • 影响因子:
    4.8
  • 作者:
    Ohmae, Shogo;Takemoto-Kimura, Sayaka;Bito, Haruhiko
  • 通讯作者:
    Bito, Haruhiko
Differential control of postsynaptic density scaffolds viactin-dependent and independent mechanisms.
突触后密度支架的差异控制依赖于和独立的机制。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2006
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Iino;Y.;Yoshida K;Kuriu T. et al.
  • 通讯作者:
    Kuriu T. et al.
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    2018
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    0
  • 作者:
    湊原 圭一郎;鈴木 穣;菅野 純夫;尾藤 晴彦;奥野 浩行
  • 通讯作者:
    奥野 浩行
Differential roles of CaMKIgamma ; and CaMKIalpha ; in cortical dendritic and axonal development
CaMKIgamma 的不同作用;
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Oikawa;M.;Smyth;J. M.;& Sliwinski;M.;及川昌典・及川晴・橋本絵美;及川昌典;及川昌典;及川昌典;及川昌典;及川昌典;及川昌典・及川晴・北村英哉(監訳);及川昌典;及川昌典;及川昌典;及川昌典;Mio Nonaka;Natsumi Ageta-Ishihara;井上昌俊;奥野浩行;Kawashima Takashi;尾藤 晴彦;Takemoto-Kimura S;Kiyonaka S;上田(石原)奈津実;安達-森島亜希;竹本-木村さやか;竹本-木村さやか;Okuno H;Ageta-Ishihara N;上田(石原)奈津実;Ageta-Ishihara N;Ageta-Ishihara Natsumi
  • 通讯作者:
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    2001
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    $ 2.18万
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