内分泌攪乱作用の動物種差を比較できるアッセイ法の開発

开发一种可以比较动物物种内分泌干扰效应差异的测定方法

• 批准号: 13027279
• 负责人: 八木 孝司
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Osaka Prefecture University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13027279/
• 关键词: 環境ホルモン; 内分泌撹乱物質; アリルハイドロカーボン受容体; ダイオキシン; レポーターアッセイ; リスク評価

ダイオキシン様内分泌撹乱物質の作用の生物種差の問題を解決する一つの方法として、生物種独自のアリルハイドロカーボンレセプター(AhR)を持つバイオアッセイ系を構築し、ダイオキシン様作用物質のAhR系活性化の生物種差を明らかにすることを本研究で試みる。その最初の段階として本研究では、ヒトおよびマウスのAhR,Arntを発現する出芽酵母アッセイ系を樹立し、両種のAhR系活性化についての種差を考察した。MILLER博士の方法に準じてヒトに代えてマウスのAhRとArnt遺伝子を染色体に持つ酵母を作製した。さらにCyp1A1プロモーターにβ-ガラクトシダーゼ遺伝子を結合したレポータープラスミドを酵母に導入した。その結果、この酵母によってベータナフトフラボン、ベンツピレン、インディルビン、3_メチルコラントレンなどによるマウスAhr/Arnt系の活性化を測定できることがわかった。マウスまたはヒト遺伝子を持つ酵母を用いて、それらの化学物質によるAhR/Arnt系活性化を比較した結果、活性化はマウスとヒトで同程度か、マウスの方がやや強かった。ArntのQ-rich領域が欠失すると活性化が約1/100に落ちた。また2種類の組込型ベクターを使用し遺伝子組込み位置の異なる(染色体11番と3番)2種類の酵母を作製したが、3番染色体に組み込んだ方がわずかに活性化が強かった。本結果は、動物実験からヒトへの内分泌攪乱物質のリスクを評価する上で重要である。引き続きヒト・マウスの他、ハムスターやモルモットなど生物種の数を増やし、アッセイ用酵母ライブラリーの充実をめざす。さらに河川水や大気浮遊塵などの環境サンプルをアッセイし、動物種差を調べる予定である。

To solve the problem of the effect of endocrine disinfectant on the difference of bioactivity, one method was used to determine the effect of endocrine disinfectant. One method was used to determine the effect of endocrine disinfectant. One of the main methods of this study is to determine the effect of endocrine disinfectant (AhR) on the bioactivity of AhR. At the beginning of this study, in the first part of this study, it was found that the budding yeast system was established, and several kinds of AhR active strains were tested in this study. Dr. MILLER said that the chromosomes of the children of AhR Arnt should be replaced by yeast. This is the first time that the yeast has been introduced into the Cyp1A1 system. The results show that the Ahr/Arnt system is active because of the activity of the system. The results show that the yeast is active. The results were compared with the results of the activation of AhR/ Arnt system, the results of which were compared, the results of the results were compared, the results of the results were compared, and the results were compared with the results of the results of the study. The lack of activity in the field of Arnt Q-rich is about one hundred percent. The two-fold chromosome was used as a marker, and the second-generation yeast was used as a marker, and the third-fold chromosome was used to enhance the activity of the yeast. The results of this result show that the endocrine disorder is the most important factor in this result. Please tell me that you can count the number of organisms and fill them with yeast. The water supply of the river, the floating water, the environment, the environment.

项目成果

八木孝司: "クローズアップ実験法総集編"葛西文明〈(株)羊土社〉. 213 (2002)

Takashi Yagi：“特写实验方法汇编”Kasai Bunmei（Yodosha Co., Ltd.）213（2002）。

中山亜紀: "ベンゼン代謝生成物による染色体異常誘発リスクの評価"放射線生物研究. 36巻2号. 120-135 (2001)

Aki Nakayama：“苯代谢物诱导染色体畸变的风险评估”放射生物学研究，第 36 卷，第 2 期，120-135 (2001)。