劣性高発がん性遺伝病細胞における突然変異の解析

隐性高致癌遗传病细胞突变分析

• 批准号: 03152066
• 负责人: 八木 孝司
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03152066/
• 关键词: 高発がん性遺伝病; DNA修復; 突然変異; 色素性乾皮症; 小脳性運動失調症; 紫外線; ガンマ線

ヒト正常細胞および色素性乾皮症(XP)A,C,F群細胞で生ずる自然突然変異の種類をシャトルベクタ-pZ189を用いて調べた。いずれの細胞においても50%以上は欠失変異であった。残りは塩基対置換変異であり、その中でトランスバ-ジョンの割合が紫外線誘発突然変異の場合と比べて、有意に高かった。紫外線誘発突然変異の場合はいずれの細胞においてもG:C→A:Tトランジションの割合が高いが、XP細胞においてはそれがより有意に高かった。マウス細胞における紫外線誘発突然変異の種類をシャトルベクタ-pYZ289を用いて調べ、ヒト正常およびXP細胞の場合と比較した。塩基対置換変異のうち91%はG:C→A:Tトランジションであり、これはヒトA群XP細胞における紫外線誘発変異の割合に近く、ヒト正常細胞の場合より有意に高かった。これは分子レベルでも質的にマウスのDNA修復は正常ヒトと異なることを示す。ヒト正常細胞および小脳性運動失調症(AT)患者細胞におけるガンマ線誘発突然変異の頻度をpZ189を用いて調べたが、20グレイ照射までは両者に差は見られなかった。DNA二本鎖切断の修復をヒト正常細胞とAT細胞で比較するため、制限酵素AvaIで1カ所切断されるシャトルベクタ-pZ189Avaを作成し、細胞内で起こるDNA鎖再結合の割合と正確さを調べた。両者において、切断されたpZ189Avaが再結合される割合に差がなかったが、再結合の正確さは正常細胞の方が有意に高かった。誤った再結合部の塩基配列変化を調べると、AT細胞においては切断末端部付近の数〜数十塩基の欠失を有するものが大部分であったが、正常細胞ではそれらは少なく、大きな挿入を有するものの割合が高かった。このことはAT細胞のガンマ線高感受性の機構として、DNA二本鎖切断の再結合修復の正確度が低いことがその原因の1つである可能性を示す。

Normal cells and Xeroderma pigmentosum (XP) A, C, F groups of cells are naturally and suddenly different types of cells. More than 50% of the cells are missing. In case of sudden change in UV induction, the change in UV induction is higher than that in case of intentional change. UV induced sudden changes in the situation of cells in the G: C → A: T transition between high and low levels of XP cells in the C: C → A: T transition between high and low levels. UV-induced sudden changes in cell types are described in detail below. 91% of all cell types are G: C → A: T. The cell type A XP cells are UV-induced. The DNA repair of these molecules is normal. The frequency of sudden changes in normal cells and small ataxia (AT) patients 'cells induced by radiation was adjusted by pZ189, and the frequency of changes in normal cells induced by radiation was adjusted by pZ20. DNA lock repair in normal cells compared to AT cells, the restriction enzyme AvaI was used to make DNA lock repair in cells, and DNA lock recombination was regulated correctly. PZ 189 Ava is re-combined with PZ 189 Ava and PZ 189 Ava is re-combined with PZ 189 Ava and PZ 189 Ava The number of base pairs in the wrong combination part is adjusted, and the number of base pairs in the middle of the AT cell is reduced. The number of base pairs in the normal cell is reduced. The mechanism of high sensitivity of AT cells, the accuracy of DNA double lock cleavage and recombination repair are shown.

项目成果

Shin-ichi Moriwaki: "Analysis of N-methyl-N-nitrosourea-induced mutations in a shuttle vector plasmid propagated in mouse O^6-methylguanine-DNA methyltransferase-deficient cells in comparison with proficient cells." Cancer Research. 51. 6219-6223 (1991)

Shin-ichi Moriwaki：“与正常细胞相比，在小鼠 O^6-甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶缺陷细胞中繁殖的穿梭载体质粒中 N-甲基-N-亚硝基脲诱导的突变分析。”

Takashi Yagi: "Analysis of point mutations in an ultraviolet-irradiated shuttle vector plasmid propagated in cells from Japanese xeroderma pigmentosum patients in complementation groups A and F." Cancer Research. 51. 3177-3182 (1991)

Takashi Yagi：“对在互补组 A 和 F 的日本色素性干皮病患者细胞中繁殖的紫外线照射穿梭载体质粒中的点突变进行分析。”

Chikako Nishigori: "Altered O^6-alkylguanine-DNA alkyltransferase activity in cell strains originating from mouse skin tumors induced by UV irradiation." Cancer Research. 51. 2425-2429 (1991)

Chikako Nishigori：“改变了源自紫外线照射诱导的小鼠皮肤肿瘤的细胞株中的 O^6-烷基鸟嘌呤-DNA 烷基转移酶活性。”

Mayumi Sato: "Protective effects of sodium selenite on killing and mutation by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine in E.coli." Mutation Research. 250. 73-77 (1991)

Mayumi Sato：“亚硒酸​​钠对大肠杆菌中 N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍的杀灭和突变的保护作用。”

Takashi Yagi: "UV-induced base substitution mutations in a shuttle vector plasmid propagated in group C xeroderma pigmentosum cells." Mutation Research. (1992)

Takashi Yagi：“在 C 组色素性干皮病细胞中繁殖的穿梭载体质粒中，紫外线诱导的碱基取代突变。”