课题基金 / 基金详情

生きた細胞で代謝調節を視覚化する技術

生きた細胞で代謝調節を視覚化する技術
活细胞代谢调节可视化技术
批准号：
18651094
负责人：
伊藤 隆司
金额：
$2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2006 至 2007
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18651094/
关键词：
代謝物Sアデノシルメチオニン蛍光レポーター遺伝子回路ポジティブフィードバックFRET蛍光蛋白質ペリプラズム結合蛋白質酵母円順列変異

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项目成果

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S-adenosylmethionine(SAM)は生体分子への主要なメチル基供与体であり、非常に多くの代謝経路に関与する重要な代謝物である。SAMの動態解析から、代謝調節や細胞周期等の動態をより深く理解するための重要な基礎的知見が得られるど期待されている。食品・醸造産業ではSAMの高生産が重要な課題とされており、その動態解析には応用面からの要望も高い。しかし、SAMは不安定な化合物であり、分析化学的手法による計測が困難である。計測できたとしても細胞の破砕を伴うことから連続的にリアルタイムで計測するまでには至っていない。そこで非破壊的計測が可能なシステムの構築を試みた。SAMセンサー部分としてはSAMをコリプレッサーとする大腸菌のDNA結合蛋白質MetJを利用し、MetJにVP16転写活性化ドメインおよび蛍光蛋白質Venusを連結したセンサーレポーター分子をデザインし、この遺伝子をmetオペレーターの下流に挿入した。細胞内SAM濃度が上昇すると、このセンサーレポーターにSAMが結合し、metオペレーターへの親和性が増大する。その結果、自身をコードする遺伝子の発現を上昇させるというポジティブフィードバックが作用する。このフィードバックの作用はVenusの蛍光強度変化として検出することができる。この蛍光を測定することにより細胞内SAM濃度の動態を追跡できる。この系で、実際に培地中Met濃度変化や代謝経路の変異による細胞内SAMの変化の検出に成功した。
期刊论文(1)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
生細胞における代謝物の動態解析:S-adenosylmethionineセンシングシステムの開発
活细胞代谢物的动态分析：S-腺苷甲硫氨酸传感系统的开发
DOI： --
发表时间： 2007
期刊：
影响因子： --
作者： [梅山大地, 岡田悟, 太田一寿, 伊藤隆司]
通讯作者： 伊藤隆司
構造多型への構成的アプローチ：Cas9ニッケースとスプリントDNAによる誘導
  • 批准号：
    24K02015
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $11.9万
  • 财政年份：
    2024
  • 负责人：
    伊藤 隆司
  • 依托单位：
    Kyushu University
エピジェネティクスの基本動作原理に基づくメチロームの合成
  • 批准号：
    22K19276
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
  • 资助金额：
    $4.16万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    伊藤 隆司
  • 依托单位：
    Kyushu University
選択性の高いタンパク質間相互作用制御化合物の探索技術
  • 批准号：
    20651052
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.05万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    伊藤 隆司
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
半導体デバイスの超微細化に向けた革新的な高濃度極浅接合形成技術の創出
  • 批准号：
    19656085
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.05万
  • 财政年份：
    2007
  • 负责人：
    伊藤 隆司
  • 依托单位：
    Tohoku University
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