がん抑制遺伝子候補としての母性発現インプリント遺伝子群の単離

分离母系表达的印记基因作为抑癌基因候选

基本信息

批准号：
11138220
负责人：
伊藤隆司
金额：
$ 1.41万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11138220/
关键词：
インプリンティング核移植

项目摘要

1)核移植マウスの作製と評価東京農大の河野グループにより、脱核したB6マウス卵に(JFxJF)F1および(JFxB6)F1の受精卵核を移植したマウスが作製された。B6およびJFのミトコンドリアDNA上の制限酵素部位型を同定、PCR-RFLPによって両各移植系統のミトコンドリアDNAを検査した。その結果、前者11匹中に1匹、後者19匹中に4匹、移植核に付着した細胞質に由来すると思われるJFミトコンドリアの混入を認めた。これらを除いた核移植マウスはミトコンドリア多型の影響を排したアレリックメッセージディスプレイ(AMD)スクリーニングに利用できると考えられたので、これらの各種臓器からRNAを調製して、スクリーニングに着手した。2)新規インプリント遺伝子MA10の発見骨格筋を用いたAMDスクリーニングにより新規の父性発現遺伝子MA10を同定した。MA10は、骨格筋や脳では父性アレルのみが発現しているが、腸管や精巣ではほぼ両アレル性に発現していることから、組織特異的なインプリンティングを受けていることが判明した。MA10のcDNAには明らかなORFは認められなかった。またMA10のcDNAをFISHでマップすると7番染色体遠位部にマップされた。ここはヒトのBeckwith-Wiedemann症候群(BWS)の原因座位に相当する領域であったので、この領域のコンティグを用いて詳細なマップを行い、母性発現遺伝子Kvlqt1領域に由来する新しいアンチセンス転写物であることを明らかにした。overgrowth syndromeであるBWSでは種々の腫瘍が好発することが知られており、MA10の機能には大変に興味深いものがある。

1）对核移植小鼠的制备和评估东京农业大学的KONO组产生了小鼠，其中（JFXJF）F1的受精卵核和（JFXB6）F1植入了分裂的B6小鼠卵中。鉴定了B6和JF线粒体DNA上的限制酶位点类型，并通过PCR-RFLP检查了两种移植线的线粒体DNA。结果，发现11只前动物中的一只和后一种动物中有4只被JF线粒体污染，JF线粒体似乎起源于附属于移植核的细胞质。核转移的小鼠没有这些小鼠可用于等位基因消息显示（AMD）筛查，从而消除了线粒体多态性的影响，因此从这些各种器官中制备了RNA，并进行了筛选。 2）发现新型印迹基因MA10的发现，通过使用骨骼肌筛选AMD筛选，鉴定出新型的亲父表达的基因MA10。尽管只有父亲等位基因在骨骼肌和大脑中表达，但在肠和睾丸中几乎表达了双质体，发现它是组织特异性的印记。在MA10的cDNA中未发现明显的ORF。此外，当将MA10 cDNA与鱼映射时，它被映射到7号染色体的远端部分。该区域对应于人类贝克维斯 - 韦德曼综合征（BWS）的因果基因座（BWS），因此使用该区域的重叠群进行详细的地图，以表明它是一个新的Antense Antense Transcript the Maternitally fennemally fenne gene kv的kv kv。众所周知，各种肿瘤在BWS中很常见，一种过度生长综合征，MA10的功能引起了人们的极大关注。