細胞内輸送障害是正に着目した難治性心疾患治療法の開発

以纠正细胞内转运障碍为重点的顽固性心脏病治疗方法的开发

• 批准号: 18659222
• 负责人: 木村 彰方
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659222/
• 关键词: 細胞内輸送障害; 不整脈; 遺伝子変異; 低分子化合物; Brugada症候群; 細胞内輸送; チャネル分子; Brudaga症候群; SRタンパク; アイソフォーム; 小胞体; チャネル変異; サルコレンマ; QT延長症候群; カテコラミン誘発性心室頻拍

難治性心疾患の一部は遺伝子変異による機能性タンパクの細胞内輸送障害に起因する。そこで本研究では、生体タンパクの細胞内輸送障害にっいて、病因となる遺伝子変異と細胞内輸送障害に関わる分子間の機能連関異常を解明するとともに、その異常を是正するためのペプチドや低分子化合物のスクリーニングシステムを開発し、それに基づく治療薬の開発を目的とした。本年度は以下の成果を得た。QT延長症候群患者に見出された2種の変異について、それらがいずれもこれまでに知られていない新たなメカニズムで細胞内輸送障害を来すこと、すなわち1種はゴルジ体内でのサブユニット結合異常を来すこと、他の1種はER内貯留を来すことを明らかにした。また、点変異体を作製し、それらを用いた機能解析から、前者はLeuリピートの構造異常によること、後者は新たなER貯留シグナルが産生されることによることを解明した。ついで、それらの変異イオンチャネルにmyc-tagを付加した遺伝子を安定して発現する細胞株を樹立し、これを用いてチャネル輸送障害を解除する低分子化合物のスクリーニング系を開発した。種々の変異体を用いた実験から、このスクリーニング系が細胞表面に発現したチャネルの定量的測定を可能とすることを確認した。ついでこれらの細胞株を用いて、約3,000種の低分子化合物の一次スクリーニングを行い10種の候補化合物を同定した。そこで、さらに二次スクリーニングを進めると共に、8,000種の低分子化合物のスクリーニングを実施している。一方、Brugada症候群患者に見出されたサルコレンマタンパク変異による機能変化を検討したところ、当該遺伝子変異は心筋Naチャネル複合体のイオンチャネル機能変化を来すこと、スモールサブユニット(SCN1B)およびMOG1と結合することを見出した。

The cause of refractory heart disorder is する. A part of the <s:1> offspring 伝 has a change in による functional タ パ パ <s:1> intracellular transport disorder に. そ こ で this study で は, body タ ン パ ク の intracellular delivery handicap of に っ い て, causes と な る heritage 伝 sub - different と intracellular delivery handicap of に masato わ る intermolecular の abnormal function even masato を interpret す る と と も に, そ の is abnormal を す る た め の ペ プ チ ド や low molecular compound の ス ク リ ー ニ ン グ シ ス テ ム を open 発 し, そ れ に base づ く treatment 薬 の For the purpose of を, と と た. For the current year, the following を achievements を obtained た. Extended QT syndrome patients に shows さ れ た two の - different に つ い て, そ れ ら が い ず れ も こ れ ま で に know ら れ て い な い new た な メ カ ニ ズ ム で intracellular delivery handicap of を to す こ と, す な わ ち one は ゴ ル ジ body で の サ ブ ユ ニ ッ ト combines anomaly を to す こ と, 1 he の は ER retention within を to す こ と を Ming ら か に し た. ま た, point 1 - を し, そ れ ら を with い た function analytical か ら, the former は Leu リ ピ ー ト の tectonic anomaly に よ る こ と, the latter は new た な ER retention シ グ ナ ル が produce さ れ る こ と に よ る こ と を interpret し た. つ い で, そ れ ら の - different イ オ ン チ ャ ネ ル に myc - tag を plus し た heritage 伝 を son settle し て 発 now す る cell lines を し, こ れ を with い て チ ャ ネ ル conveying handicap of を remove す る low molecular compound の ス ク リ ー ニ ン グ started を 発 し た. Kind of 々 の - variant を with い た be 験 か ら, こ の ス ク リ ー ニ ン グ department が cell surface に 発 now し た チ ャ ネ ル の quantitative determination of を may と す る こ と を confirm し た. つ い で こ れ ら の cell lines を with い て, about 3000 kinds of の low molecular compound の a ス ク リ ー ニ ン グ を line い 10 を の alternate compounds with fixed し た. Secondary ス そ こ で, さ ら に ク リ ー ニ ン グ を into め る と に, 8000 kinds of の low molecular compound の ス ク リ ー ニ ン グ を be applied し て い る. Party, に Brugada syndrome patients see さ れ た サ ル コ レ ン マ タ ン パ ク - different に よ る function - the を beg し 検 た と こ ろ, when the legacy 伝 sub - different は heart muscle Na チ ャ ネ ル complex の イ オ ン チ ャ ネ ル function - the を to す こ と, ス モ ー ル サ ブ ユ ニ ッ ト (SCN1B) お よ び MOG1 と combining す る こ と を see out Youdaoplaceholder0 た.

项目成果

A compound heterozygous mutation in KCNQ1 associated with long QT syndrome

KCNQ1复合杂合突变与长QT综合征相关

• 发表时间: 2008
• 作者: 佐藤光希;他
• 通讯作者: 他

Cardiac ankyrin repeat protein gene (ANKRDl)mutations inhypertrophic cardiomyopathy

肥厚型心肌病中的心脏锚蛋白重复蛋白基因（ANKRD1）突变

• 发表时间: 2009
• 期刊: J Am Coll Cardiol (印刷中)
• 作者: Ueda K;Arimura T
• 通讯作者: Arimura T

A novel mutation in KCNQ1 associated with a potent dominant negative effect as the basis for the LQT1 form of the long QT syndrome

• DOI: 10.1111/j.1540-8167.2007.00889.x
• 发表时间: 2007-09-01
• 期刊: JOURNAL OF CARDIOVASCULAR ELECTROPHYSIOLOGY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Aizawa, Yoshiyasu;Ueda, Kazuo;Antzelevitch, Charles
• 通讯作者: Antzelevitch, Charles

Role of HCN4 channel in preventing ventricular arrhythmia

• DOI: 10.1038/jhg.2008.16
• 发表时间: 2009-02
• 期刊: Journal of Human Genetics
• 影响因子: 3.5
• 作者: K. Ueda;Y. Hirano;Y. Higashiuesato;Yoshiyasu Aizawa;Takeharu Hayashi;Natsuko F. Inagaki;T. Tana;Y. Ohya;S. Takishita;H. Muratani;M. Hiraoka;A. Kimura

Structural analysis of four and half LIM protein-2 in dilated cardiomyopathy

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2007.03.128
• 发表时间: 2007-05-25
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Arimura, Takuro;Hayashi, Takeharu;Kimura, Akinori
• 通讯作者: Kimura, Akinori