マイクロRNAを新規分子指標に用いた新しい神経・高次脳機能解析

使用 microRNA 作为新的分子指标进行新的神经和高级脑功能分析

基本信息

批准号：
19659073
负责人：
北條浩彦
金额：
$ 2.11万
依托单位：
National Center of Neurology and Psychiatry
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659073/
关键词：
マイクロRNA DNAチップ神経分化高次脳機能

项目摘要

近年、ゲノム上に数百〜千近く存在するタンパク質をコードしないマイクロRNA遺伝子とその機能が注目されている。このマイクロRNAが関わる遺伝子発現調節は、RNAi(RNA interfbrence)マシーンが関与する新規の翻訳抑制機構であり、しかも、一種類のマクロRNAが複数のターゲット遺伝子の発現を制御するまったく新しい遺伝子発現調節機構を担っている。本研究は、このマイクロRNAを新規分子指標に用いた、まったく新しい観点からの高次脳機能解析を行う。本年度は、昨年度に引続き研究代表者らが開発したDNAチップ(Genopal-MICM)を用いてマウスP19細胞の神経細胞分化過程におけるマイクロRNAの発現プロファイルを解析した。そして、神経細胞分化過程におけるマイクロRNAとそのターゲット遺伝子の関連を解析した。その結果、let-7マイクロRMが神経分化過程で顕著に増加し、そのターゲット遺伝子であるHmga2遺伝子の発現が、let-7マイクロRNAの増加に伴って翻訳レベルで抑制されていることを見出した。Hmga2タンパク質が細胞の更新に関わると考えられていることから、Hmga2タンパク質のlet-7マイクロRNAによる発現抑制が神経細胞分化に伴う細胞分裂停止と形態変化に関与している可能性が考えられる。マイクロRNAライブ・アッセイ用レポータープラスミド・ライブラリーの作製に関しては、約120個のマイクロRNAをターゲットとするそれぞれのクローンの構築を完成させることができた。

近年来，不编码基因组中存在的蛋白质的microRNA基因吸引了注意力及其功能。这种涉及microRNA的基因表达调节是一种涉及RNAi（RNA干扰）机器的新型翻译抑制机制，此外，它是控制基因表达调节的全新机制，其中一种大巨星调节多个靶基因的表达。这项研究使用该microRNA作为一种新的分子指标来从全新的角度分析较高的大脑功能。今年，我们使用主要研究者自去年以来由主要研究者开发的DNA芯片（基因最好的MICM）分析了小鼠p19细胞神经元分化过程中microRNA的表达谱。然后分析神经元分化过程中microRNA与其靶基因之间的关系。结果，我们发现在神经分化过程中Let-7微米显着增加，并且其靶基因HMGA2基因的表达在转化水平上被抑制，而Let-7 microRNA的增加。由于HMGA2蛋白被认为参与细胞更新，因此let-7 microRNA可能抑制HMGA2蛋白的表达可能参与细胞分裂的停滞和与神经元分化相关的形态学变化。关于为microRNA实时测定创建报告基因质粒库，我们能够完成每个针对约120 microRNA的克隆的构造。