タバコ、クロムに関連したヒト肺癌でのp53、ras遺伝子の特異的塩基置換の検討

检查与烟草和铬相关的人肺癌中 p53 和 ras 基因的特定碱基取代

• 批准号: 04454346
• 负责人: 門田 康正
• 金额: --
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04454346/
• 关键词: 肺癌; p53遺伝子; PCR; SSCP; クロム肺癌; 喫煙; 点突然変異

1985年から89年の5年間に,徳島大学医学部附属病院第二外科で外科的に切除された肺癌54例を対象とし,原発巣の凍結組織標本から凍結切片を採取した.ついでこれからRNAを抽出し,cDNAを作成し,p53遺伝子のコドン101〜300の領域をPCR-SSCP(polymerase chain reaction single strand conformation polymorphism)法により点突然変異の有無を検出した.検出し得たp53遺伝子の構造異常例は対象54例中の27例(50%)である.組織型別にみれば,喫煙と関連が強い扁平上皮癌では14/21(67%),小細胞癌では3/5(60%)に異常を認め,関連が少ない腺癌では7/24(29%)であった.p53遺伝子の異常を認めた症例のうち喫吸歴の聴取が得られた22例のBI(Brinkman Index)の平均は1078,異常を認めない症例のうち吸煙歴の聴取が得られた23例のBIは666であった.また,非喫煙者10例中p53遺伝子に異常を認めたのは1症例のみであった。以上の所見より,p53遺伝子の構造異常と喫煙の関連性が強く示唆される.PCR-SSCP法で異常があった27症例のうち8例に関して塩基配列が決定できた.なお,残りの症例についても今後,塩基配列を決定し,点突然変異の特異なパターンを検討する. われわれの教室で保在し得ている9例のクロム肺癌について,ホルマリン固定パラフィン包理切片よりDNAを抽出し,p53遺伝子のエクソン5からエクソン8に関して,PCR-SSCP法にて解析中である.エクソン7に1例,エクソン8に2例それぞれ構造異常をもつ症例を認めている.ダイレクトシークエンス法にて塩基配列を決定し,クロム肺癌に特異的な点突然変異のパターンが認められるか否かを検討する.

From 1985 to 1989, 54 cases of lung cancer were resected by the Second Surgery Department of the Affiliated Hospital of Chang Yong University Medical School. RNA was extracted,cDNA was generated,p53 gene was detected from 101 to 300 regions by PCR-SSCP(polymerase chain reaction single strand conformation polymorphism) method. 27 out of 54 (50%) structural anomalies were detected. Histological type, smoking and association: strong squamous cell carcinoma: 14/21(67%), small cell carcinoma: 3/5(60%), abnormal identification: association: small adenocarcinoma: 7/24(29%), abnormal identification: p53, abnormal identification: all smoking and association: 22 BI (Brinkman Index) Average 1078, abnormal recognition of cases of smoking cases of 23 cases of BI 666. The p53 gene was abnormal in 10 cases of non-smokers. PCR-SSCP analysis revealed 27 cases of structural anomalies and 8 cases of structural anomalies. In the future, the base alignment will be determined, and the sudden change of the point will be discussed. 9 cases of lung cancer were detected in the classroom. DNA was extracted from the fixed sections. p53 gene was detected in the 5 cases. 1 case in 7 cases, 2 cases in 8 cases and 2 cases in 7 cases. The method for determining the base alignment of lung cancer can be used to determine whether lung cancer is specific to the site of sudden change.

项目成果

Kazuya Kondo et.al.: "Mutation in the p53 thmor suppreson gene in Primary lung cancer in Japan." Biochemical and Biophysical Research Communications.183. 1139-1146 (1992)

Kazuya Kondo 等人：“日本原发性肺癌中 p53 肿瘤抑制基因的突变。”