クロムに曝露したヒト肺癌における発癌過程の分子生物学的解明

铬接触人类肺癌致癌过程的分子生物学阐明

• 批准号: 07457295
• 负责人: 門田 康正
• 金额: $ 4.86万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07457295/
• 关键词: クロム肺癌; p53遺伝子; ras遺伝子; LOH; gene instability; enriched-PCR; microsatellite法

クロムに暴露した肺癌症例19例に関して、p53遺伝子の異常を検索した。クロム肺癌のp53遺伝子の異常の頻度は19例中4例(21%)と低かった。p53遺伝子以外の遺伝子について検索している。ras遺伝子と3p,5q,9p,11pのLOHとgenetic instabilityに関して検索中である。1) クロム肺癌24例のパラフィン包埋材料よりDNAを抽出し、K-rasのcodon12,13の領域について、PCRにて増幅し、制限酵素BstNIにて切断した。wild typeのK-ras codon12は、BstNIにて切断されるが、mutant K-rasは切断されない。次に、切断された断片に対して同じprimerにてPCRをかける。少しでも切断されていない断片が残っていると増幅される。この方法(Enriched-PCR)を使うと、高感度でK-rasの点突然変異を検出することができる。パラフィン包埋材料より抽出したDNAでPCRにて増幅できたのは、14例であった。そのうち1例がK-rasのcodon12に点突然変異を認めた。現在、capillary PCRを使って増幅している。また、codon13については、制限酵素PflmIにて検索中だある。2) クロム肺癌24症例の腫瘍部と非腫瘍部よりmicrodissectionにてDNAを抽出した。腫瘍部と非腫瘍部に関して3p領域の3つのmicrosatellite marker(D3S647,D3S1289,D3S966)にてLOHとgenetic instabilityを検索中である。

<s:1> ロムに exposed た lung cancer cases 19 に related to <s:1> て, p53 remnant 伝 lesion abnormalities を検 cable た. In 19 cases of lung cancer, 4 cases (21%) had と low 伝 った. In addition to the 伝 sub of p53, the 伝 sub に 伝 て検 て検 sotile て る る る. The 伝 subunits of ras と3p,5q,9p,11p <s:1> LOHとgenetic instabilityに is related to である in て検 suo である. 1) ク ロ ム 24 cases of lung cancer の パ ラ フ ィ ン embedding material よ り を DNA extraction し, K - ras の codon12, 13 の field に つ い て, PCR に て raised the limitations し, enzyme BstNI に て cut し た. wild type <s:1> K-ras codon12 されるが, BstNIにて cut されるが, mutant K-ras されるが cut されな にて. Then に, cut the された fragment に against <s:1> て and じprimerにてPCRを て ける ける. Less: で で cut off: されて な な な broken piece: が residual: って ると ると increase: される. こ の way (Enriched - PCR) を make う と, Gao Gan で K - ras の point suddenly - different を 検 out す る こ と が で き る. Youdaoplaceholder0 <s:1> embedded materials よ よ よ extracted <s:1> たDNAでPCRにて increase で た た た <s:1> よ よ であった, 14 cases であった. Youdaoplaceholder0 うち one case がK-ras <s:1> codon12に point suddenly changes を recognize めた. Now, capillary PCRを increases って by て る る. Youdaoplaceholder0, codon13に にて て, restriction enzyme PflmIにて検 in the rope だある. 2) In 24 cases of ロム lung cancer, the abscess と and the non-abscess よ <s:1> microdissectionにてDNAを extraction た た. The abscess と the non-abscess に is related to the <s:1> て in the 3p field <s:1> 3 と を検 microsatellite marker(D3S647,D3S1289,D3S966)にてLOHとgenetic instabilityを検 soin である.