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アラキドン酸12-リポキシゲナーゼ遺伝子の発現調節機構に関する研究

花生四烯酸12-脂氧合酶基因表达调控机制研究

基本信息

批准号：
05670126
负责人：
吉本谷博
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670126/
关键词：
アラキドン酸 12-リポキシゲナーゼ遺伝子転写調節機構 HEL細胞

项目摘要

アラキドン酸12-リポキシゲナーゼは、アラキドン酸などの炭素20個の不飽和脂肪酸の12番目の炭素に分子状酸素を導入して、12-ヒドロペルオキシエイコサテトラエン酸を生成する酸素添加酵素である。これまで私達は、ヒトを含めたいくつかの動物種の12-リポキシゲナーゼの酵素学的・免疫学的研究ならびに分子生物学的研究によって、12-リポキシゲナーゼには『血小板型』および『白血球型』の2種類のアイソフォームが存在することを明らかにした。さらに最近になって、ヒトおよびブタの12-リポキシゲナーゼの遺伝子を単離し、遺伝子の長さはそれぞれ約15Kbと8Kbで、いずれも14個のエクソンから構成されていることを示した。ヒトの12-リポキシゲナーゼ遺伝子のプロモーター領域の配列や、この遺伝子がクロモソーム17番の短腕に存在していることなども明らかにした。今回ヒトの12-リポキシゲナーゼの遺伝子の転写調節機構を調べるために、酵素遺伝子の5'-上流領域をルシフェラーゼ遺伝子の上流に組み込んだプラスミドを構築した。これを12-リポキシゲナーゼを発現しているヒト赤白血病(HEL)細胞にリポフェクション法で導入し、ルシフェラーゼの酵素活性を化学発光によって測定することによって、12-リポキシゲナーゼ遺伝子の発現調節機構を解析した結果、AP-2結合配列領域に遺伝子の発現を抑制する可能性があることが示唆された。今後この因子が、実際に酵素遺伝子の転写調節に関与しているかを調べるために、ゲルシフト法やDNaseIフットプリント法を用いて解析して行く予定である。

12-unsaturated fatty acids and 12-unsaturated fatty acids are introduced into the reaction system. This research includes the study of enzymology, immunology, molecular biology, and the existence of two types of systems, namely, the platelet-type system and the leucocyte-type system. The most recent 12-part solution was prepared from 15Kb and 8Kb, and the length of the solution was 14 Kb and 8Kb. The 12-bit array of the 12-bit array of the 17-bit array of the 17-bit array of the 12-bit array of the 17-bit array of the 17-bit array of the 12-bit array of the 17-bit Now, the 12-channel gene regulation mechanism of enzyme gene is constructed. The results of the analysis of the regulatory mechanism for the expression of AP-2 in leukemia (HEL) cells and the possibility of inhibiting the expression of AP-2 in the binding domain are presented. In the future, the factors involved in the regulation of enzyme gene expression will be analyzed in the context of the regulation of enzyme expression.