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アラキドン酸12‐リポキシゲナーゼの遺伝子クローニングとその発現調節機構

花生四烯酸12-脂氧合酶基因克隆及其表达调控机制

基本信息

批准号：
04670145
负责人：
吉本谷博
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アラキドン酸12‐リポキシゲナーゼは、アラキドン酸などの炭素20個の不飽和脂肪酸の12番目の炭素に分子状酸素を導入して、12‐ヒドロペルオキシ酸を生成する酸素添加酵素である。これまで私達は、種々の動物種の12‐リポキシゲナーゼの酵素学的・免疫学的研究によって、12‐リポキシゲナーゼには「血小板型」および「白血球型」の2種類の酵素が存在することを示し、それぞれの酵素の例としてヒト血小板およびブタ白血球の12‐リポキシゲナーゼcDNAをクローニングし、それらの一次構造を明らかにしてきた。本研究計画では、ヒトおよびブタのゲノムライブラリーから12‐リポキシゲナーゼの遺伝子を単離し、その構造を明らかにした、すなわち、ヒトおよびブタの12‐リポキシゲナーゼcDNAをプローブとして、それぞれの遺伝子ライブラリー(EMBL3)をスクリーニングしたところ、いくつかの陽性クローンが得られ、それらの塩基配列を決定した。ヒトおよびブタの12‐リポキシゲナーゼ遺伝子はその長さがそれぞれ15kbと8kbであったが、いずれも14個のエクソンと13個のイントロンから構成されていた。これらの遺伝子のプロモーター領域の塩基配列を調べたところGCボックスがヒトでは4ヶ所、ブタでは9ヶ所、AP2結合配列がヒトでは3ヶ所、ブタでは2ヶ所認められた。また、ヒトの遺伝子では、グルココルチコイド結合配列に類似したエレメントや、β‐グロビン遺伝子のプロモータに認められるCACCCボックスに似た配列が存在していた。さらに、Fluorescence in situ hybridization(FISH)によって、12‐リポキシゲナーゼ遺伝子が、17番染色体のp13.1に局在していることが明らかになった。

アラキドン acid 12-リポキシゲナーゼは, アラキドン acid などのcarbon 20 pieces, unsaturated fatty acid の12 The 12-ヒドロロペオキシacid is produced by introducing the molecular acid peptide into the methyl carbonate and adding the enzyme である.これまで自达は、kind of 々のanimal speciesの12-リポキシゲナーゼのEnzymological and immunological researchによって, 12-リポキシゲナーゼには "platelet type" and "leukocyte type" 2 types of enzymesがExistenceすることを Showし、それぞれのEnzymeの ExampleとしてヒトPlateletおよびブタWhite Blood Cellの12 ‐リポキシゲナーゼcDNAをクローニングし,それらの一constructを明らかにしてきた. This research project is the legacy of this research project.伝子を単し、そのstructuralを明らかにした、すなわち、ヒトおよびブタの12-リポキシゲナーゼcDNAをプローブとして、それぞれの缝子ライブラリー(EMBL3)をスクリーニングしたところ, いくつかのpositive クローンが got られ, それらの塩塩综合をdeterminationした.ヒトおよびブタの12-リポキシゲナーゼ伝子はその长さがそれぞれ15kbと8k bであったが, いずれも14 pieces of のエクソンと13 pieces of のイントロンから constitute されていた.これらの缝子のプロモーター区の塩综合组を动べたところGCボックスがヒトでは 4 The ブタでは9ヶsho and AP2 are combined with the がヒトでは3ヶsho and the ブタでは2ヶめられた.また、ヒトの伝子では、グルココルチコイドcombination arrangementにsimilar to したエレメントや、β-グしていた。さらに、Fluorescence in situ Hybridization(FISH)によって、12-リポキシゲナーゼ缝子が、Chromosome 17のp13.1にBurning in していることが明らかになった.