造血組織におけるアクチビンの作用機構の解明

阐明激活素在造血组织中的作用机制

• 批准号: 05670905
• 负责人: 内丸 薫
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670905/
• 关键词: アクチビン; ストローマ細胞; basic FGF; PDGF; TGF-β; アクチビンレセプター

1.アクチビンの骨髄ストローマ細胞における産生と作用:(1)ストローマ細胞におけるアクチビンの産生調節機構・作用;マウスストローマ細胞株ST-2,PA-6において,bFGF,PDGFは、用量依存性にアクチビンmRNAレベルを約3時間後をピークとして上昇させ、アクチビンの分泌を促進する。このmRNAレベルの上昇は、ActD処理により消失することから,新たな転写を介したものであると考えられる。また、刺激3時間後のActD処理でmRNAレベルはより長く維持され,CHX処理で上昇することから,アクチビンmRNAの安定性に関わる半減期の短い蛋白の転写,翻訳が、アクチビンの産生調節に関与していることが示唆された。TGF-βは、低濃度でST-2のDNA合成を促進し,高濃度では抑制的に作用する。一方、アクチビンは、用量依存性にDNA合成を促進し、この作用はbFGF,PDGFと相乗効果を示した。(2)ストローマ細胞におけるアクチビンのオートクリンループ;アクチビン添加でヒトストローマ細胞株KM102のアクチビンmRNAレベルの上昇が認められた。ST-2,PA-6,KM102においてアクチビン受容体タイプII,IIBのmRNA発現が認められた(筑波大 桜井武先生との共同研究)。さらに、bFGF,PDGFによるストローマ細胞のDNA合成促進は,アクチビンの特異的抑制因子であるフォリスタチンによって一部抑制された。以上から、bFGF,PDGFの作用に、アクチビンのオートクリンループによる増幅機構の関与が考えられた(投稿中)。2.血液細胞分化と細胞周期制御:in situによる解析が遅滞しているため、PMAによって巨核球系に分化するMegO1s細胞を用いて、血液細胞分化の細胞周期制御を検討した。サイクリンA,B,C,D1,D2,D3,Eの発現をノザン解析で検討した結果、G1/S移行期に細胞周期が停止したままで分化形質の発現増強が観察され、細胞周期を脱却しないことが示唆された。

1. Production and function of Acridin in ST-2,PA-6 cell lines:(1) Regulation mechanism of Acridin production in ST-2,PA-6 cell lines; bFGF,PDGF, dose-dependent Acridin mRNA production increased after about 3 hours, Acridin secretion was promoted. This mRNA is rising, ActD processing is disappearing, and the new mRNA is writing. 3 hours after stimulation, ActD treatment mRNA expression was maintained for a long time,CHX treatment was increased, the expression of protein was decreased at half time, and the expression of protein was decreased at half time. TGF-β promotes ST-2 DNA synthesis at low concentrations and inhibits it at high concentrations. The effect of bFGF and PDGF on DNA synthesis is shown in dose-dependent manner. (2)Cell strain KM102 has an increase in mRNA levels. mRNA expression in ST-2,PA-6,KM102 receptor II,IIB is recognized (joint study with Takeo Tsukuba). DNA synthesis in cells is promoted by bFGF and PDGF, and is partially inhibited by specific inhibitors of DNA synthesis. The function of bFGF,PDGF and the relationship between the increasing amplitude mechanism and the increasing amplitude mechanism are discussed above (in submission). 2. Blood cell differentiation and cell cycle control:in situ analysis and analysis of cell cycle, PMA analysis and differentiation of MegO 1s cells, blood cell differentiation and cell cycle control The results of the analysis of the development of cell cycle A,B,C,D1,D2,D3,E showed that the cell cycle stopped during the G1/S transition period, and the differentiation quality increased.