权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

血液幹細胞特異抗原、tieとCD34を介するシグナル伝達機構

造血干细胞特异性抗原、Tie和CD34介导的信号转导机制

基本信息

批准号：
05670919
负责人：
山口直人
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670919/
关键词：
血液幹細胞 tie CD34 シグナル伝達

项目摘要

血液幹細胞表面に発現する抗原蛋白の構造から、細胞質ドメインにチロシンリン酸化酵素を持つものとチロシンリン酸化酵素の構造は持たないが細胞質ドメインはセリン残基がリン酸化されるものとがあることが明かにされてきた。本研究では、それら特異的抗原のうちで、後者のタイプであり細胞接着を介したシグナル伝達に関与することが推測されているCD34分子と、前者のタイプの受容体型チロシンリン酸化酵素であるc-tie分子それぞれの造血における役割を明らかにする目的で実験を行った。まず、CD34分子が細胞接着を介して造血に関与するのかを調べた。CD34に対する単クローン抗体4A1を作製し、ストローマ細胞とCD34陽性細胞との共培養系に4A1抗体を添加すると造血抑制が起こった。さらに、幹細胞系細胞株よりCD34分子を精製して骨髄単核細胞の培養系に添加すると、コロニー形成が抑制された。従って、造血の場において、CD34分子はストローマ細胞と血液幹細胞との相互作用に関係していることが明かとなった。次に、相互作用する分子の検索のために、CD34分子の細胞外領域とIgG1定常部位とのキメラ遺伝子を作製し、キメラ遺伝子安定導入細胞を作製した。培養上清からキメラ蛋白を精製し結合試験を行ったところ、キメラ蛋白に特異的に結合するストローマ細胞蛋白質を見いだした。現在、その分子の同定を急ぐとともにCD34を介するシグナル伝達に関わるかどうか検討している。c-tieに関しては、リガンドを明らかにするためにc-tieの細胞外領域とIgG1定常部位とのキメラ遺伝子を作製した。今後FACSなどを用いて、リガンドとの結合を検討する予定である。以上、CD34及びc-tie分子に対するリガンドが明らかとなれば、リガンド結合によりそれぞれの細胞質内ドメインにphysical associationする蛋白質を同定できシグナル伝達経路が判明するので、幹細胞のシグナル伝達経路の解明にはリガンドの同定が最も重要なポイントとなろう。

On the cell surface of the blood, the antigen protein was detected in the blood, and the acidifying enzyme was detected in the cell surface and the cell surface of the cell. In this study, the specific antigens were detected, and the following antigens were detected. In this study, the specific antigens were detected, and then the cells were induced to express CD34 molecules. The former was linked to the receptive body type, acidified enzymes, c-tie molecules, hematopoietic cells, hematopoietic cells, hematopoietic cells The cells of CD34 molecules then mediate between hematopoietic cells and hematopoietic cells. CD34 antibodies were detected by 4A1 antibody, and hemopoietic suppression was induced by adding 4A1 antibody to the co-cultured cell line CD34. The cell line of the cell line, the CD34 molecule, the bone, the nucleus, the cell, the culture line, the cell line. Cells, hematopoietic cells, CD34 molecules, blood cells, blood cells, interactions, blood cells, blood cells, blood cells The secondary and interacting molecules, the CD34 molecules, the extracellular domain, the IgG1 stationary part, and the diazepam, the stable parts of the extracellular domain, the extracellular domain, the stationary part of the cell, and the diazepam of the second, interacting molecules. The supernatant of the supernatant was cultured in combination with the supernatant, and the combination of the supernatant and the specific protein was performed in the supernatant and the supernatant. At present, it is agreed that there is an urgent need for CD34 information to meet the requirements of the government. The c-tie is located in the extracellular domain, the stationary part of the IgG1 is in the extracellular domain, the stationary part of the IgG1 is in the extracellular domain, and the stationary part of IgG1 is in the extracellular domain. In the future, the FACS system will be used to predict the performance of the system. The above, CD34 and c-tie molecules are used to determine the location of the protein in the cells of the cell, which is the most important part of the solution. The results show that the protein in the cell is the same as that in the cell, which is the most important.