血液幹細胞特異的チロシンキナーゼを介するシグナル伝達
通过血液干细胞特异性酪氨酸激酶进行信号转导
基本信息
- 批准号:06671102
- 负责人:
- 金额:$ 1.28万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
- 财政年份:1994
- 资助国家:日本
- 起止时间:1994 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
血液幹細胞の増殖・分化の分子機構を明らかにするために、幹細胞系に発現している非受容体型の新しいチロシンリン酸化酵素Hylの機能検索を行った。1.アフィニティークロマトを組み合わせた精製法により、HylのC末端ペプチドに対する特異性の高い兎抗体を得、ウエスタンブロット法にてヒト血液系細胞株におけるHyl蛋白発現を調べたところ、57kD蛋白質として検出された。2.CD34抗原陽性幹細胞系細胞株KMT-2およびmegakaryoblast系細胞株UT-7に、SR_αプロモーターによるHyl恒常的過剰発現を企てた。得られたすべてのクローンは、内在性Hyl蛋白の発現量に比して、強制発現されたHyl蛋白量が非常に少なくせいぜい同量程度ぐらいまでであった。このわずかなHyl過剰発現しか見られないにもかかわらず、KMT-2・UT-7いずれの細胞も巨大化して多核の細胞となった。このことは、Hyl蛋白発現量が細胞増殖に大きな影響を与え、おそらくHyl蛋白により細胞質分裂が抑制され、核分裂は抑制されていないことを示唆するものであり、Hylはmegakaryopoiesisの過程に重要な役割を果たしていると推察される。3.Hyl過剰発現KMT-2細胞と親株の細胞内チロシンリン酸化蛋白質の異同を詳細に比較検討したところ、Hyl過剰発現細胞においてチロシンリン酸化がこう進している1種類の蛋白とチロシンリン酸化が減弱する2種類の蛋白を見い出した。今この蛋白質の同定を進めている。4.Hyl遺伝子欠損マウスを作製するために、マウスcDNAとgenome全長をクローニングして遺伝子配列を決定した。その結果、マウスHylはalternative splicingによってN末端の長さの異なる2つの分子種をとることが分かった。knockoutマウス作製状況は、Hyl+/-のヘテロマウスが生まれ、現在ヘテロマウスどうしの掛け合わせの最中である。以上、Hylチロシンリン酸化酵素の機能解析がこのように進んできており、今後、downstream,upstreamの分子の同定およびknockoutマウスを利用した解析を行う予定である。
The molecular mechanism for proliferation and differentiation of blood stem cells is clearly demonstrated. The functional model of Hyl, a novel enzyme for the development of stem cell lines, is demonstrated. 1. Hyl protein production in blood cell lines was modulated by the C-terminal protein purification method. 2. CD34 antigen positive stem cell line KT-2 and megakaryoblast cell line UT-7 were found to be stable. The amount of endogenous Hyl protein produced by the reaction was significantly lower than that produced by the reaction. KMT-2·UT-7 is a multi-nucleated cell. This is the first time that Hyl protein production has a significant impact on cell proliferation. It is also the first time that Hyl protein production has an important impact on cytokinesis. It is also the first time that Hyl protein production has an important impact on cytokinesis. It is also the first time that Hyl protein production has been detected. 3. The differences and similarities of intracellular proteins between Hyl over-expression KMT-2 cells and parent strains were compared in detail. Now the protein is stable and stable. 4. Hyl cDNA sequence determination As a result, Hyl is an alternative splicing agent. Knockout status, Hyl+/-, no., no. The function analysis of Hyl chloride acidifying enzyme in the above, downstream,upstream and molecular identification and knockout analysis in the future
项目成果
期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Iwama A: "Molecular cloning of a novel receptor tyrosine kinase gene,STK,derived from enriched hematopoietic stem cells." Blood. 83. 3160-3169 (1994)
Iwama A:“来自富集的造血干细胞的新型受体酪氨酸激酶基因 STK 的分子克隆。”
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Hamaguchi I: "Characterization of mouse non-receptor tyrosine kinase gene,HYL" Oncogene. 9. 3371-3374 (1994)
Hamaguchi I:“小鼠非受体酪氨酸激酶基因,HYL 的表征”癌基因。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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増谷 聡
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先天性心脏病:形态和功能评估;
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- 发表时间:
2015 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
増谷 聡;豊島 勝昭;山口 直人;斎藤 朋子;新関 昌枝;田仲 健一;石川 淑;星野 陸夫;大山 牧子;川滝 元良;猪谷 泰史:;増谷 聡;Satoshi Masutani - 通讯作者:
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- 作者:
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