血液幹細胞の巨核球への増殖分化に関わる新規非受容体型チロシンキナーゼの研究

新型非受体酪氨酸激酶参与血液干细胞增殖分化为巨核细胞的研究

• 批准号: 07671216
• 负责人: 山口 直人
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671216/
• 关键词: チロシンリン酸化酵素; Hyl; Src型キナーゼ; Csk; 多核化; 巨核球

巨核球への増殖・分化の機構を明らかにするために、血液幹細胞の巨核球化の際に発現が上昇する非受容体型チロシンリン酸化酵素Hylの機能解析をおこなった。1.我々が単離したHylチロシンキナーゼは、Src型チロシンキナーゼの抑制的制御作用を持つCskと構造上きわめて類似しているが、血液細胞と脳でのみHylとCskの両者の発現があり、他の細胞種では、Cskの発現しか認められない。単クローン性抗体を作製してHylの細胞内局在を調べたところ、血小板では主に膜画分に、COS細胞を用いた一過性発現では核内にも局在し、細胞質内に主に存在しているCskと機能的差異が予想された。2.Hylの機能を調べるために、ヒト血液細胞株KMT-2にHylを恒常的過剰発現させた。得られた全てのクローンは染色体数の増加と多核化を起こし、分裂期での染色体整列・分配の異常および細胞質分裂抑制と多核化細胞の3次元的分裂を示した。3.Hyl過剰発現細胞において、Src型キナーゼのうち、Lynに選択的な自己リン酸化の抑制が認められ、自己リン酸化抑制はLynの酵素活性を上昇させた。Hyl過剰発現により、複数の蛋白のチロシンリン酸化の亢進が起こり、特に、分裂期特異的に出現するチロシンリン酸化蛋白p65を見い出した。このp65が細胞質分裂抑制に重要な働きをしていることが考えられる。4.Hyl遺伝子欠損マウスを作製した。生まれてきたマウスの外見は一応正常であり、成熟細胞のエフェクター機能についての詳細な検討が必要である。Hylはin vitroでは、Cskと同様に、Src型キナーゼのC末端チロシンをリン酸化するが、本研究で示したように、in vivoで、細胞内局在およびSrc型キナーゼ制御機構の相違・Hyl過剰発現による表現形から、HylとCskの役割分担を予想させる。今後、Hylの基質およびp65の同定などを行い、多核化機構を明らかにしてゆく予定である。

The mechanism of proliferation and differentiation of megakaryocytes and the mechanism of megakaryocyte differentiation of blood stem cells Functional analysis of the non-acceptable type acidifying enzyme Hyl that appears. 1. The control effect of the Hydraulic Hydraulic Hydraulic and Src type Hydraulic Hydraulic Inhibitor is structurally superior to Csk. Similar to しているが, blood cell と脳でのみHyl とCskの両者の発appears があり, his のcell kind では, Csk の発appears しかcognize められない. Monotypic antibody production, Hyl intracellular localization, platelet main membrane separation, COS cells It is thought that the difference in the function of CSK and CSK can be considered due to the transient appearance of the disease and its localization in the nucleus and its main presence in the cytoplasm. 2. The function of Hyl is to adjust the function of Hyl and the blood cell strain KMT-2 to maintain the normal performance of Hyl. The results show that the number of chromosomes has increased, the number of chromosomes has increased, and the number of chromosomes has increased, and the number of chromosomes has increased, and the number of chromosomes has become multinucleated. 3.Hyl type において, Src type キナーゼのうち, Lyn type なThe inhibition of acidification of acetate is recognized and the enzyme activity of Lyn is increased due to the inhibition of acidification of acetate. Hyl has passed the test, and the plural number of proteins has become too high, Specific に, mitosis specific に appear するチロシンリン acidified protein p65 を见い出した.このp65 is important for inhibiting cytoplasmic division. 4.Hyl's legacy is due to the damage done by MASHI. The normal function of raw cells and the functions of mature cells are detailed and necessary. Hyl in vitro では, Csk と同様に, Src type キナーゼのC-terminal チロシンをリン acidification するが, this study is shown したように, in Vivo, the intracellular localization of the Src-type control mechanism is inconsistent with the control mechanism. From now on, Hyl's matrix will be the same as p65, and the multi-core organization will be determined.

项目成果

Yamaguchi N: "Golgi retention mechanism of β-1,4-galactosyltransferase : membrane-spanning domain-dependent homodimerization and association with α- and β-tubulins." J.Biol.Chem.270. 12170-12176 (1995)

Yamaguchi N：“β-1,4-半乳糖基转移酶的高尔基体保留机制：跨膜域依赖性同二聚化以及与 α-和 β-微管蛋白的关联。J.Biol.Chem.270（1995）。

Iwama A: "Terminal differentiation of murine resident peritoneal macrophages is characterized by expression of the STK protein tyrosine kinase,a receptor for MSP." Blood. 86. 3394-3403 (1995)

Iwama A：“小鼠腹腔巨噬细胞的终末分化特征是 STK 蛋白酪氨酸激酶（MSP 的受体）的表达。”

Hashiyama M: "Predominant expression of a receptor tyrosinekinase,TIE,in hematopoietic stem cells and B cells." Blood. 87. 93-101 (1996)

Hashiyama M：“受体酪氨酸激酶 TIE 在造血干细胞和 B 细胞中的主要表达。”