Bacteroides LPSに特有の生物活性を担う構造の探究

探索拟杆菌脂多糖独特生物活性的结构

• 批准号: 05671507
• 负责人: 高田 春比古
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05671507/
• 关键词: Bacteroides intermedius; リポ多糖; 内毒素; 線維芽細胞; マイトジェン; インターロイキン-6; 腫瘍壊死因子; リムラス活性

歯周病の発症・進行に深く係わるBacteroides属の内毒素性リポ多糖(LPS)は、Sslmonel-la等の通常のLPSとは異なる化学構造と生物活性を有する事が示されてきた。特に、Bacte-roidesのLPSが通常のLPSに不応答性のC3H/HeJマウスのリンパ系細胞やヒト歯肉線維芽細胞をも活性する事実は、歯周病の病因論との係わりからも注目されている。しかし、このような活性がLPSのどのような構造に起因するのかについては不明のままである。我々は、Bacteroides intermedius(Prevotella intermedia)ATCC 25611よりフエノール・クロロフオ ルム・石油エーテル混液(PCP)で抽出したLPS-PCPが、これまで頻用されてきた熱フエノール・水抽出のLPS-PWとは異なり、C3H/HeJマウスの脾リンパ球にマイトジェン活性を殆ど及ぼさない事から,LPS-PWには内毒素以外の活性物質が混入しているのではないかと考えた。そこで,LPS-PWのゲル電気泳動(DOC-PAGE)像に認められ,LPS-PCPのそれには認められない高分子量バンド(10-12kDa)を含む画分をフエノール・水抽出物から精製する事を試みた。得られたBM(Bacteroides mitogen)画分は、リムラス活性を殆ど示さないにもかかわらず,C3H/HeJマウスの脾細胞に対するマイトジェン活性、同マウスの腹腔マクロフア ージよりのインターロイキン(IL)-6および腫瘍壊死因子(TNF-alpha)誘導活性ならびに歯肉線維芽細胞よりのIL-6誘導活性をLPS-PWよりも強く発揮した。さらに、BM画分のマイトジェン活性は熱および蛋白分解酵素に耐性で、過沃素酸感受性であり、LPSの作用を阻害するポリミキシンBによって抑制されなかった。なお、これらの実験で、LPS-PWはBM画分と、通常型LPSの性質を示したLPS-PCPとの中間的な活性スペクトルを示した。以上の成績はBacteroidesのLPSが示す特異な生物活性が非内毒素性で非タンパク性の物質に起因する事を示唆するとともに,Bacte-roidesの新奇なビルレンス因子の存在を明かにしたものと言える。

The development and progression of periodontal disease is related to the common chemical structure and biological activity of endotoxin polysaccharides (LPS) such as Bacteroides, Sslmonel-la, etc. In particular, Bacte-roides LPS is a common LPS response to C3H/HeJ and its release from cell lines and dentinal vascular cells. The activity of LPS is not clear because of its structural origin. Bacteroides intermedius (Prevotella intermedia)ATCC 25611-- LPS-PW was identified by DOC-PAGE, and LPS-PCP was identified by high molecular weight (10-12kDa), and high molecular weight (10-12kDa). Bm(Bacteroides mitogen) is characterized by high activity, low activity, high activity of C3H/HeJ in spleen cells, high activity of IL-6 and TNF-alpha in peritoneal cells, and high activity of LPS-PW in lymphocytes. In addition, the enzyme activity of BM and LPS was inhibited by heat and protease sensitivity. The properties of LPS and LPS are shown in the middle of LPS-PCP. The above results indicate that LPS of Bacteroides has specific biological activity, and the cause of non-endotoxin substances is obvious. The existence of novel LPS factors of Bacteroides is also obvious.

项目成果

高田春比古(分担執筆): "医学微生物学の新しい展開1993" 菜根出版、東京, 587 (1993)

Haruhiko Takada（合著者）：“1993 年医学微生物学的新发展”Nane Publishing，东京，587（1993）

Masato Tamura: "Enhancement of human hepatocyte growth factor production by interleukin-1alpha and-1beta and tumor necrosis factor-alpha by fibroblasts in culture." The Journal of Biological Chemistry. 268. 8140-8145 (1993)

Masato Tamura：“培养的成纤维细胞通过白介素-1α和-1β以及肿瘤坏死因子-α增强人肝细胞生长因子的产生。”

Haruhiko Takada: "Cytokine induction by extracellular products of oral viridans group streptococci." Infection and Immunity. 61. 5252-5260 (1993)

Haruhiko Takada：“口腔草绿色链球菌细胞外产物诱导细胞因子。”

Haruhiko Takada: "Induction of inflammatory cytokines by soluble moiety prepared from an enzayme lysate of Actinomyces viscosus cell walls." The Journal of Medical Microbiology. 38. 395-400 (1993)

Haruhiko Takada：“由粘性放线菌细胞壁的酶裂解物制备的可溶性部分诱导炎症细胞因子。”