糖尿病発症に関与する膵β細胞イオンチャネルの分子生物学的研究

胰腺β细胞离子通道参与糖尿病发生的分子生物学研究

• 批准号: 07457223
• 负责人: 清野 裕
• 金额: $ 4.42万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07457223/
• 关键词: NIDDM; ATP感受性カリウムチャネル; 電位依存性カルシウムチャネル; PCR-SSCP

研究代表者は、膵β細胞に発現しインスリン分泌に重要な役割を有すると考えられる、以下のイオンチャネルの構造決定とインスリン非依存型糖尿病(NIDDM)患者における遺伝子変異の検索を行った。1.電位依存性カルシウムチャネル(VDCC)脾β細胞におけるVDCCの機能発現にはα1とβサブユニットが必要であるので、脾β細胞に強く発現する遺伝子(α_<ID>とβ_3)の構造を決定した。α_<ID>遺伝子は49個のエクソンから、β_3遺伝子は13個のエクソンから構成されている。PCR-SSCP法でα_<ID>遺伝子の各エクソンを検索することにより、いくつかのアミノ酸変異を伴わない遺伝子多型性とともに、エクソン1においてメチオニン残基が挿入される症例や、エクソン42においてグルタミン酸残基が欠失される症例を認めた。このエクソン1の変異は、NIDDM患者918例中2例、正常対照者336例中0例、またエクソン42の変異は、NIDDM患者918例中3例、正常対照者336例中1例に認め、NIDDM患者と正常対照者で頻度に有意の差を認めなかった。2.カリウムチャネル多くの細胞で発現するカリウムチャネルをクローニングし、電気生理学的手法を用いて内向き整流型であることを示した。またこのカリウムチャネルに相同性を示すクローン(BIR)が同定され、スルフォニルウレア受容体とcomplexを作り、ATP感受性カリウムチャネルを構成することが示されたので、このBIRの遺伝子多型を検索した。その結果、23番目のアミノ酸がグルタミン酸、337番目のアミノ酸がイソロイシンであるalleleと、それぞれリジン、バリンであるalleleの2種類のalleleが存在することを明らかにした。これらのallele頻度はNIDDM患者と正常対照者で有意の差を認めなかった。

The study's representatives examined the role of beta cell development in the development of essential gene functions in the development of the following structural determinants of beta cell development in patients with NIDDM. 1. Potential-dependent development of spleen beta cells (VDCC) determines the structure of α_<ID>β_3, a strong promoter of VDCC function. 49 α_<ID>vectors and 13 β_3 vectors constitute the complex. PCR-SSCP method is used to detect the polymorphism of α_gene in each of the three different types of gene<ID>. 2 of 918 NIDDM patients, 0 of 336 normal controls, 3 of 918 NIDDM patients, 1 of 336 normal controls, 2 of 918 NIDDM patients, 0 of 336 normal controls, 3 of 918 NIDDM patients, 1 of 336 normal controls. 2. The method of electrophysiology is to use the method of inward rectification. The identity of the BIR is determined by the identity of the receptor and complex, and the ATP sensitivity is determined by the identity of the receptor and complex. The results showed that two kinds of allele existed in the 23-point acid group and the 337-point acid group. There is an intentional difference in the frequency of alleles between NIDDM patients and normal controls.

项目成果

K. Masuda, et al.: "Effects of troglitazone(CS-045) on insulin secretion in isolated rat pancreatic islets and HIT cells: an insulinotropic mechanism distinct from glibenclamide." Diabetologia. 38(1). 24-30 (1995)

K. Masuda 等人：“曲格列酮 (CS-045) 对离体大鼠胰岛和 HIT 细胞胰岛素分泌的影响：与格列本脲不同的促胰岛素机制。”

N.Inagaki,et al.: "Expression and role of ionotropic glutamate receptors in pancreatic islet cells." FASEB J. 9(5). 686-691 (1995)

N.Inagaki 等人：“胰岛细胞中离子型谷氨酸受体的表达和作用。”

Y. Ihara, et al.: "Molecular diversity and functional characterization of voltage-dependent calcium channels (CACN4) Expressed in Pancreatic β-cells." Mol Endocrinol. 9(1). 121-130 (1995)

Y. Ihara 等人：“胰腺 β 细胞中表达的电压依赖性钙通道 (CACN4) 的分子多样性和功能特征。”121-130 (1995)。

N. Inagaki, et al.: "Cloning and functional characterization of a novel ATP-sensitive potassium channel ubiquitously expressed in rat tissues, including pancreatic islets, pituitary, skeletal musclc, and heart." J Biol Chem. 270(11). 5691-5694 (1995)

N. Inagaki 等人：“在大鼠组织（包括胰岛、垂体、骨骼肌和心脏）中普遍表达的新型 ATP 敏感钾通道的克隆和功能表征。”

Y. Yamada, et al.: "The structures of the human calcium channel α1 subunit(CACNLIA2)and β subunit(CACNLB3)genes." Genomics. 27. 312-319 (1995)

Y. Yamada 等人：“人类钙通道 α1 亚基 (CACNLIA2) 和 β 亚基 (CACNLB3) 基因的结构。” 27. 312-319 (1995)