腫瘍性骨軟化症を若起した腫瘍細胞の産生するリン及びビタミンD調節因子の精製

纯化肿瘤细胞产生的磷和维生素 D 调节因子，导致肿瘤诱导的骨软化

• 批准号: 07671158
• 负责人: 佐藤 幹二
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671158/
• 关键词: リン利尿因子; 腫瘍性骨軟化症; 1α-hydroxylase

中胚葉系の腫瘍は、まれに骨軟化症を惹起する(文献1)。その成因としては、腫瘍細胞が腎尿細管に作用して尿中へのPの排泄を促進する因子(phosphaturic factor)と、腎尿細管での1α-hydroxylase活性を抑制する因子(1α-hydroxylase inihibitor)を産生しているためと推定されているが、その本態は不明である。我々は、このような腫瘍をヌードマウスに長期間移植した場合に、宿主ヌードマウスにも低リン血症と骨軟化症が生じることを見いだした(研究発表1参照)。そして、この腫瘍細胞を培養して、SV-40をtransfectして、cell lineの樹立をこころみた。SV-40をtransfectした細胞はすでに1年以上、継代しても増殖し続けており、細胞株が樹立できたと考えられる。この樹立細胞(AG-1)のconditioned medium中には、近位尿細管の性質を有するopposum kidney(OK)細胞への^<32>Pの取り込みを抑制する活性が認められた(研究発表2予定)。現在、このAG-1細胞の性質を検討中であるが、PTHに反応してcyclic AMPの産生が増加し、また、vascular endothelial growth factorの受容体であるflt receptorのmRNAを発現している。すなわち、骨芽細胞様と血管内皮細胞様の性質を兼ね備えており、もとの腫瘍(hemangioma)の性質を保持しているようである。さらに、この腫瘍細胞が、腎尿細管の1α-hydroxylase活性を抑制する因子をも産生しているか否かを検討した。新生仔期のマウス腎尿細管細胞を用いてPTHに反応して25-OH-D3より1,25-(OH)2D3が産生されるような初代培養系を確立した。ついで、このバイオアッセイ系を用いて、AG-1細胞のconditioend medium中には1,25-(OH)2Dの産生を抑制する活性があることを見いだした。現在、この1α-hydroxylase活性抑制作用と、32P取り込み抑制活性が同一のものであるか否か、ゲル濾過法などで検討中である。

Tumors in the mesodermal system may also cause osteomalacia (Literature 1). The cause of this disease is that tumor cells act on renal tubules, promote P excretion in urine, and inhibit 1 α-hydroxylase activity in renal tubules. The results of this study were as follows: 1. The host cells were transplanted into the rat body for a long time, and the host cells were transplanted into the rat body for hypothermia and osteomalacia. Cell culture, SV-40 transfection, cell line establishment SV-40 is a transfect-resistant cell line that has been cultured for more than one year, and the cell line has been cultured for more than one year. The properties of proximal and proximal urinary tubules in the conditioned medium of these established cells (AG-1) were determined by opposum kidney(OK) cells and their inhibitory activities <32>(Table 2). Now, the properties of AG-1 cells are under discussion, PTH mRNA production is increasing, vascular endothelial growth factor mRNA expression is increasing. The properties of osteoblasts and vascular endothelial cells are preserved. To investigate whether factors inhibiting 1α-hydroxylase activity in tumor cells and renal tubules are produced Neonatal renal tubule cells were treated with PTH to produce 25-OH-D3 - 1,25-(OH) 2D3 in primary culture. The activity of inhibiting the production of 1,25-(OH)2D in AG-1 cells was investigated. Now, the inhibition of 1α-hydroxylase activity, the inhibition of 32P activity, and the filtration method are discussed.

项目成果

佐藤幹二ほか4名: "腫瘍性骨軟化症に関する研究(第2報)細胞株の樹立とその細胞の性質" 日本内分泌学会(平成8年). (発表予定). (1996)

Mikiji Sato 等 4 人：“肿瘤诱发的骨软化症的研究（第 2 次报告）细胞系的建立和细胞特性”（1996 年）（预定报告）。

Amagai H, et al: "Development of osteomalacia in nude mice transplanted was vascalar mesenchymal tumor from a patient with adult on set osteomalacia." Bone & Mineral. 16. S132 (1995)

Amagai H 等人：“移植的裸鼠中出现的骨软化症是来自成年骨软化症患者的血管间质肿瘤。”