レトロウイルス発現ライブラリーを用いた本態性血小板血症の原因遺伝子のクローニング

使用逆转录病毒表达文库克隆导致原发性血小板增多症的基因

• 批准号: 10877158
• 负责人: 金倉 譲
• 金额: --
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877158/
• 关键词: 血小板増多症; トロンボポエチン; c-mpl; シグナル伝達; 転写制御因子; 増殖・分化; ras

本態性血小板血症(essential thrombocythemia:ET)は、真性多血症や骨髄線維症と同様に造血幹細胞のクローナルな骨髄増殖性疾患であるがその原因は不明である。ETでは、造血幹(前駆)細胞は刺激因子無添加でもコロニーを形成し易い傾向があり、血小板自体も量的異常の他にも様々な質的異常を伴っている。血小板産生には、トロンボポエチン(TPO)とその受容体-mplが最も重要な役割を果たしていると考えられる。我々はET患者の血清や血小板を用いて、トロンボポエチン(TPO)とその受容体c-mplの異常の有無を検討した結果、ET患者の血小板では血小板膜蛋白GPIIb/IIIaの発現には全く差が認められなにもかかわらず、c-mplの発現がmRNAならびに蛋白レベルともに著明に減少していた。そこで、ET患者よりcDNA発現ライブラリーを作成し、c-mplの発現を低下させることを指標に遺伝子単離を試みている。また、血小板産生機序を解明するため、TPO依存性に増殖分化するヒトインターロイキン3(IL-3)依存性細胞株F-36P-mplを用いて巨核球の増殖分化に必要なc-mpl下流のシグナル伝達系を解析した。その結果、巨核球前駆細胞の増殖にはRasとSTAT5の両者が関与しているこが、巨核球への分化にはRasが長期間(24時間以上)活性化されることが重要であることが明かとなった。

essential thrombocythemia (ET) や, true polyemia や, osteomyelitis と are similar to に hematopoietic stem cell <s:1> ロ ナ ナ な な bone marrow proliferative disorder であるがそ, cause <s:1> unknown である. ET で は cells, hematopoietic stem (former 駆) は stimulating factor without adding で も コ ロ ニ ー を form し easy い tendency が あ り, autologous platelet も amount of abnormal の he に も others 々 な quality abnormal を with っ て い る. Platelets have に は, ト ロ ン ボ ポ エ チ ン (TPO) と そ の by capacity - to MPL が も most important な "を cut fruit た し て い る と exam え ら れ る. I 々 の は ET patients serum platelet を や い て, ト ロ ン ボ ポ エ チ ン (TPO) と そ の by c - let body MPL の abnormal の presence of を beg し 検 た results, ET patients の platelet で は platelet membrane protein GPIIb/IIIa の 発 now に は total く が recognize め ら れ な に も か か わ ら ず, c - MPL の 発 now が mRNA な ら The びに protein レベ と と に に に indicates that に reduces <s:1> て た た た. そ こ で, ET patients with よ り cDNA 発 now ラ イ ブ ラ リ ー を make し, c - MPL の 発 now low を さ せ る こ と を index に heritage 伝 son 単 from を try み て い る. ま た, platelet produce machine sequence を interpret す る た め, TPO dependability に raised colonization differentiation す る ヒ ト イ ン タ ー ロ イ キ ン 3 (IL - 3) dependence cell lines F - p - 36 MPL を with い て giant nuclear ball の differentiation に necessary rights colonization な c - MPL obscene の シ グ ナ ル 伝 da system analytical し を た. そ の results, giant nuclear ball 駆 cells の raised before colonization に は Ras と STAT5 の struck the が masato and し て い る こ が, giant nuclear ball へ の differentiation に は Ras が long-term (more than 24 time) between activeness さ れ る こ と が important で あ る こ と が Ming か と な っ た.

项目成果

Matsumura,I., et al.: "Involvement of prolonged ras activation in thrombopoietin-induced megakaryocytic differentiation of a human factor-dependent hematopoietic cell line." Mol.Cell.Biol.18. 4282-4290 (1998)

Matsumura,I. 等人：“ras 延长激活参与血小板生成素诱导的人类因子依赖性造血细胞系的巨核细胞分化。”