活性型STATsの誘導発現による造血幹細胞の増幅とその分子機構の解析

活性STATs诱导表达造血干细胞扩增及其分子机制分析

• 批准号: 12877158
• 负责人: 金倉 譲
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877158/
• 关键词: STAT; 造血幹細胞; 増幅; シグナル伝達; 造血因子; アポトーシス; ユビキチン; 細胞周期

STAYsは、インターロイキン、エリスロポエチン、トロンボポエチン、G-CSFなどの造血因子やEGFなどの増殖因子の細胞内シグナル伝達に関わる重要な分子の一つである。現在までの検討によりSTAT3はc-mycやサイクリンD1などの発現誘導を介して細胞増殖を誘導し、同時にBcl-2やBcl-XLなどの発現を制御することにより細胞のアポトーシスを阻害することが明らかにされている。我々は、ユビキチンが造血幹細胞の増殖を抑制することを見い出していたが、この作用がユビキチンがプロテアソーム依存性にSTAT3を崩壊させ血液細胞の増殖抑制やアポトーシスを引き起こすことを見い出し、造血細胞におけるSTAT3の重要性を明らかにした。さらに、我々は、がん遺伝子v-Srcによる腫瘍性増殖にも、rasばかりでなくSTAT3がサイクリンD2、サイクリンE、c-mycの発現を誘導し、腫瘍性増殖に関与していることを明らかにした。我々は、すでにSTAT1,3,5,6のfull-length cDNAの3'末端に合成型エストロゲン受容体のリガンド結合領域を融合させたキメラ分子の発現ベクターの作成を完了し、STAT1,3,5,6と合成型エストロゲン受容体のキメラ分子は、そのリガンドである4-OH tamoxifenの刺激に反応して各STATの認識配列を組み込んだルシフェラーゼのreporter geneを活性化することを明らかにしている。現在、マウス骨髄細胞にSTAT1/ER、STAT3/ER、STAT5/ER、STAT6/ERを発現するretrovirusを感染させた後、4-OH tamoxifen単独存在下あるいは各種の造血因子と併用下で培養し、造血幹細胞の増幅について検討中である。

STAYs are important molecules involved in the development of hematopoietic factors such as EGF and G-CSF. Now we are looking at STAT3's ability to induce c-myc and Bcl-D1 protein expression, which mediates cell proliferation, and also inhibits Bcl-2 and Bcl-XL protein expression, which inhibits cell apoptosis. The importance of STAT3 in hematopoietic stem cell proliferation inhibition is clearly demonstrated by the fact that STAT3 is dependent on the proliferation of hematopoietic stem cells. The expression of c-myc, STAT3, and c-myc is induced by the expression of c-myc, and the expression of c-myc is induced by the expression of c-myc. The full-length cDNA of STAT1,3,5,6 was synthesized at the 3'end of the cDNA, and the binding domain of STAT1,3,5,6 was fused to the binding domain of STAT 1. The stimulation of 4-OH tamoxifen in various STATs can activate the reporter gene. Now, STAT1/ER, STAT3/ER, STAT5/ER, STAT6/ER are detected in hematopoietic stem cells after retrovirus infection, and 4-OH tamoxifen alone is used to culture hematopoietic stem cells in combination with various hematopoietic factors.

项目成果

Odajima,J., et al.: "Full oncogenic activities of v-Src are mediated by cooperation of multiple signaling pathways ; ras as an essential mediator for cell survival."J.Biol.Chem.. 275(31). 24096-24105 (2000)

Odajima, J. 等人：“v-Src 的全部致癌活性是通过多种信号传导途径的协同介导的；ras 是细胞存活的重要介质。”J.Biol.Chem.. 275(31)。

Kawasaki,A., et sl.: "Down-regulation of an AIM-1 kinase couples with megakaryocytic polyploidization of human hematopoietic cells."J.Cell Biol.. 152(2). 275-287 (2001)

Kawasaki,A., et sl.：“AIM-1 激酶的下调与人类造血细胞的巨核细胞多倍化相结合。”J.Cell Biol.. 152(2)。

Matsumura,I., et al.: "Increased D-type cyelin expression together with decreased cdc2 activity confers megakaryocytic differentiation of a human thrombopoietin-dependent hematopoietic cell line."J.Biol.Chem.. 275(8). 5553-5559 (2000)

Matsumura,I., et al.：“D 型细胞周期蛋白表达的增加与 cdc2 活性的降低一起导致人类血小板生成素依赖性造血细胞系的巨核细胞分化。”J.Biol.Chem.. 275(8)。

Tanaka,H., et al.: "GATA-1 blocks interleukin-6 induced macrophage differentiation and apoptosis through the sustaine expression of cyclin D1 and bcl-2 in a murine myeloid cell line M1."Blood. 95(4). 1264-1273 (2000)

Tanaka, H. 等人：“GATA-1 通过在小鼠骨髓细胞系 M1 中持续表达细胞周期蛋白 D1 和 bcl-2，阻断白细胞介素 6 诱导的巨噬细胞分化和凋亡。”血液。

Daino,H., et al..: "Induction of apoptosis by extracellular ubiquitin in human hematopoietic cells : possible involvement of Stat3 degradation by proteasome pathway"Blood. 95(8). 2577-2585 (2000)

Daino, H. 等人：“人类造血细胞中细胞外泛素诱导细胞凋亡：蛋白酶体途径可能参与 Stat3 降解”Blood。