c-kitレセプターチロシンキナーゼの恒常的活性化と腫瘍原性に関する研究

c-kit受体酪氨酸激酶组成型激活及致瘤性研究

• 批准号: 08265233
• 负责人: 金倉 譲
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08265233/
• 关键词: c-kit; stem cell factor; 活性化変異; 白血病; 造血器腫瘍; チロシンキナーゼ; シグナル伝達

c-kitレセプターチロシンチナーゼ(KIT)は、リガンド(stem cell factor:SCF)依存性に活性化される。このKIT/SCFシステムは、造血幹細胞、マスト細胞、生殖細胞や色素細胞の増殖・分化に必須である。我々は、c-kit遺伝子にリガンドが存在しなくても恒常的に活性化するgain-of function変異が存在することを見いだした。特に、kinase領域のAsp^<816>コドン(マウスではコドン814)は恒常的活性化変異のhot spotであり造血器腫瘍の発症に関与していると考えられる。一般に、KITは二量体化し細胞内にシグナルを伝達することが知られているが、kinase領域内のc-kit変異では細胞外領域におけるダイマー形成は認められなかった。kinase領域に変異によるKITの恒常的活性化や腫瘍化シグナル伝達系における細胞外領域の役割を検討するため、野生型(wild type)KIT^<WT>と恒常的活性化KIT^<Tyr814>の細胞外領域を欠失させたDel(Δ)KIT^<WT>とΔKIT^<Tyr814>を作製し、KIT陰性であるIL-^3依存性細胞株BA/F^3へ導入した。ΔKIT^<WT>導入BA/F^3細胞では、ΔKIT^<WT>のチロシンリン酸化や活性化は認められず、IL-^3非存在下では増殖反応を示さなかった。一方、ΔKIT^<Tyr814>導入BA/F^3細胞では、ΔKIT^<Tyr814>の恒常的活性化が認められ、導入細胞もIL-^3非依存性に増殖した。このΔKIT^<Tyr814>によるIL-^3非依存性増殖は、KIT^<W42>(KITのdominant negative型)によりほぼ完全に抑制された。さらに、ΔKIT^<Tyr814>は、KIT^<WT>やKIT^<W42>と共沈することが明らかとなった。以上の結果より、kinase領域のc-kit変異によるKITの活性化やシグナル伝達系には細胞外領域は必須ではないが、モノマーで作用するものではなく細胞内領域における相互作用が重要であると考えられた。

c-kit (KIT), stem cell factor (SCF), survival and viability. KIT/SCF is the key to the proliferation and differentiation of hematopoietic stem cells, germ cells and pigment cells. I have a c-kit gene that is constantly active and gain-of-function. Asp^<816>D ( In general, KIT is a two-dimensional process. It can be used in the intracellular and extracellular domains. KIT is constantly activated in the kinase domain, and KIT is constantly activated in the extracellular domain. Wild type KIT is constantly activated in the extracellular domain<WT>, and KIT is constantly activated in the <Tyr814>extracellular <WT>domain. <Tyr814>IL-3 dependent cell line BA/F3 is introduced. BA<WT>/F^3 cells transfected with Δ KIT^were found to be active in <WT>the presence of IL-^3. A constant activation of ΔKIT^was observed <Tyr814>in BA/F^3 cells transfected with ΔKIT^<Tyr814>. IL-^3-independent proliferation was observed in transfected cells. The <Tyr814>IL-^3 independent promoter, KIT^<W42>(dominant negative type of KIT), is completely inhibited.さらに、ΔKIT^<Tyr814>は、KIT^<WT>やKIT^<W42>と共沈することが明らかとなった。The above results show that the c-kit in kinase domain is different from that in extracellular domain, and the interaction in intracellular domain is important

项目成果

Kanakura,Y.,Ikeda,H.,et al.: "The c-kit receptor tyrosine kinase:its role in hematological malignancies" Cancer J.9. 79-82 (1996)

Kanakura,Y.,Ikeda,H.,et al.：“c-kit 受体酪氨酸激酶：其在血液恶性肿瘤中的作用”Cancer J.9。

松村 到、金倉 譲: "Annual Review 血液 1997" 高久史麿、宮崎澄雄、斎藤英彦、溝口秀昭、坂田洋一編集, 277 (1997)

Itaru Matsumura、Yuzuru Kanekura：“Annual Review Blood 1997”，由 Fumaro Takahisa、Sumio Miyazaki、Hidehiko Saito、Hideaki Mizoguchi 和 Yoichi Sakata 编辑，277 (1997)

Matsumura,I.,Kanakura,Y.,et al.: "The biological properties of human recombinant thrombopoietin in the proliferation and megakaryocytic differentiation of acute myeloblastic leukemia cells" Blood. 88. 3074-3082 (1996)

Matsumura，I.，Kanakura，Y.，等人：“人重组血小板生成素在急性髓细胞白血病细胞增殖和巨核细胞分化中的生物学特性”血液。

Moriyama,Y.,Kanakura,Y.,et al.: "Role of aspartic acid 814 in the function and expression of c-kit receptor tyrosine kinase" J.Biol.Chem.271. 3347-3350 (1996)

Moriyama,Y.,Kanakura,Y.,et al.：“天冬氨酸 814 在 c-kit 受体酪氨酸激酶的功能和表达中的作用”J.Biol.Chem.271。

Tsujimura,T.,Kanakura Y.,et al.: "Constitutive activation of c-kit in FMA murine mastocytoma cells caused deletion of seven amino acids at the juxtamembrane domain" Blood. 87. 273-283 (1996)

Tsujimura,T.,Kanakura Y.,et al.：“FMA 鼠肥大细胞瘤细胞中 c-kit 的组成型激活导致近膜结构域七个氨基酸的缺失”血液。