TGF-β応答性FOX C-1遺伝子の機能解析及びそのシグナル伝達路の同定

TGF-β反应性FOX C-1基因的功能分析及其信号转导通路的鉴定

• 批准号: 14657425
• 负责人: 和氣 徳夫
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657425/
• 关键词: FOX C1; forkhead transcription factor; TGF-β1 responsive; somatic mutation; transcriptional silencing; tumor suppressor gene; Microallay analysis

FOX C-1下流シグナルTGF-βは様々なメカニズムを介して細胞増殖を調節している。FOX C-1はその一部のシグナルを構成すると考えられる。私たちはF0X C-1遺伝子導入HeLa細胞を用い、TGF-βによるFOX C-1下流シグナルについて検討した。HeLa親細胞、FOX C-1遺伝子導入HeLa細胞を用い、抗Rb抗体を用いたウエスタンブロットを施行したところ、両細胞共にRb蛋白の発現は認められなかった。さらにTGF-β1によるRb蛋白発現さらには、脱リン酸化型へのシフトも観察されなかった。さらにRb蛋白のリン酸化を抑制するp27/KIP、p15/INK4B、p21/CIP1などのCDKインヒビター発現についても検討した。FOX C-1遺伝子導入HeLa細胞は、TGF-β1による有意な細胞増殖抑制を示すが、これらのCDKインヒビターはTGF-β1に応答し、発現亢進を示すことはなかった。以上からFOX C-1蛋白はTGF-βの下流でRb蛋白を介する経路とは異なるシグナル伝達により、細胞増殖を負に制御することが示唆された。このため、FOX C-1強制発現HeLa細胞と親細胞の間で、TGF-β1存在下及び非存在下におけるマイクロアレイ法を用いた大容量遺伝子発現変化の解析をおこなった。その結果、29遺伝子がF0X C-1強制発現に伴い、発現亢進し、21遺伝子が発現抑制を受けていることが判明した。現在、これら遺伝子群の詳細な機能を解析し、FOX C-1下流シグナル伝達路を明らかにする研究を進めている。

FOX C-1 down-stream TGF-β response is mediated by cell proliferation regulation. FOX C-1 is a part of the structure. F0X C-1 gene was introduced into HeLa cells, and TGF-β was used to detect the expression of FOX C-1 gene. HeLa parent cells, FOX C-1 gene introduced into HeLa cells, anti-Rb antibody used in the implementation of the gene, Rb protein expression in HeLa cells The expression of Rb protein in TGF-β1 protein was detected by ELISA. The p27/KIP, p15/INK4B, p21/CIP1 and CDK protein expression were detected by PCR. The FOX C-1 gene was introduced into HeLa cells, and TGF-β 1 expression was inhibited intentionally. The FOX C-1 protein is a downstream protein of TGF-β, which is involved in the regulation of cell proliferation. The expression of HeLa cells and parent cells under FOX C-1 stress was analyzed by high capacity PCR in the presence and absence of TGF-β1. The results showed that 29 genes were found to be associated with F0X C-1 stress, 21 genes were found to be inhibited by F0X C-1 stress, and 21 genes were found to be inhibited by F0 X C-1 stress. At present, the detailed function analysis of FOX C-1 downstream transmission network is in progress.

项目成果

Ueoka Y et al.: "Hepatocyte growth factor modulates motility and invasiveness of ovarian carcinomas via Ras mediated pathway."Molecular and cellular endocrinology. 202. 80-88 (2003)

Ueoka Y 等人：“肝细胞生长因子通过 Ras 介导的途径调节卵巢癌的运动性和侵袭性。”分子和细胞内分泌学。

Yamayoshi A et al.: "Photodynamic antisense therapy : regulation of cervical carcinoma cells by psoralen-conjugated oligonucleotides."Nucleic Acid Research Supplement. 3. 75-76 (2003)

Yamayoshi A 等人：“光动力反义疗法：补骨脂素缀合寡核苷酸对宫颈癌细胞的调节。”核酸研究增刊。

Kato K et al.: "Cell and Molecular Biology of Endometrial Carcinoma : Contribution of estrogen receptor α and progesterone receptor-β to oncogenic K-Ras-mediated NIH3T3 cell transformation."Springer-verlag Tokyo 2003. 207-218 (2003)

Kato K 等人：“子宫内膜癌的细胞和分子生物学：雌激素受体 α 和孕激素受体 β 对致癌 K-Ras 介导的 NIH3T3 细胞转化的贡献 Springer-verlag Tokyo 2003。207-218 (2003)”

Asanoma K et al.: "NECC1, a candidate choriocarcinoma suppressor gene which encodes homeodomain consensus motif"Geonomics. (in press).

Asanoma K 等人：“NECC1，一种候选绒毛膜癌抑制基因，编码同源结构域共有基序”基因组学。

Kato K et al.: "Cell and Molecular Biology of Endometrial Carcinoma, Springer-Verlag Tokyo"Contribution of estrogen receptor α and progesterone receptor-B to oncogenic K-Ras-mediated NIH3T3 cell transformation(in press).

Kato K 等人：“子宫内膜癌的细胞和分子生物学，Springer-Verlag Tokyo”雌激素受体 α 和孕激素受体 B 对致癌 K-Ras 介导的 NIH3T3 细胞转化的贡献（正在出版）。