絨毛トロホブラストにおけるNECC1シグナル伝達系とその機能の解明

阐明 NECC1 信号系统及其在绒毛滋养层中的功能

• 批准号: 16659453
• 负责人: 和氣 徳夫
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659453/
• 关键词: NECC1; ノックアウト; 巨細胞層; 海綿層; トロホブラスト分化; SRF; ドミナント・ネガティブSRF

1.正常絨毛で高発現し、絨毛癌で発現消失するNECC1遺伝子を単離した。胎盤発生への関与を明らかにするためNECC1+/+及び-/-胎盤を用いて胎盤の組織構築への関与を解析した。NECC1+/+胎盤では8.5〜10.5dpcにおいて一過性の発現を認めた。NECC1-/-胎盤では巨細胞層の過形成及び海綿状栄養膜細胞層の低形成が観察された。2.トロホブラスト分化へのNECC1蛋白の関与を解析する目的でトロホブラスト幹細胞(TS)及びその性格を有することが示唆されているラット絨毛癌細胞RCHO-1を用いてNECC1発現による分化プログラム構築への関与について解析した。Ad-NECC1感染により巨細胞のマーカーであるp11発現は抑制され、海綿層栄養膜細胞のマーカーであるTpbp発現は亢進した。形態学的にも巨細胞の出現は抑制されていることが判明したためNECC1はTSから巨細胞への分化を負に制御し、海綿状栄養膜細胞への分化を正に調節すると示唆された。3.NECC1発現調節機構を解析するため同遺伝子プロモータ領域の塩基配列を決定し、欠失変異体を作成した。その結果NKX3.1結合サイトが存在し、その欠失変異体ではプロモータ活性が抑制されることが明らかとなった。さらにヒト絨毛細胞におけるNKXファミリーメンバーの発現を解析したところNKX3.1発現を確認した。4.NECC1下流シグナルを同定する目的でSRFドミナント・ネガティブ(DN)変異体をRCHO細胞に形質導入し分化プログラム構築に与える影響について解析した。SRF/DN変異体発現はAd-NECC1感染時と同様に分化刺激存在下におけるRCHO-1細胞の分化を阻害したためSRF活性を負に制御することにより絨毛細胞に分化プログラムを構築すると示唆された。

1. Normal villi are highly visible, villi cancer is absent, and NECC1 genes are absent. Placental development and development are related to NECC1+/+ and-/-placental development and development. NECC1+/+ Placenta NECC1-/-The placenta was observed to have over-formation of the giant cell layer and under-formation of the spongy membrane cell layer. 2. The relationship between NECC1 protein and differentiation of human choriocarcinoma cells (RCHO-1). Ad-NECC-1 infection inhibits p11 expression in giant cells, while Tpbp expression in spongy cells increases. Morphologically, the appearance of giant cells was inhibited, and it was found that NECC1 TS negatively inhibited the differentiation of giant cells and positively regulated the differentiation of spongy membrane cells. 3. The analysis of NECC1 performance regulation mechanism determines the basic arrangement of the transmission and transmission fields, and creates the missing components. NKX3.1 binding activity is inhibited by the presence and absence of a variant. NKX3.1 was identified by analyzing the occurrence of NKX3.1 in human villi. 4. NECC1 down-stream regulation aims to analyze the effects of SRF on the transformation of DNA into RCHO cells. SRF/DN heterogeneic expression in Ad-NECC1 infected cells inhibited differentiation of RCHO-1 cells in the presence of the same differentiation stimulus, and SRF activity was negatively inhibited.

项目成果

Genome-wide definitive haplotypes determined using a collection of complete hydatidiform moles

• DOI: 10.1101/gr.4371105
• 发表时间: 2005-11-01
• 期刊: GENOME RESEARCH
• 影响因子: 7
• 作者: Kukita, Y;Miyatake, K;Hayashi, K
• 通讯作者: Hayashi, K

Placenta site trophoblastic tumor of the uterine cervix occurring from undetermined antecedent pregnancy.

因未确定的既往妊娠而发生的子宫颈胎盘部位滋养细胞肿瘤。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Obstet.Gynaecol.Res. 30,2
• 作者: Taki M;Kyo S et al.;峯 克也;峯 克也;Kato H;竹下 俊行;Horiuchi;峯 克也;Kamikihara T;Arima T;Kihara M;Kato H;Kurita Y;Soma H et al.
• 通讯作者: Soma H et al.

Zac, LIT1(KCNQ10T1) and p57KIP2(CDKN1C) are in an imprinted gene network which may play a role in Beckwith-Wiedemann Syndrome.

Zac、LIT1(KCNQ10T1) 和 p57KIP2(CDKN1C) 位于印记基因网络中，可能在 Beckwith-Wiedemann 综合征中发挥作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Nucleic Acids Research 33;8
• 作者: Kamikihara;T.;Arima;T.;Kato;K.;Matsuda;T.;Kato;H.;Douchi;T.;Nagata;Y.;Wake;N;Horiuchi S;Kamikihara T;Arima T
• 通讯作者: Arima T

Induction of human endometrial cancer cell senescence through modulation of HIF-1α activity by EGLN1

• DOI: 10.1002/ijc.21488
• 发表时间: 2006-03-01
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER
• 影响因子: 6.4
• 作者: Kato, H;Inoue, T;Wake, N
• 通讯作者: Wake, N

Epigenetic silencing of the imprinted gene ZAC by DNA methylation is an early event in the progression of human ovarian cancer

• DOI: 10.1002/ijc.20971
• 发表时间: 2005-07-10
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER
• 影响因子: 6.4
• 作者: Kamikihara, T;Arima, T;Wake, N
• 通讯作者: Wake, N