絨毛癌化の分子機構

1.7番染色体長腕部(7q)に存在する絨毛癌抑制遺伝子の単離:我々は絨毛癌細胞へのヒト正常細胞由来単一染色体移入実験さらには絨毛癌DNAを用いた両側アリル欠失領域の解析により、7q11.22に絨毛癌抑制遺伝子が存在すると推定した。同領域をカバーするBACコンティグを作成し、各BACクローンを絨毛癌細胞へ導入した。造腫瘍性及び増殖特性の抑制を示したBACクローンから絨毛癌抑制遺伝子候補cDNAを単離した。2.絨毛癌化に伴い、発現抑制される遺伝子の単離:正常胎盤絨毛で高発現し、絨毛癌で発現抑制される遺伝子群をPCR-サブトラクションにより単離した。そのうちSMAP31は2つのエクソンより構成されるHoX遺伝子類似の構造を有する遺伝子で4qに存在する。SMAP31の導入により、絨毛癌細胞の増殖特性に変化を認めぬもののヌードマウス上での造腫瘍性は完全に抑制された。3.我々は、Restriction Landmark Genome Scanning法により母性伝達の場合DNAメチル化を生じ、父性伝達の場合脱メチル化を生ずる2インプリント遺伝子(HYMAI及びZAC)を単離した。HYMAIはZACの70kb下流に存在し、共に父性発現を示した。これら2遺伝子の共通制御領域を同定した。

1.7番染色体長腕部(7q)に存在する絨毛癌抑制遺伝子の単離:我々は絨毛癌細胞へのヒト正常細胞由来単一染色体移入実験さらには絨毛癌DNAを用いた両側アリル欠失領域の解析により、7q11.22に絨毛癌抑制遺伝子が存在すると推定した。同領域をカバーするBACコンティグを作成し、各BACクローンを絨毛癌細胞へ導入した。造腫瘍性及び増殖特性の抑制を示したBACクローンから絨毛癌抑制遺伝子候補cDNAを単離した。2.絨毛癌化に伴い、発現抑制される遺伝子の単離:正常胎盤絨毛で高発現し、絨毛癌で発現抑制される遺伝子群をPCR-サブトラクションにより単離した。そのうちSMAP31は2つのエクソンより構成されるHoX遺伝子類似の構造を有する遺伝子で4qに存在する。SMAP31の導入により、絨毛癌細胞の増殖特性に変化を認めぬもののヌードマウス上での造腫瘍性は完全に抑制された。3.我々は、Restriction Landmark Genome Scanning法により母性伝達の場合DNAメチル化を生じ、父性伝達の場合脱メチル化を生ずる2インプリント遺伝子(HYMAI及びZAC)を単離した。HYMAIはZACの70kb下流に存在し、共に父性発現を示した。これら2遺伝子の共通制御領域を同定した。