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Gene Gunを用いた生体神経細胞内への持続的薬剤投与実験系の確立

Gene Gunを用いた生体神経細胞内への持続的薬剤投与実験系の確立
使用基因枪对活体神经细胞进行连续给药的实验系统的建立
批准号：
15650057
负责人：
橋本 浩一
金额：
$2.11万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2003 至 2004
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15650057/
关键词：
プルキンエ細胞小脳Gene Gun発達

项目摘要

项目成果

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神経系の発達過程に関与する分子機構を解明するためには、ある特定の分子機構をある程度長期にわたって実験操作することが必要であり、生きている動物でおこなうには難しい点がある。そこで我々は、Gene Gunを用いて、生きている動物の神経細胞内に機能分子を阻害、修飾する分子を効率的に打ち込むことが出来る実験系を確立したいと考えた。実験の結果、生体動物細胞にGene Gunを用いて試薬を打ち込むことは可能ではあるが、我々が意図した実験に適用するためにはいくつか問題があることが明らかになった。1、Gene Gunによる蛍光染料の生体細胞内への投与昨年度成功した生体の脳への蛍光染料の打ち込み方法の改良を行った。ヘリウムガスの圧力が100psiでは金粒子が軟膜表面を通過できない確率が高く、300psiでは白質にまで到達するので、その間で打ち込み圧を調整する必要があることが分かった。また、蛍光染料をまぶした金粒子をそのまま射出すると、金粒子がいくつか結合して細胞体よりも大きな塊となり組織の障害や非選択的な染色の原因となるが、脳組織とGene Gun本体の間にフィルターをかますことで軽減できることが分かった。2、実験に適用する際の問題点電気生理学的実験を行うために、生体脳に蛍光染料を打ち込んだのち一定期間の後スライスにして観察したところ、実験可能なスライス表面に生存しているプルキンエ細胞の数がほとんどいない傾向があった。染色されていても、スライス表面から深いところに存在している例が多かった。これは恐らく染色されている細胞の密度が低すぎてスライス表面で運良く生き残る細胞数が極端に少なくなるためであると考えられる。この点が改善されないと、我々の実験への適用は難しいと思われる。
期刊论文(12)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Impaired motor coordination in mice lacking neural recognition molecule NB-3 of the contactin/F3 subgroup
DOI： 10.1002/neu.10222
发表时间： 2003-09-01
期刊： JOURNAL OF NEUROBIOLOGY
影响因子： --
作者： [Takeda, Y, Akasaka, K, Watanabe, K]
通讯作者： Watanabe, K
Functional differentiation of multiple climbing fiber inputs during synapse elimination in the developing cerebellum
DOI： 10.1016/s0896-6273(03)00298-8
发表时间： 2003-06-05
期刊： NEURON
影响因子： 16.2
作者： [Hashimoto, K, Kano, M]
通讯作者： Kano, M
Altered agonist sensitivity and desensitization of neuronal mGluR1 responses in knock-in mice by a single amino acid substitution at the PKC phosphorylation site.
通过 PKC 磷酸化位点的单个氨基酸取代，改变了敲入小鼠中激动剂的敏感性和神经元 mGluR1 反应的脱敏。
DOI： --
发表时间： 2004
期刊： Eur J Neurosci. 20
影响因子： --
作者： [Tabata T, Sato M]
通讯作者： Sato M
P/Q-type Ca2+ channel alpha1A regulates synaptic competition on developing cerebellar Purkinje cells.
P/Q 型 Ca2 通道 alpha1A 调节小脑浦肯野细胞发育中的突触竞争。
DOI： --
发表时间： 2004
期刊： J Neurosci. 24
影响因子： --
作者： [Tabata T, Sato M, Miyazaki T]
通讯作者： Miyazaki T
共 6 条
    磁場を利用した神経束からの活動電位計測技術の開発
    • 批准号：
      22K19362
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
    • 资助金额：
      $3.74万
    • 财政年份：
      2022
    • 负责人：
      橋本 浩一
    • 依托单位：
      Hiroshima University
    RSV感染症克服のための経年的RSV臨床分離株に対する中和抗体の質的検討
    • 批准号：
      21K07868
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
    • 资助金额：
      $2.66万
    • 财政年份：
      2021
    • 负责人：
      橋本 浩一
    • 依托单位：
      Fukushima Medical University
    3.5D measurements and point cloud processing for handling and inspection of transparent and shiny objects
    • 批准号：
      19H01096
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
    • 资助金额：
      $28.54万
    • 财政年份：
      2019
    • 负责人：
      橋本 浩一
    • 依托单位：
      Tohoku University
    中枢神経系における細胞内カルシウムストアーを介した異シナプス間相互作用
    • 批准号：
      17024019
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $1.54万
    • 财政年份：
      2005
    • 负责人：
      橋本 浩一
    • 依托单位：
      Osaka University
    海外基金