核小体破壊よりみたHIV-1による細胞致死機構の解析

从核仁破坏角度分析HIV-1的细胞致死机制

• 批准号: 05807026
• 负责人: 野阪 哲哉
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05807026/
• 关键词: HIV-1; Rev蛋白; 核小体; リボゾーム; B23蛋白

HIV-1 RevをCOS7細胞にtransfectし過剰発現させると、Revは核小体内に蓄積し、核小体は膨満後破壊される。この時、核小体内にはrRNAが蓄積し、宿主細胞のrRNA生合成は、ほぼ完全にblockされている。BHK細胞でinducibleにRevを発現する細胞株を作製し検討すると、やはり同様の現象が観察され、さらに、Revを発現したBHK細胞では、細胞の増殖が完全に抑制され、最終的に死に至る。このようなRevの細胞傷害作用には、核小体移行シグナル(NOS)と呼ばれる塩基性に富んだ配列と、multimerization domainが必要である。さらに、実際にHIV-1に急性感染したTリンパ球でもRevによる核小体破壊が生じていることを確認した(Nosaka et al.Exp.Cell Res.1993)。我々は、このようなRevの細胞傷害作用は、Revと何らかの核小体内成分との相互作用に由来すると想定し、まず、生化学的にRevと結合することが知られている核小体蛋白B23のRev発現細胞内での動態を検討した。RevとB23は、細胞周期を通してco-localizeし、rRNAのprocessingを阻止すると、Revは、B23と共にreversibleに核質内にtranslocateした。これらのことは、B23がRevの細胞内輸送に深く関与していることを示唆している。また、Revにより核小体が破壊された細胞においては、膨満した核小体内にB23が蓄積していた。B23の機能として、ribosomal particlesの輸送が提唱されている。RevがB23の機能を阻害してribosomeのtransportをblock、細胞死を誘導する可能性もある(投稿準備中)。今後は、Rev,B23,rRNAの間の結合活性の特異性を検討することにより、Revがリボゾームの輸送というB23の機能に及ぼす影響について調べ、Revによる細胞致死機構を解析する予定である。

HIV-1 Rev transfects in COS7 cells, and Rev is accumulated in nucleosomes, and nucleosomes are expanded and then destroyed. When the rRNA is accumulated in the nucleosome, rRNA is synthesized in the host cell, and the block is completely blocked. BHK cells are inducible. Rev. Cell lines are produced. Observe the results, reveal the results, and reveal the results of the BHK cells, the complete inhibition of cell proliferation, and the final death of the cells. It is responsible for the cell-damaging effect of RevRev, the nucleosome transfer function (NOS), the essential structure of the basic structure, and the necessary multimerization domain. Nosaka et al.Exp.Cell Res. 1993). My 々は, このようなRev's cell-damaging effect は, Rev と ら か の nucleosome's internal components と の interaction に origin す る と hypothesis し,まず、Biochemical にRevとcombination することが知られているNucleosomal protein B23 のRev発appears on the dynamic でのdynamics in the cell を検した. Rev と B23 は, cell cycle を pass し て co-localize し, rRNA のprocessing を block す る と, Rev は, B23 と 共 に reversible に nucleoplasm に translocate し た.これらのことは, B23がRevのIntracellular transport に深くSeki and していることをshows the している.また, Revによりnucleosomesがbreak壊されたcellsにおいては, expansion぀したnucleosomesにB23 accumulationしていた. The functions of B23 and the transportation of ribosomal particles are improved. The function of Rev B23 is to block, the ribosome is to be transported, and the possibility of cell death is to be induced (in preparation for submission). Future は, Rev, B23, specificity of rRNA binding activity, を検 Discussion, Rev がリボゾームのTransportation and function of B23 and its influence について Adjustment and Rev. Cell death mechanism をAnalysis and predetermination.

项目成果

T.Nosaka: "Cytotoxic activity of rev protein of human immunodeficiency virus type 1 by nucleolar dysfunction" Experimental Cell Research. 209. 89-102 (1993)

T.Nosaka：“核仁功能障碍对 1 型人类免疫缺陷病毒 rev 蛋白的细胞毒性活性”实验细胞研究。