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分裂酵母を用いたRev蛋白及びRev蛋白結合因子の解析

使用裂殖酵母分析 Rev 蛋白和 Rev 蛋白结合因子

基本信息

批准号：
08269219
负责人：
谷時雄
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08269219/
关键词：
Rev蛋白 mRNA核外輸送分裂酵母 HIV スプライシング Rev結合蛋白

项目摘要

HIVのRev蛋白は、RRE配列を持つmRNA前駆体のスプライシング反応の抑制と、イントロンを含んだままの前駆体RNAの核外への輸送を促進することが知られている。Rev蛋白は、動物細胞では核小体に局在し、HIVウイルスの生活環において重要な調節因子の役割を担っているが、mRNAの核外輸送機構の面からも極めて興味深い因子である。我々は、遺伝的操作が行いやすく、かつ高等真核生物との類似点の多い分裂酵母を用いて、Rev蛋白の機能及びRev蛋白と結合する細胞内因子の解析を試みている。まず、野生型分裂酵母内で発現させたRev蛋白の核内での分布を調べたところ、発現されたRev蛋白が酵母核の核小体側の核膜付近に多量に局在することを明らかにした。この結果は、Rev蛋白と相互作用する因子が、酵母に於いては、核小体側の核膜付近に存在している可能性を示唆する。さらに、我々が分離している7種類の分裂酵母におけるmRNA核外輸送温度感受性変異株(ptr1〜ptr7)におけるRev蛋白の局在を、許容温度下(26℃)およびmRNAの核外輸送が阻害される制限温度下(36℃)で解析したところ、変異株の一つptr7変異株内ではRev蛋白の核膜付近への局在が消失していることが明らかになった。このことは、Rev蛋白の核内局在がmRNA核外輸送機構と何らかの密接な関連性を持つことを示している。また、酵母Two hybrid systemを用いたRev蛋白結合因子の探索を続行中である。

HIV Rev protein, RRE alignment to maintain the mRNA precursor gene expression inhibition, gene expression including the precursor RNA exonuclear transport to facilitate the understanding of the Rev protein is an important regulatory factor in the nucleosome of animal cells, an important regulatory factor in the life cycle of HIV, and an extremely interesting factor in the extra-nuclear delivery mechanism of mRNA. The function of Rev protein and the analysis of intracellular factors binding to Rev protein are studied. The distribution of Rev protein in the nucleus of yeast and wild-type split yeast was modulated and the Rev protein was found in large quantities near the nuclear membrane of yeast nucleus. These results indicate the possibility of the presence of Rev protein interacting factors in yeast and near the nuclear membrane. 7 species of yeast were isolated and the expression of Rev protein was detected at the tolerance temperature (26℃) and the inhibition temperature (36 ℃). The expression of Rev protein was detected at the tolerance temperature (26 ℃). The internal structure of the Rev protein in the mRNA extranuclear transport mechanism and the close relationship between the two proteins are shown in this paper. Two hybrid systems are used to explore protein binding factors.