アポトーシス抵抗性変異細胞株の分離と細胞死の情報伝達機構の解析

抗凋亡突变细胞系的分离及细胞死亡信号转导机制分析

基本信息

批准号：
07672345
负责人：
内藤幹彦
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07672345/
关键词：
アポトーシス ICE Cell fusion Mutant

项目摘要

イ、アポトーシスの情報伝達機構を解析するために、ヒト単球系白血病細胞U937よりアポトーシス抵抗性細胞を分離した。そのうちの1つ、UK110細胞は抗Fas抗体やTNFにより誘導されるアポトーシスに強い抵抗性を示した。UK110では、アポトーシスの実行機構やアポトーシスの情報伝達に関与する既知の分子には異常は見られず、またFas抗原、TNF受容体も親株のU937と同様に発現しているため、アポトーシスの情報伝達にはたらく未知の分子に変異のあることが推測された。UK110のアポトーシス抵抗性の形質が、遺伝的に優勢であるか劣性であるかを調べるため、UK110とUK937の融合細胞を樹立した。得られた融合細胞はいずれもU937と同じアポトーシス感受性を示し、UK110のアポトーシス抵抗性は遺伝的に劣性であることが示された。今後UK110で変異を起こしている分子を同定し、アポトーシスの情報伝達における機能を解析する必要がある。2、U937のアポトーシスにおけるICEファミリープロテアーゼの機能を解析するために、ICEファミリープロテアーゼの選択的阻害剤Z-Asp-CH2-DCBの作用を調べた。U937細胞は抗癌剤、抗Fas抗体、TNF等さまざまな刺激によりアポトーシスを起こすが、Z-Asp-CH2-DCBはいずれの刺激によるU937のアポトーシスも阻害した。しかし、Z-Asp-CH2-DCBを除くと再びアポトーシスが進行することから、ICEファミリープロテアーゼはU937のアポトーシスの実行に重要な機能を担っており、Z-Asp-CH2-DCBはICEファミリープロテアーゼを可逆的に阻害することにより、アポトーシスの進行を一時的に止めていることが推測された。

答：为分析凋亡的机制，从人类单核细胞细胞U937中分离出抗凋亡的细胞。其中之一，UK110细胞显示出对抗FAS抗体和TNF诱导的凋亡的强烈抗性。 In UK110, no abnormalities were found in known molecules involved in apoptosis-acting mechanisms or in the signaling of apoptosis, and Fas antigen and TNF receptor are also expressed in the same way as the parental strain U937, so it was speculated that there was a mutation in unknown molecules that act in the signaling of apoptosis.为了确定UK110的抗凋亡性特征是遗传学的或隐性的，我们建立了UK110和UK937的融合细胞。所有结果的融合细胞均表现出与U937相同的凋亡敏感性，表明UK110的凋亡耐药性在遗传上是隐性的。有必要鉴定在UK110中突变的分子并分析其在凋亡交流中的功能。 2。为了分析冰家族蛋白酶在U937细胞凋亡中的功能，我们研究了Z-ASP-CH2-DCB的作用，Z-Asp-Ch2-DCB是冰家族蛋白酶的选择性抑制剂。 U937细胞患有各种刺激的细胞凋亡，例如抗癌剂，抗FAS抗体和TNF，但Z-ASP-CH2-DCB也抑制了由任何一种刺激引起的U937凋亡。但是，当去除Z-ASP-CH2-DCB时，凋亡再次进展，据推测，ICE家族蛋白酶在U937进行凋亡方面起着重要功能，并且Z-ASP-CH2-DCB暂时阻止了通过可逆地抑制ICE家族蛋白酶的凋亡进展。