アポトーシス抵抗性変異細胞株の分離と細胞死の情報伝達機構の解析

抗凋亡突变细胞系的分离及细胞死亡信号转导机制分析

• 批准号: 07672345
• 负责人: 内藤 幹彦
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07672345/
• 关键词: アポトーシス; ICE; Cell fusion; Mutant

イ、アポトーシスの情報伝達機構を解析するために、ヒト単球系白血病細胞U937よりアポトーシス抵抗性細胞を分離した。そのうちの1つ、UK110細胞は抗Fas抗体やTNFにより誘導されるアポトーシスに強い抵抗性を示した。UK110では、アポトーシスの実行機構やアポトーシスの情報伝達に関与する既知の分子には異常は見られず、またFas抗原、TNF受容体も親株のU937と同様に発現しているため、アポトーシスの情報伝達にはたらく未知の分子に変異のあることが推測された。UK110のアポトーシス抵抗性の形質が、遺伝的に優勢であるか劣性であるかを調べるため、UK110とUK937の融合細胞を樹立した。得られた融合細胞はいずれもU937と同じアポトーシス感受性を示し、UK110のアポトーシス抵抗性は遺伝的に劣性であることが示された。今後UK110で変異を起こしている分子を同定し、アポトーシスの情報伝達における機能を解析する必要がある。2、U937のアポトーシスにおけるICEファミリープロテアーゼの機能を解析するために、ICEファミリープロテアーゼの選択的阻害剤Z-Asp-CH2-DCBの作用を調べた。U937細胞は抗癌剤、抗Fas抗体、TNF等さまざまな刺激によりアポトーシスを起こすが、Z-Asp-CH2-DCBはいずれの刺激によるU937のアポトーシスも阻害した。しかし、Z-Asp-CH2-DCBを除くと再びアポトーシスが進行することから、ICEファミリープロテアーゼはU937のアポトーシスの実行に重要な機能を担っており、Z-Asp-CH2-DCBはICEファミリープロテアーゼを可逆的に阻害することにより、アポトーシスの進行を一時的に止めていることが推測された。

イ, ア ポ ト ー シ ス の intelligence 伝 of institutions を parsing す る た め に, ヒ ト 単 ball is leukemia cell U937 よ り ア ポ ト ー シ ス resistance を isolated し た. 1 つ そ の う ち の, UK110 cells は Fas antibody resistance や TNF に よ り induced さ れ る ア ポ ト ー シ ス に strong い resistance を shown し た. UK110 で は, ア ポ ト ー シ ス の line be institutions や ア ポ ト ー シ ス の intelligence 伝 da に masato and す る already know の molecular に は abnormal は see ら れ ず, ま た Fas antigen, TNF by body も parent strain の U937 と with others に 発 now し て い る た め, ア ポ ト ー シ ス の intelligence 伝 da に は た ら く の unknown molecular に - different の あ る こ と が speculation さ れ Youdaoplaceholder0. UK110 の ア ポ ト ー シ ス resistance の character が, but 伝 に で あ る か recessive で あ る か を adjustable べ る た め, UK110 と UK937 の fused cells を set し た. Have ら れ た fused cells は い ず れ も U937 と with じ ア ポ ト ー シ ス susceptibility を し, UK110 の ア ポ ト ー シ ス resistance は but 伝 に recessive で あ る こ と が shown さ れ た. Future UK110 で - different を up こ し て い を る molecules with し, ア ポ ト ー シ ス の intelligence 伝 da に お け る function analytical す を る necessary が あ る. 2, U937 の ア ポ ト ー シ ス に お け る ICE フ ァ ミ リ ー プ ロ テ ア ー ゼ の function analytical す を る た め に, ICE フ ァ ミ リ ー プ ロ テ ア ー ゼ の sentaku resistance against one Z - Asp - CH2 - DCB の role を adjustable べ た. U937 cells は anti-cancer tonic, Fas antibody resistance and TNF さ ま ざ ま な stimulus に よ り ア ポ ト ー シ ス を up こ す が, Z - Asp - CH2 - DCB は い ず れ の stimulus に よ る U937 の ア ポ ト ー シ ス も resistance against し た. し か し, Z - Asp - CH2 - DCB を except く と again び ア ポ ト ー シ ス が for す る こ と か ら, ICE フ ァ ミ リ ー プ ロ テ ア ー ゼ は U937 の ア ポ ト ー シ ス の line be に important function of な を bear っ て お り, Z - Asp - CH2 - DCB は ICE フ ァ ミ リ ー プ ロ テ ア ー ゼ を reversible に resistance against す る こ と に よ り, ア ポ ト ー シ ス の to を a temporary に め て い る こ と が speculation さ れ た.

项目成果

Koji Noguchi: "Inhibition by diferentiation-inducing agents of wild-type p53-dependent apoptosis in HL-60 cells" Jpn.J.Cancer Res.86. 217-223 (1995)

Koji Noguchi：“分化诱导剂对 HL-60 细胞中野生型 p53 依赖性细胞凋亡的抑制”Jpn.J.Cancer Res.86。

Tetuo Mashima: "Aspertate-based inhibitor of interleulin-1b-conberting enzyme prevent antitumor agent-induced apoptosis in humam myeloid leukemia U937 cells" Biochem.Biophys.Res.Commun.209. 907-915 (1995)

Tetuo Mashima：“基于天冬氨酸的白介素 1b 相关酶抑制剂可防止抗肿瘤药物诱导的人髓性白血病 U937 细胞凋亡”Biochem.Biophys.Res.Commun.209。

Kenji Hanaoka: "Involvement of CD45 in adhesion and suppression of apoptosis of nouse malignant T-lymphoma cells" Cancer Res.55. 2186-2190 (1995)

Kenji Hanaoka：“CD45 参与小鼠恶性 T 淋巴瘤细胞的粘附和凋亡抑制”Cancer Res.55。

Koji Noguchi: "A recessive mutant of the U937 cell line aquired resistance to anti-Fas and anti-p55 tumor necrosis factor recepter antibodies induced apoptosis" Cell Growth&Differ. 6. 1271-1277 (1995)

Koji Noguchi：“U937 细胞系的隐性突变体获得了抗 Fas 和抗 p55 肿瘤坏死因子受体抗体诱导细胞凋亡的抗性”

Naoya Fujita: "Apoptosis inhibition by anti-Mr23,000(Thy-1)monoclonal antibodies without inducing bcl-2 expression" Cell Growth&Differ.6. 335-362 (1995)

Naoya Fujita：“抗 Mr23,000(Thy-1) 单克隆抗体抑制细胞凋亡，而不诱导 bcl-2 表达”细胞生长