Apollonによる細胞周期制御因子のユビキチン化と細胞分裂期の制御

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昨年度までの研究で、アポトーシス阻害タンパク質ApollonがCyclinAをユビキチン化するが、このユビキチン化にはApollonのUBCドメインは関与しないことが明らかになっていた。今年度はApollonによるCyclinAユビキチン化の詳細な分子機構を解析し、ApollonがAnaphase Promoting Complex/Cyclosome(APC/C)と協調してCyclinAをユビキチン化することを明らかにした。ApollonはAPC/CのコアサブユニットであるAPC3やAPC11と結合した。またAPC11とCyclinAとの結合はApollonを発現することにより顕著に増加した。さらにin vitroユビキチン化実験で、APC/CによるCychnAユビキチン化はApollonを加えることにより増加した。これらの結果からApollonによるCyclinAのユビキチン化にはApollonのUBCドメインではなく、APC/CによってリクルートされたE2-UBCが関与することが明らかになった。FLIPの細胞内局在制御とFLIPによるWntシグナル増強メカニズムを解析し、FLIP-LはC末の核移行シグナル依存的に核に移行し、核のFLIP-Lはb-catenin転写複合体に存在することを明らかにした。これらの結果からFLIP-Lは細胞内ユビキチン化を阻害する事によりWntシグナルのメディエーターであるb-cateninを増加させるだけでなく、核に移行して転写活性を制御することにより細胞増殖に関与することが明らかになった。