定量プロテオミクスが紐解く新規タンパク質複合体によるHPV陽性癌の新たな病因論

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ヒトパピローマウイルス(HPV)陽性扁平上皮癌は子宮頸癌と頭頸部癌にみられる特徴的な癌であり、ハイリスクHPVの感染によりウイルスタンパク質が宿主タンパクの機能阻害や新たな機能の獲得を誘導することで、発がんに至ると考えられている。しかしながら、有効な分子標的治療は 未だ開発されておらず、分子標的の同定を念頭においた分子基盤の確立が急務である。研究代表者らは、これまでに脱ユビキチン化酵素に対するsiRNAライブラリを用いて、HPV陽性扁平上皮癌に致死を誘導する分子のRNAiスクリーニングを行い、MPN domain containing (MPND)を同定した。MPNDがHPVウイルスタンパク質であるE6、E7と結合し、タンパク質複合体を形成していた。本研究では最新の定量プロテオミクスを用いて、この新規タンパク質複合体の性状を解析することで、HPV陽性扁平上皮癌の新たな病因論の創出を目指した研究である。本年度は前述のように同定したMPNDの解析を進めるにあたって、市販品の抗MPND抗体を複数購入し、検討をおこなったもののいずれもMPNDの検出はできなかった。そこで、受託にて抗MPND抗体の作成を行い、現在、抗体品質の検証実験を行っている。これまでの研究結果からMPNDはHPV由来のウイルスタンパク質であるE6やE7と結合し、複合体を形成することを明らかにしている。しかしながら、この複合体を免疫沈降で検出するためには細胞可溶化液に超音波処理を行う必要があることが判明した。細胞内局在の結果と併せ、本複合体はクロマチンに結合していると推測され、研究計画当初のサイズ排除クロマトグラフィーを用いた方法のみでは複合体構成因子の同定は困難であると考えられた。