Development of biomimetic nano-antibody that neutralizes target molecules in blood for cancer therapy

开发中和血液中靶分子的仿生纳米抗体用于癌症治疗

• 批准号: 22H03957
• 负责人: 小出 裕之
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03957/
• 关键词: アミノ酸; ペプチド; ナノ粒子; 吸着剤; 抗体; 分子認識; がん

本年度は、標的モデル分子としてミツバチ由来の溶血毒素であるメリチンを用い、その毒性を中和可能なナノ粒子の開発を試みた。メリチンを吸着・中和する解毒剤は、負電荷アミノ酸としてL-Cysteic acid（CyA）、疎水性アミノ酸としてL-tert-Leucine（Tle）を用いて合成した。はじめにペプチドの簡便な合成法を探索するため、アミノ酸の中で最も単純な構造を有するL-Glycine（Gly）を用いて縮合剤、触媒、反応時間や反応溶媒などの条件を最適化した。次に、負電荷アミノ酸と疎水性アミノ酸を共に水に溶解させ、縮合剤として1-(3-dimetylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide Hydrochloride（EDC）、触媒としてN-Hydroxysuccinimide（NHS）を加えてペプチドを合成した。その後、透析により未反応のアミノ酸や副生成物などを除去した。LC/MSを用いてペプチド鎖長の解析を行った結果、合成したペプチドはどの合成条件においてもオリゴペプチド程度であることが明らかになった。また、合成したペプチドのメリチン毒性中和能を検討するために、メリチンによる赤血球の溶血阻害試験を行った結果、ペプチドは赤血球の溶血をわずかに阻害した。そこで、メリチン毒性中和効果を向上させるため、まずはCyAとTleのみでペプチドを合成し、その後連結させることを考えた。LC/MSを用いて各ペプチドの鎖長を測定した結果、CyAペプチドは4 mer、Tleペプチドは5 merを多く含むペプチドが合成されていた。CyAペプチドとTleペプチドを連結（CyA-Tleペプチド）させて溶血阻害試験を行った結果、アミノ酸単体、CyAペプチド、Tleペプチドと比較し、CyA-Tleペプチドは高い溶血阻害作用を示した。

This year, the target molecule was tested for the development of hemolytic toxins from which the toxin was derived, and the toxicity of the toxin was neutralized. In addition, the negative charge of the antidote, L-Cysteic acid (CyA), and L-tert-Leucine (Tle) can also be used. To explore a simple synthesis method for the synthesis of L-Glycine (Gly), the purest structure of L-Glycine (Gly) was optimized by using condensation agent, catalyst, reaction time and reaction solvent. In addition, negative charge, acid, water, acid, water, dissolution, condensation agent, 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodimide Hydrochloride (EDC), catalyst, N-hydroxysuccinimide (NHS), etc. After dialysis, the acid and by-products are removed. LC/MS analysis results, synthesis conditions, selection criteria, etc. The results of the hemolysis inhibition test for erythrocytes were analyzed. The results of the toxicity neutralization test are as follows: LC/MS is used to determine the length of each cell. CyA is used to determine the length of each cell. CyA-Tle selection link (CyA-Tle selection link) shows hemolytic resistance test results, acid monomer, CyA-Tle selection link, comparison link, CyA-Tle selection link shows hemolytic resistance test results.

项目成果

標的毒素を中和する生分解性の解毒剤開発

开发可生物降解的解毒剂来中和目标毒素

• 发表时间: 2022
• 作者: 齋藤 海斗;小出 裕之;丸橋 春日;浅井 知浩
• 通讯作者: 浅井 知浩

経口投与されたポリマーナノ粒子の体内動態に影響する因子の模索

探索影响口服聚合物纳米颗粒药代动力学的因素

• 发表时间: 2022
• 作者: 安野 豪;小出 裕之;米澤 正;浅井 知浩
• 通讯作者: 浅井 知浩

Increasing the siRNA knockdown efficiency of lipid nanoparticles by morphological transformation with the use of dihydrosphingomyelin as a helper lipid

使用二氢鞘磷脂作为辅助脂质通过形态转化提高脂质纳米颗粒的 siRNA 敲除效率

• DOI: 10.1039/d3bm00068k
• 发表时间: 2023
• 期刊: Biomaterials Science
• 影响因子: 6.6
• 作者: Hashimoto Masahiro;Yonezawa Sei;Furan Song;Nitta Chiori;Maeda Noriyuki;Tomita Koji;Yokouchi Ayano;Koide Hiroyuki;Asai Tomohiro
• 通讯作者: Asai Tomohiro

凍結融解技術を駆使した核酸・タンパク質送達方法の開発

使用冻融技术开发核酸/蛋白质递送方法

• 发表时间: 2022
• 作者: 小出 裕之;米澤 正;出羽 毅久;奥 直人;浅井 知浩
• 通讯作者: 浅井 知浩

消化管で標的分子を吸着する機能性ナノ粒子開発

开发吸附胃肠道目标分子的功能性纳米颗粒

• 发表时间: 2022
• 作者: Hirofumi Tomikawa;Yo Nagano;Kaneto Tsunemitsu;Mitsuhiro Terakawa;小出裕之
• 通讯作者: 小出裕之