酵素によるビタミンB12補酵素の構造認識と補酵素機能の発現

酶对维生素B12辅酶的结构识别及辅酶功能的表达

• 批准号: 04220227
• 负责人: 虎谷 哲夫
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04220227/
• 关键词: ビタミンB_<12>補酵素; アデノシルコバラミン; ジオールデヒドラーゼ; ビタミンB_<12>アナログ; 自殺不活性化; ジオールデヒドラーゼ遺伝子; サブユニット構造; Klebsielle oxytoca

1.B_<12>補酵素の機能発現におけるホスホジエステル部の役割B_<12>補酵素のヌクレオチドループのホスホジエステル部の役割を明らかにするために、ヌクレオチド部を欠くアナログであるアデノシルコビンアミド(AdoCbi)とそのメチルホスフェート(AdoCbi-PMe)を合成し、酵素系での挙動を比較した。AdoCbiは酵素との親和性が極めて低く、補酵素活性は示さず、アポ酵素によるCo-C結合の活性化も受けなかった。一方、AdoCbi-PMeは補酵素活性は示さないが、AdoCblに対して拮抗阻害作用を示した。基質存在下でアポ酵素に結合すると、Co-C結合の活性化・開裂を受け、Co(11)を含む生成物が生じた。この反応は化学量論的(1:1)に起こった。これは自殺不活性化の極端な場合と考えられ、又クレオチドループ部が反応中間体の安定化に極めて重要であることを示していめ。また、その一部をなすホスホジエステル部はB_<12>補酵素が酵素に結合する上で不可欠であり、その寄与を通じてCo-C結合の活性化と触媒回転の進行に本質的な役割を果していると結論できた。2.ジオールデヒドラーゼ遺伝子の遺伝子構造の解析Klebsidella oxytocaより単離したジオールデヒドラーゼ遺伝子を含むDNAの塩基配列を解析した。Open Reading Frameがコードする5個のポリペプチドの中で、分子量58,239(270残基)ポリペプチドの遺伝子を欠失させても酵素活性には影響がなかった。各ペプチドのN末端アミノ酸配列より、60,348(554残基)、24,113(224残基)、19,173(173残基)のポリペプチドが本酵素の60K、29K、15Kサブユニットにそれぞれ相当することがわかった。残りの28,071(270残基)ポリペプチドはコンポーネントF(26K)である可能性が考えられる。したがって、精製酵素のサブユニット構造は大きな前駆体ポリペプチドのプロセッシングにより生じたのではなく、生合成時から存在することが明らかとなった。

1. The enzyme machine is capable of cutting 12 kilogrammes in service. The enzyme system is very sensitive to the information that you need to know that you are not responsible for the production of enzymes. You need to know that you are not responsible for the production of enzymes. You need to know that you need to know that you need to make sure that you don't have any information. You need to know that you need to make sure that you don't AdoCbi enzyme activity is low, enzyme activity is sensitive to activation. On the one hand, the enzyme activity of AdoCbi-PMe was detected by enzyme activity, and the antagonistic and antagonistic effect of AdoCbl was detected. In the presence of oligonucleotides, enzyme binding assay, Co-C binding assay, active cleavage assay, and Co _ (11)-containing product were used to induce cleavage. The chemical theory starts at 1:1. The end of the system is inactivated, and the body is stabilized. It is important to show that it is important. In the first part of this paper, we do not know how to do this in the first place. In the first part of this paper, we do not need to use the combination of enzymes, enzymes, two。 Please tell me that the Klebsidella oxytoca is parsed, and that the base column contains the DNA. The molecular weight of Open Reading Frame was 58239 (270bp), and the enzyme activity was not found in the 5 strains. The N-terminal amino acids of different compounds were assayed with 60348 (554 residues), 24113 (224 residues), 19173 (173residues), 15K and 60K. Residue 28071 (270 residue). This is not true. F (26K) is a possibility. In the process of synthesis, there is a significant difference between the production and synthesis of raw materials, such as temperature, temperature and temperature.

项目成果

ISHIDA Atsuhiko: "Adenosylcobinamide Methyl Phosphate as a Pseudocoenztme for Diol Dehydrase" Biochemistry. (1993)

ISHIDA Atsuhiko：“腺苷酸甲酯磷酸作为二醇脱水酶的伪辅酶”生物化学。

ISHIDA Atsuhiko: "Importance of the Nucleotide Loop Moiety Coordinated to the Cobalt Atom of Adenosylcobalamin for Coenzymic Euntion in the Diol Dehydrase Reaction" Journal of Nutritional Science and Vitaminology. (1993)

ISHIDA Atsuhiko：“与腺苷钴胺素的钴原子配位的核苷酸环部分对于二醇脱水酶反应中的辅酶释放的重要性”《营养科学与维生素学杂志》。