酵素反応におけるビタミンB_<12>補酵素の炭素-コバルト結合活性化の機構

酶促反应中维生素B_<12>辅酶碳钴键活化机制

• 批准号: 62215018
• 负责人: 虎谷 哲夫
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62215018/
• 关键词: ビタミンB_<12>補酵素; アデノシルコバラミン; B_<12>依存酵素; ジオールデヒドラーゼ; 酵素-補酵素相互作用; 炭素-コバルト結合の活性化; リボース

本年度は, ローリボース部分の役割を昨年度に引続いて更に詳細に検討した. またB_<12>部分でのアポ酵素との相互作用が炭素-コバルト(C-Co)結合の活性化において果たす役割についても研究し, 以下の成果を得た.1.補酵素機能発現及びC-Co結合活性化におけるローリボース部のβ-ローリボフラノース環と官能基の役割合成したリボース部修飾アナログのうち, 2′-デオキシ体と3′デオキシ体は補酵素活性を一部保持していたが, 天然補酵素と同じ官能基をもちリボース部の2′と3′位の間で切断されている2′, 3′-セコ体及びその2′, 3′-ジアルデヒド体は, 酵素に結合するにもかかわらず全く補酵素活性を示さなかった. 従って, 補酵素機能発現におけるリボース各部の重要性はβ-ローリボフラノース環>>3′-OH>2′-OH>-O-の順であり, リボース部の重要性はその官能基によりもむしろ5員環の硬い構造にあることが明らかとなった. 補酵素として活性な前2者のアナログのC-Co結合は酵素反応中にホモリシスしたが, 不活性な2′, 3′-セコ体のそれはアポ酵素による活性化を受けないことを示した. 一方その2′, 3′-ジアルデヒド体は不活性であるにもかかわらず, アポ酵素に結合するとC-Co結合が活性化され, ゆっくりとホモリシスすることを見出した.2.B_<12>部分でのアポ酵素との相互作用によるC-Co結合不安定化の実証 立体的にかさ高な上方配位子をもついくつかの不安定なアルチキB_<12>を合成し, 遊離の状態と酵素に結合させたときのC-Co結合の開裂速度を比較した結果, ネオペンチル, イソブチル, シクロヘキシルの各B_<12>はアポ酵素の共存によりC-Co結合の開裂が著しく加速されることを見出した. これはB_<12>部分がアポたんぱくに結合するだけで, 上方配位子での特異的な相互作用がなくてもC-Co結合が一定の不安定化を受けることを初めて実証したものである. 酵素の反応におけるその役割を考察した.

This year, the number of employees is increasing. The <12>interaction of enzyme with B_moiety was studied. The following results were obtained: 1. The development of enzyme function and the activation of C-Co binding. The activity of 2′-and 3 ′-isoforms of complementary enzymes was partially maintained, and the activity of natural complementary enzymes was partially maintained. The activity of natural complementary enzymes was partially maintained. The activity of natural complementary enzymes was partially maintained. The activity of natural complementary enzymes was partially maintained. The activity of natural complementary enzymes was partially maintained. The importance of each component in the development of enzyme function is β-OH&gt;3′-OH&gt;2′-OH&gt;-O-. The importance of each component is β-OH&gt;2′-OH&gt;-O-. C-Co binding enzyme activity in the first two enzymes is not active, 2′, 3′-C binding enzyme activity in the first two enzymes is not active, 3′-C binding enzyme activity is not active. On one side, the 2′, 3′-javier receptor is inactive but still active, and the apo enzyme binding and C-Co binding are activated. 2. The B_part of the enzyme and the interaction between the C_<12>Co binding instability and the solid C_Co binding instability is synthesized by the B_part of the enzyme and the high upper ligand. As a result, the rate of <12>cleavage of C-Co-bound enzymes in free state and binding state was compared, and the rate of cleavage of <12>C-Co-bound enzymes was accelerated. The B_<12>moiety is bound to the C_Co moiety, and the specific interaction between the upper ligand and the C_Co moiety is unstable. The enzyme activity was investigated.

项目成果

虎谷哲夫: The Journal of Biological Chemistry. 261. 9289-9293 (1986)

Tetsuo Toratani：生物化学杂志 261. 9289-9293 (1986)

虎谷哲夫: Biochemistry.

虎谷哲夫：生物化学。

虎谷哲夫: The Journal of Biological Chemistry. 262. 8544-8550 (1987)

Tetsuo Toratani：生物化学杂志 262。8544-8550 (1987)

市川雅一: Biochimica et Biophysica Acts. 952. 191-200 (1988)

市川正和：《生物化学与生物物理学法案》952. 191-200 (1988)

森井孝: アメリカ化学会誌. 109. 938-939 (1987)

森井隆：美国化学会杂志 109. 938-939 (1987)