ゴルジ体の遺伝変異と選別輸送の機構

高尔基体的遗传变异和选择性运输机制

• 批准号: 05252227
• 负责人: 桑野 信彦
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05252227/
• 关键词: 膜輸送; ゴルジ体; 体細胞遺伝変異株; ブレフェルジンA; モネンシン; 上皮増殖因子レセプター; 低比重リポ蛋白レセプター; ポリオーマウイルスがん抗原

我々の研究実績は以下の通りである。(1)EGF受容体のmRNAは存在するが、膜表層上の発現が著明に減少しているマウス由来のモネンシン耐性株は、srcやポリオーマmiddleT抗原による形質転換がおこらない。この変異株にヒトEGF受容体cDNAを導入し発現株を単離した。ポリオーマウイルスのmoddleT抗原の導入によってBalb/3T3細胞膜局在のヒトEGF受容体のdown regulationは著明に阻害されるが、モネンシン耐性細胞のヒトEGF受容体のdown regulationはこのポリオーマ遺伝子によって影響をうけなかった。EGF受容体が細胞膜表層付近でこのウイルス遺伝子産物と緊密に関連していることをはじめて示唆した。(2)ブレフェルジンAについては、LDL受容体の細胞内輸送を変化させること及び、ゴルジ体におけるシアル酸付加反応の場がLDLとEGFの受容体で明らかに異なっていることを観察した。そこで我々は、ヒト癌KB細胞より安定なブレフェルジンA耐性株を単離し、ゴルジ体の形態学的変化を観察した。植物毒素であるリシンの細胞毒性はKB細胞ではブレフェルジンAによって回復するが耐性では回復しなかった。他方、ジフテリア毒素の細胞毒性は、KB及びジフテリア毒素の細胞内輸送経路が異なることを示唆している。(3)ゴルジ体におけるLDL受容体のO_-糖鎖不全をひきおこしたハムスター由来のモネンシン及びコンパクチン耐性変異株は、両者ともゴルジ体の変化が示唆されるが、同一相補性グループに属し、O_-糖鎖伸長に関与するN_-アセチルガラクトサミン転移酵素の活性が約2/3に低下し、さらにLDL受容体に局在する20本近いO_-糖鎖のうち、LDL結合部位近傍に存在する約1/3が欠失していた。LDL受容体成熟の新しいゴルジ体変異であることを示した。(4)現在、Balb/3T3細胞のモネンシン耐性変異株から遺伝子subtractionを用いて耐性変異細胞で特異的に発現している遺伝子を単離する仕事を開始している。さらにEGF受容体の抵抗を用いて免疫電顕の仕事がうまく進んでいる状況下である。

My 々 々 research achievements 々 the following are all である である. EGF (1) the capacity of body の mRNA は exist す る が, membrane surface の 発 が zhao Ming に now reduce し て い る マ ウ ス origin の モ ネ ン シ ン patience plant は, SRC や ポ リ オ ー マ middleT antigen に よ る form quality planning in が お こ ら な い. The cDNA of the <s:1> mutant strain にヒトEGF receptor を was introduced into the developed strain を単 and separated from the た. ポ リ オ ー マ ウ イ ル ス の moddleT antigen の import に よ っ て Balb / 3 t3 cell membrane bureau in の ヒ ト EGF is の let body down regulation は zhao Ming に resistance against さ れ る が, モ ネ ン シ ン patience cells の ヒ ト EGF の let body down The regulation of 伝 ポリ ポリ ポリ ポリ 伝 伝 will leave 伝 and によって influence をうけな った った. EGF が membrane surface by let body pay nearly で こ の ウ イ ル ス heritage 伝 zi chan content closely に と masato even し て い る こ と を は じ め て in stopping し た. (2) ブ レ フ ェ ル ジ ン A に つ い て は の intracellular delivery, LDL, let body を variations change さ せ る こ と and び, ゴ ル ジ body に お け る シ ア ル acid plus 応 の field が LDL と EGF の is let body で Ming ら か に different な っ て い る こ と を 観 examine し た. そ こ で I 々 は, ヒ ト carcinoma KB cells よ り settle な ブ レ フ ェ ル ジ ン A patience strains を 単 し, ゴ ル ジ body の morphological variations of を 観 examine し た. Plant toxin で あ る リ シ ン の cytotoxicity は KB cells で は ブ レ フ ェ ル ジ ン A に よ っ て reply す る が patience で は reply し な か っ た. Fang, ジ フ テ リ ア toxin の cytotoxicity は, KB and び ジ フ テ リ ア toxin の が different intracellular delivery 経 road な る こ と を in stopping し て い る. (3) ゴ ル ジ body に お け る LDL by let body の O_ - sugar lock is not complete を ひ き お こ し た ハ ム ス タ ー origin の モ ネ ン シ ン and び コ ン パ ク チ ン patience - different strains は, struck と も ゴ ル の ジ body - turn が in stopping さ れ る が, fill the same phase グ ル ー プ に し and O_ - sugar lock elongation に masato and す る N_ - ア セ チ ル ガ ラ ク ト サ ミ ン planning to move Low enzyme activity の が around two-thirds に し, さ ら に LDL by let body に bureau in す る this nearly 20 い O_ - sugar lock の う ち, LDL binding site near exist alongside に す る 1/3 が owe lost し て い た. LDL receptor maturation <s:1> new <s:1> ゴ ゴ ジ ジ ジ body variation である とを とを shows <s:1> た た. (4) now, Balb / 3 t3 cell の モ ネ ン シ ン patience - different strains か ら posthumous son 伝 subtraction を with い て patience - idioblasts で specific に 発 now し て い る posthumous son 伝 を 単 from す を る shi things start し て い る. Youdaoplaceholder0 EGF recipient <s:1> resistance を is achieved by <s:1> て immunoelectrolysis 顕 <s:1> service がうまく in the condition of んで る る である.

项目成果

桑野信彦: "Gann Monograph on Cancer Resarch" CRC press 社, 印刷中 (199)

Nobuhiko Kuwano：《江恩癌症研究专着》CRC 出版社，正在出版 (199)

Mayumi Ono: "Polyoma middle t antigen or v-src desensitizes human epidermal growth factor receptor function and interference by a monensinresistant mutation in mouse Balb/3T3 cells." Expt.Cell Res.203. 456-465 (1992)

Mayumi Ono：“多瘤中 t 抗原或 v-src 使人表皮生长因子受体功能和小鼠 Balb/3T3 细胞中莫能菌素抗性突变的干扰脱敏。”

Tadayoshi Okimoto: "BrefeldinA protects ricin-induced cytotoxicity in human cancer KB cell line,but not its resistant counterpart with altered Golgi structures" Cell Struct.Funct.18. 241-251 (1993)

Tadayoshi Okimoto：“BrefeldinA 可以保护人类癌症 KB 细胞系中蓖麻毒素诱导的细胞毒性，但不能保护高尔基体结构改变的耐药对应物”Cell Struct.Funct.18。

Yasufumi Sato: "The mechanisms for the activation of latent TGF-beta during co-culture of endothelial cells and smooth muscle cells:Cell specific targeting of latent TGF-beta to smooth muscle cells." J.Cell Biol.123. 1249-1254 (1993)

Yasufumi Sato：“内皮细胞和平滑肌细胞共培养期间潜在 TGF-β 的激活机制：潜在 TGF-β 细胞特异性靶向平滑肌细胞。”

Tadashi Seguchi: "Brefeldin A-resistant mutants of fuman camcer cell line with structural changes of Golgi apparatus." J.Biol.Chem.267. 11626-11630 (1992)

Tadashi Seguchi：“具有高尔基体结构变化的 fuman camcer 细胞系的 Brefeldin A 抗性突变体。”