ゴルジ体の遺伝変異と選別輸送の機構

高尔基体的遗传变异和选择性运输机制

• 批准号: 04259222
• 负责人: 桑野 信彦
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04259222/
• 关键词: 小胞輸送; モネンシン; ブレフェルジンA; ゴルジ体; EGF受容体; LDL受容体; 体細胞遺伝変異; 蛋白分泌・成熟

目的:ゴルジ領域における細胞の巧妙な選別輸送は驚嘆に値する。その選別の機構を把握するために我々はこの選別輸送の流れを止めたり変化させる哺乳類細胞の遺伝変異株を駆使して小胞体-ゴルジ複合体領域の輸送機序を明らかにしたいと考えた。そのために,ゴルジ体を標的とするモネンシンならびにブレフェルジンAに対して独立に単離した2種類の耐性遺伝変異株を対象にして以下の研究を進めることにした。1.モネンシン耐性で選択したマウスBalb/3T3由来のMO-5株は,上皮増殖因子(EGF)やウィルスのとりこみが欠損している。EGF受容体を対象にEGFのシグナル応答の細胞増殖に対する分子機序を検討する。2.ブレフェルジン耐性で選択したヒトKB細胞由来のKB/BFA-1株の単離に最近成功し,ゴルジ体の形態変化を観察しているのでこの株を用いてゴルジ体の細胞分泌に関与する役割について把握する。結果:1.親株Balb/3T3ならびにMO-5株にヒトEGF受容体cDNAを導入過剰発現させたBNER4およびMNER23株を各々樹立した。ポリオーマウィルスmiddeT抗原やウィルスsrcオンコジンを導入した所BNER4では外来性のEGF添加によって著明にdown調節が阻害される時に,MNER23株においては全く阻害をうけないことが観察された。膜EGF受容体とウィルス成合との相互的な反応性がモネンシン耐性変異によって影響をうけている可能性を示唆した。2.親株KB由来のKB/BFA-1株においてはゴルジ体の構造が特異的に変化していた。さらにゴルジ認識のβ-COPやその他の特異蛋白がゴルジ由来と推察される小胞への局在が変異株で多数観察された。またゴルジ体の膜蛋白の成熟や分泌がブレフェルジンによって親株に較べて阻害をうけにくくなっていた。ゴルジを中心とする機能が薬剤に対して耐性変異をうけていることが示唆された。

Objective: To select and transport the cells in the field. The selection mechanism is controlled by the selection mechanism. The selection mechanism is controlled by the selection mechanism. The selection mechanism is controlled by the selection mechanism. The research on the resistance of two kinds of plants to different diseases has been carried out. 1. MO-5 strain derived from Balb/3T3 is deficient in epidermal growth factor (EGF). The molecular mechanism of EGF receptor response to EGF is discussed. 2. KB/BFA-1 strain was isolated successfully from KB cells, and morphological changes of KB cells were observed. Results:1. The cDNA of EGF receptor was introduced into Balb/3T3 and MO-5, and BNER4 and MNER23 were established separately. When the exogenous EGF was added to BNER4,MNER23 was completely inhibited. The possibility that EGF receptors and their combinations may interact with each other is demonstrated. 2. The parent strain KB/BFA-1 is derived from a unique structure. The origin of β-COP and other specific proteins was investigated in most of the cells. The mature and secreted membrane proteins of the cell were isolated from the parent plant. The function of the center is to show the difference between the two.

项目成果

Mayumi Ono: "Polyoma middle t antigen or v-src desensitizes human epidermal growth factor receptor function and interference by a monensinresistant mutation in mouse Balb/3T3 cells." Expt.Cell Res.203. 456-465 (1992)

Mayumi Ono：“多瘤中 t 抗原或 v-src 使人表皮生长因子受体功能和小鼠 Balb/3T3 细胞中莫能菌素抗性突变的干扰脱敏。”

瀬口 正志: "小胞輸送におけるLDL受容体のプロセシングと修飾" 新生化学実験講座研究法(日本生化学会編)東京化学同人, 6:656-665 (1993)

Masashi Seguchi：“囊泡运输中LDL受体的加工和修饰”新生物化学实验课程研究方法（日本生化学会编）东京化学同人，6：656-665（1993）

Ryoji Hamanaka: "Induction of low density lipoprotein receptor and a transcription factor SP1 by tumor necrosis factor in human microvascular endothelial cells." J.Biol.Chem.267. 13160-13165 (1992)

Ryoji Hamanaka：“肿瘤坏死因子在人微血管内皮细胞中诱导低密度脂蛋白受体和转录因子 SP1。”

Tadashi Seguchi: "Brefeldin A-resistant mutants of human cancer cell line with structural changes of Golgi apparatus." J.Biol.Chem.267. 11626-11630 (1992)

Tadashi Seguchi：“具有高尔基体结构变化的人类癌细胞系的 Brefeldin A 抗性突变体。”

Jacob Gopas: "EGF receptor activity and mitogenic respomse of Balb/3T3 cells expressing ras and myc oncogenes." Cell.Milec.Biol.(1993)

Jacob Gopas：“表达 ras 和 myc 癌基因的 Balb/3T3 细胞的 EGF 受体活性和促有丝分裂反应。”