0ー結合糖鎖の修飾不全をひきおこすゴルジ複合体における選別輸送の遺伝変異

高尔基复合体选择性运输的遗传变异导致 0-连接糖链的修饰缺陷

• 批准号: 03264216
• 负责人: 桑野 信彦
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03264216/
• 关键词: ゴルジ体; 選別輸送機構; 糖蛋白合成成熟; 体細胞遺伝変異株; 低比重リポ蛋白受容体; 高コレステロ-ル血症

本年度,我々は,1.ゴルジ領域に関する体細胞遺伝変異株について解析した結果,低比重リポ蛋白(LDL)受容体のLDL結合ドメイン附近の0ー糖鎖が欠失した結果,LDLの結合活性が著明に低下していることを観察した。すなわち,LDL受容体の0ー糖鎖構造がその機能に必要であることを明らかにした。2.マクロファ-ジ細胞でゴルジ領域内で合成・成熟したLDL受容体はゴルジ領域をでたあとすみやかに崩壊することを,マウスおよびヒトのマクロファ-ジ様細胞を用いて観察した。このことは,マクロファ-ジ細胞膜におけるLDL受容体の発現の制御に同受容体の安定性が関与している事を示唆している。3.LDL受容体のシアル酸添加はゴルジ体領域で生じるが,上皮増殖因子(EGF)受容体のシアル酸添加はトランスゴルジネットワ-ク領域で進む可能性を,ブレフェルジンAを用いて示唆した。4.ヒト癌KB細胞から安定なブレフェルジンA耐性株KB/BFー1及びKB/BFー2を単離した。同耐性株においてはゴルジ体の構造が変化していることを電顕学的に観察している。蛋白分泌や受容体の合成・成熟について検索を進めている。今後,ゴルジ領域の選別膜輸送における機能について同領域の変異株を駆使して研究を進めていきたい。

This year, we reported that, 1. As a result of the analysis of somatic cell genetic variants in the field, LDL binding activity was significantly lower in LDL receptors than in LDL receptors. The LDL receptor has a sugar lock structure that is necessary for its function. 2. The synthesis of LDL receptors in the cell domain The control of LDL receptor development and receptor stability in cell membrane are related to the development of LDL receptor. 3. The addition of LDL receptor's amino acid to LDL receptor can be used in the development of EGF receptor's domain. 4. KB cells were isolated from KB/BF 1 and KB/BF 2. The structure of the same strain is changing, and the electric field is changing. Protein secretion, receptor synthesis and maturation In the future, the function of selective membrane transport in the same field will be further studied.

项目成果

Tadashi Seguchi: "The dysfunctional LDL receptor in a monensinーresistant mutant of Chinese hamster ovary cells lacks selected Oーlinked oligosaccharides." Arch.Biochem.Biophys.284. 245-256 (1991)

Tadashi Seguchi：“中国仓鼠卵巢细胞的莫能菌素抗性突变体中功能失调的 LDL 受体缺乏选定的 O 连接寡糖。”Arch.Biochem.Biophys.284（1991）。

Michihiko Kuwano: "Glycosylation mutations of serine/threonineーlinked oligosaccharides in low density lipoprotein receptor:Indispensable roles of Oーglycosylation." J.Cell Sci.98. 131-134 (1991)

Michihiko Kuwano：“低密度脂蛋白受体中丝氨酸/苏氨酸连接的寡糖的糖基化突变：O-糖基化的不可或缺的作用。”J.Cell Sci.98（1991）。

Tadashi Seguchi: "Brefeldin Aーresistant mutants of human cancer cell line with structural changes of Golgi apparatus" J.Biol.Chem.(1992)

Tadashi Seguchi：“具有高尔基体结构变化的人类癌细胞系布雷菲德菌素 A 抗性突变体”J.Biol.Chem.(1992)

桑野 信彦: "体細胞遺伝マ-カ-" 分子細胞遺伝学実験法(瀬野、小山、鮎沢編)基礎9,共立出版(東京), 2027-2033 (1991)

Nobuhiko Kuwano：“体细胞遗传标记”分子细胞遗传学实验方法（Seno、Koyama、Ayuzawa 编辑）Fundamentals 9，Kyoritsu Shuppan（东京），2027-2033（1991）

Mayumi Ono: "Malignant transformation of mouse Balb/3T3 cells by polyoma middle T antigen requires epidermal growth factor receptor expression." Cell Growth&Diff.2. 317-322 (1991)

Mayumi Ono：“多瘤中 T 抗原对小鼠 Balb/3T3 细胞的恶性转化需要表皮生长因子受体的表达。”