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HIVのTat及びミリストイル化阻害剤によるエイズ発症抑制

HIV Tat 和肉豆蔻酰化抑制剂抑制艾滋病发作

基本信息

批准号：
05262101
负责人：
庄司省三
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05262101/
关键词：
AIDS HIV Tat 抗HIV剤ミリストイル化

项目摘要

HIVプロウイルスの発現にはHIVの調節遺伝子群(Tat,Rev,Net)の中でもtat gene産物であるTatタンパク質が重要で、このタンパク質(86あるいは72アミノ酸残基)は高塩基性領域(2 Cys,6 Arg:核へ移行するシグナルと考えられている)及び高システイン領域(7 Cys)からなる。まず始めに、TatプラスミドpBC12/HIV/TAT及び分泌型アルカリホスファターゼプラスミドpBC12/HIV/SeAPをCOS-7にco-transfectionして、HIV-Tat Assay系を確立し、このAssay系を用いて、Tatタンパク質の機能領域と競合的に結合する有機亜鉛化合物及びチオール化合物を分子設計して、多数合成(高下博士が担当)し、Tatの機能阻害を試みた。テストした化合物のうち、ある種のチオール化合物がTat活性を著しく阻害し、抗HIV活性が認められた。現在、さらに作用機序を追及中である。タンパク質のアミノ末端グリシン残基に長鎖飽和脂肪酸ミリスチン酸が結合する事をタンパク質のミリストイル化と呼ぶが、この事は申請者によって初めてcAMP-依存性プロテインキナーゼに見出された。さらに、申請者によって、ヒトレトロウイルスHTLV-Iのp19^<gag>及びHIV-1のp17^<gag>にミリストイル化が見出された。このミリストイル化を触媒する酵素の反応機構に基づいて分子設計された阻害剤(N-ミリストイルグリシナールジエチルアセタール)は、HTLV-I持続産生株MT-2、MT-4細胞中のp19^<gag>タンパク質のミリストイル化を強く阻害した。また、本阻害剤をHIV-1持続産生株CEM/LAVに作用させると、HIV-1ウイルスのコアタンパク質p17^<gag>のミリストイル化を著しく抑制する事が明確になった。本阻害剤存在下MT-4にHIV-1を初感染させ、感染性娘ウイルスをTCID_<50>を指標に求めると、本阻害剤は40muMの濃度でウイルス産生を98%阻害する事が明らかになったが、本剤は水に対する溶解性が悪い。この問題を解決するために、ミリスチン酸のアシル末端にピリジル-チオ基を導入したピリジル-チオ-ミリスチン酸を合成し、ミリストイル化阻害及び抗HIV活性を測定した結果、この化合物は水に対して可溶性で、N-ミリストイルグリシナールジエチルアセタールよりも強い抗HIV活性が認められたので、現在、HIV粒子非産生HIV感染細胞株(U1、ACH-2)を用いてその作用機構を解析中である。

The development of HIV protein is characterized by the presence of Tat gene products among HIV regulatory gene subgroups (Tat,Rev,Net), the presence of Tat gene products (86 amino acid residues), the presence of high basic domains (2 Cys,6 Arg: nuclear transition domain) and the presence of high basic domains (7 Cys). The HIV-Tat Assay system was established in the initial stage of development, co-transfection of pBC12/HIV/TAT and COS-7, molecular design of organic lead compounds and other compounds combined in the functional domain of Tat's quality, and molecular synthesis of most compounds (Dr. Gao was responsible for), and functional inhibition of Tat. The compound has been identified as having Tat activity and anti-HIV activity. Now, the action sequence is in progress. The terminal residues of the compound are long-chain saturated fatty acids, and the binding activities of the compound are described in detail below. In addition, the applicant's name and address are listed in the list of HTLV-I p19 <gag>and HIV-1 p17<gag>. The molecular design of the enzyme's reaction mechanism in the HTLV-I production strain MT-2 and MT-4 cells is a strong inhibitor of p19 protein<gag>. This is a clear indication of the role of HIV-1 inhibitors in CEM/LAV production, and the role of HIV-1 inhibitors in the production of CEM/LAV<gag>. In the presence of this inhibitor, MT-4 produces 98% inhibition of HIV-1 <50>at a concentration of 40muM in the initial infection, infectivity, and TCID_index. This problem was solved by introducing a radical group into the terminal region of a compound, synthesizing a radical group of a compound, determining its chemical resistance and anti-HIV activity, and determining the results of the determination of its water solubility, N-radical group of a compound, and determining its anti-HIV activity. HIV particles are not produced in HIV infected cell lines (U1, ACH-2).