AIDS遺伝子治療のための基礎的研究

艾滋病基因治疗基础研究

• 批准号: 05262214
• 负责人: 島田 隆
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05262214/
• 关键词: 遺伝子治療; エイズ; AAVベクター; デコイ

AIDSの遺伝子治療を行うためにはHIVの増殖を阻害する抗HIV遺伝子の同定と共に、その抗HIV遺伝子を標的細胞となるリンパ球或いは造血幹細胞に高い効率で導入できるベクターの開発が不可欠である。これまでの研究で、アンチセンス、リボザイム等の抗HIV効果が確認されているが、ベクターについては現在一般に用いられているレトロウイルスベクターではヒト血球細胞への遺伝子導入効率や遺伝子発現効率が十分でなく、臨床応用を行ううえでの一つの障害となっている。アデノ随伴ウイルス(Adenoassociated virus:AAV)は、病原性が無く細胞に侵入後、染色体に組み込まれるため遺伝子治療のベクターとして期待されている。我々は、AAVベクターの開発を行っているが、この研究ではAAVベクターを使った、AIDS遺伝子治療の可能性を検討している。AAVベクターの基礎技術については、パッケイジング細胞の樹立に成功し、AAVベクターの大量生産法を確立した。又、硫酸化セルロースカラムを使ったAAVベクターの濃縮技術を開発した。このようにして作られたAAVベクターがリンパ球を含めた血液系の細胞に高率にマーカー遺伝子を導入できることを示した。AIDS遺伝子治療用のベクターとしては、TARデコイをtRNA或いはアデノウイルスVAIのpolIIIプロモーターに連結した発現ユニットを野生型AAVに挿入した。この組換えウイルスをCEM細胞に導入し、TARデコイが発現していることを確認した。更に、ネオマイシン耐性遺伝子(neoR)とTARデコイを持つdouble geneベクターを作成した。現在、neoRとTARデコイの位置、方向を変化させ、それぞれの発現に及ぼす影響を検討している。又、これらのベクターのリンパ球への導入効率、抗HIV効果の検討を行っている。

HIV infection prevention and treatment of HIV infection. The results of anti-HIV effects such as anti-HIV, anti-HIV, anti Adenoassociated virus (AAV) is a non-invasive, pathogenic virus. It is expected to be treated with anti-virus therapy after cell invasion and chromosome organization. We want to explore the development of AAV and AIDS virus therapy. The basic technology of AAV is successfully established, and the mass production method of AAV is established. In addition, the concentration technology of sulfuric acid is developed. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with a person who's been in a relationship with a person. AIDS virus therapy is used to detect and detect the presence of wild-type AAV. This is the first time I've ever seen one. In addition, the gene resistance gene (neoR) and TAR The position, orientation, occurrence and impact of neoR and TAR are discussed. In addition, the introduction efficiency of anti-HIV effect and the development of anti-HIV effect are discussed.

项目成果

島田 隆: "Oncology-遺伝子の病気としての癌" メジカルビュー社(印刷中), (1994)

Takashi Shimada：“肿瘤学 - 癌症作为一种遗传疾病”Medical View Publishing（印刷中），（1994 年）

島田 隆: "遺伝子導入技術の進歩,増刊 「遺伝子診断と遺伝子治療」" 現代化学. (印刷中). (1994)

Takashi Shimada：“基因转移技术的进展，特别版‘基因诊断和基因治疗’”Gendai Kagaku（正在出版）。

Shirasaka T.: "Changes in drug sensitivity of human immumodeficiency virus Type 1 during therapy with azidothymidine,dideoxycytidine,and dideoxyinosine: An in vitro comparative study" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 90. 562-566 (1993)

Shirasaka T.：“叠氮胸苷、双脱氧胞苷和双脱氧肌苷治疗期间人类免疫缺陷病毒 1 型药物敏感性的变化：一项体外比较研究”Proc.Natl.Acad.Sci.USA。

島田 隆: "抗HIV遺伝子を使った遺伝子治療の可能性-増刊号「HIV感染症・AIDS 1993年」" 日本臨床. 51. 229-234 (1993)

Takashi Shimada：“使用抗 HIV 基因进行基因治疗的可能性 - 特刊‘HIV 感染/艾滋病 1993’”Ni​​ppon Clinical 51. 229-234 (1993)

Shimada T.: "Purification CD4DFA can incorporate into CD4-negative cells and function as a receptor for targeted HIV-mediated gene transfer" Hum.Gene Ther.(in press). (1994)

Shimada T.：“纯化 CD4DFA 可以整合到 CD4 阴性细胞中，并作为 HIV 介导的靶向基因转移的受体发挥作用”Hum.Gene Ther.（出版中）。