AIDS遺伝子治療のためのベクターの開発

艾滋病基因治疗载体的开发

• 批准号: 06255215
• 负责人: 島田 隆
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06255215/
• 关键词: 遺伝子治療; エイズ; HIVベクター; デコイ; 自殺遺伝子

我々はAIDS遺伝子治療の臨床応用に向けてCD4陽性細胞に特異的に高い効率で遺伝子が導入できるHIVベクターの開発を行っている。今回の研究では、臨床応用に向けて安全性の高い改良型HIVベクターを作製し、それを用いてTARデコイ、自殺遺伝子(単純ヘルペスチミジンキナーゼ(HSV-TK))等の抗HIV遺伝子による遺伝子治療の検討を進めた。1)ベクタープラスミドとパッケイジングプラスミドの組換えによる野生型ウイルス発生の可能性を除くためgag,pol発現ベクターとenv発現ベクターに分割したパッケイジングプラスミドを作製したところ、産生されたベクター量は非分割パッケイジングプラスミドを用いた場合の約1/10-1/100であった。2)gag遺伝子の開始コドンATGをATCに、スプライシングシグナルTGGTをTCGCにそれぞれ変異させ、組換えが起こってもgag遺伝子が発現しないようにしたベクタープラスミドを作製したところ、ベクターの力価は約三倍に向上した。3)HIVの遺伝子発現に不可欠なTATとTAR配列の結合を阻害するTARデコイは有力な抗HIV遺伝子であるが、その発現はHIVベクターの産生をも抑制する可能性があるため、TAT非依存性のCMVとHIV-LTRのハイプリッドプロモーターを持つHIVベクター産生系を開発し、現在tRNAのpolIIIプロモーターと連結したTARデコイをもつHIVベクターを作製し抗HIV活性の検討を行っている。4)HIV-LTRに連結して、TAT依存性に発現するHSV-TK遺伝子をもつHIVベクターを作製し、HeLa,H9などのヒト細胞株にHSV-TK遺伝子を導入し、HIV感染実験を行った。HSV-TK遺伝子はTAT依存性に発現し、ガンシクロビールを投与してもHIVが感染した場合のみ効果を示した。現在HIV増殖抑制効果について検討中である。

We are working towards the development of HIV virus therapy in clinical settings with high efficiency and specific CD4-positive cells. The current study is aimed at improving the safety of anti-HIV gene therapy in clinical practice, and exploring new approaches to anti-HIV gene therapy such as TAR and suicide gene therapy (HSV-TK). 1) The probability of occurrence of wild type virus is about 1/10-1/100 when the virus is generated and the amount of virus generated is about 1/10-1/100. 2) The initial position of the gag transmitter ATG is ATC, the position of the transmitter TGGT is TCGC, and the initial position of the gag transmitter TGGT is ATC. The initial position of the gag transmitter is ATC. The initial position of the gag transmitter TGGT is ATC. The initial position of the gag transmitter TGGT is ATC. The initial position of the gag transmitter TGGT is ATC. The initial position of the gag transmitter TGGT is ATC. 3)HIV gene expression can not be inhibited by TAT and TAR alignment binding, but the possibility of inhibiting HIV gene expression can be discussed. TAT independent CMV and HIV LTR can be inhibited by TAR and TAR alignment binding. 4)HIV-LTR linkage, TAT dependency development, HSV-TK gene transfer, HIV infection prevention, HeLa,H9 cell lines HSV-TK gene transfer, HIV infection prevention. HSV-TK virus TAT dependent development, and the impact of HIV infection HIV proliferation inhibition is now in progress.