グルタミン酸レセプターmRNA表現型の多様性とRNAエディット

谷氨酸受体 mRNA 表型多样性和 RNA 编辑

• 批准号: 05265218
• 负责人: 植田 弘師
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1994
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05265218/
• 关键词: グルタミン酸受容体; RNAエディット; mRNAスプライシング; クローニング; 神経再生; 表現型転換; シナプス可塑性

本研究者はグルタミン酸受容体が神経ネットワークにおける可塑性形成にどのようにかかわっているかを研究する目的で受容体mRNA表現型転換に注目して以下のような研究を行った。2種の金魚AMTP受容体GFGR49及びGFGR52をクローニングした。GFGR49クローンはイントロンを残すRNAプロセシングの未熟なままのクローンで、ラットAMPA型C-FLIP型に相当し、GFGR52は同D-FLOP型に相当した。このGFGR52については5'末端部にそのクローンのアルタナティブスプライシングされうるエクソンの一部(60塩基)が逆向き相補的に付加されたDNA再配列産物であり、この相補的配列はRNAエディットにおけるガイドRNAとなりうる可能性を示唆した。一方、金魚網膜と脳視蓋における両受容体のmRNA表現型をRNAaseプロテクション実験で検討したところ、アルタナティブスプライシングされるエクソン領域において期待されるRNAバンドに加え、同程度の発現量で数本新たなバンドが検出され、RNAエディットなどにより、スプライシング部位が変異を受け、二次選択のスプライシング部位がエクソン内に認識されたと推定した。次いで、視神経の圧搾による変性とそれに続く再生時に網膜と脳視蓋でのGFGR49およびGFGR52のmRNA発現の顕著な減少が認められ、シナプス再形成後はmRNA発現の顕著な減少は消失した。一方、GFGR49の3'末端部のRNAaseプロテクション実験では、このシナプス再形成時に特異的に新しいバンドが認められた。こうした事実はRNAエディットなどのmRNA表現型転換機構が神経の変性および再生に伴い対応して変動するという新しい概念の基礎となるなると思われる。

The purpose of this study was to investigate receptor mRNA phenotype changes in the development of neuroplasticity in the receptor. Two goldfish AMTP receptors GFGR49 and GFGR52 were identified. GFGR49 is the equivalent of AMPA-type C-FLIP and GFGR52 is the equivalent of D-FLOP. The GFGR52 gene is located in the 5'terminal region of the genome, and a portion of the genome (60 base) is added to the DNA rearrangement product. The complementary DNA rearrangement product is located in the 5' terminal region of the genome. The mRNA phenotype of the receptor in the retina of goldfish is different from that in the retina of goldfish. The mRNA phenotype of the receptor is different from that in the retina of goldfish. The secondary selection of the first part of the list is based on the analysis of the results. The mRNA expression of GFGR49 and GFGR52 in retina and retina decreased after regeneration. The RNAase at the 3'end of GFGR49 was found to be unique when it was regenerated. The expression of mRNA is the basis for the development of a new concept.