权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ニワトリの左右卵巣の不斉分化現象の遺伝子レベルの解析

鸡左右卵巢不对称分化的基因水平分析

基本信息

批准号：
05277201
负责人：
水野重樹
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ニワトリ胚における左卵巣の分化と右卵巣の退化過程を遺伝子発現レベルで比較することを目的としているが、本年度はこのための遺伝子プローブの取得と解析を進めた。1)卵巣特異的に発現する2種の新規遺伝子の解析:孵化後1-3日のヒヨコの左卵巣cDNAライブラリーから、卵巣で高発現している17クローンを選別して部分的な塩基配列等を調べた。その結果、卵巣の形態形成に関係が深いと考えられる2種のcDNAクローン、pZOV3.pLOAO411に注目して解析を進めた。ZOV3遺伝子はサザンブロットならびに蛍光in situハイブリダイゼーションの結果からZ染色体短腕のほぼ中央部に局在することが示された。pZOV3は4425bpのインサーを含み、5'側に327アミノ酸残基をコードするORFが存在した。DNAデータベースを検索した結果、ZOV3は免疫グロブリンスーパーファミリーに属し、2つのC2タイプIg-ループドメインを有することが分かったが、マウスのGP-70と33%、ニワトリのHT7と23%の相同性を示すのみで、卵巣特異的な発現ともあわせて新規遺伝子と考えられた。pLOAO411は常染色体の遺伝子で、約9.5kbの転写産物が卵巣でのみ検出された。現在、cDNA塩基配列決定を進めているが、決定された範囲では相同性のある遺伝子は見い出されなかった。多くのCys残基とN-結合型糖鎖付加部位を含むことからレセプター様の糖タンパク質をコードする遺伝子ではないかと推定している。2)性ステロイドホルモン合成酵素系遺伝子のcDNAクローニングと発現解析:コレステロールからエストラジオール-17βの生成に関与する5種の酵素の中、ニワトリでまだ得られていない3種の酵素のcDNAクローニングと培養細胞での発現確認を目指している。本年度は、3β-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ/Δ5→4イソメラーゼのcDNAクローニング、塩基配列決定、cos7細胞での発現と3種の基質に対する酵素活性の確認を行なった。

The differentiation of the left egg and the degradation process of the right egg are analyzed in this year's analysis. 1)The analysis of two new genes specific to egg development: 1-3 days after hatching, the left egg cDNA was selected from 17 different genes, and the gene alignment of the left egg cDNA was adjusted. The results of the study showed that there were two kinds of cDNA fragments, pZOV3.pLOAO411, which were analyzed in detail. ZOV3 gene mutation in the middle part of the short arm of Z chromosome pZOV3 contains the 4425bp amino acid residue and the 327 bp amino acid residue. DNA detection results, ZOV3 immune response to the virus, 2 C2 protein Ig-1 response to the virus, 2 C2 protein Ig-1 response to the virus, 2 C2 protein GP-70 and 33%, 2 C2 protein HT-7 and 23% identity to the virus, egg specific detection results, 2 C2 protein Ig-1 response to the virus. pLOAO411 contains an autosomal DNA fragment of approximately 9.5 kb. Now, the cDNA sequence is determined. A large number of Cys residues and N-linked carbohydrate binding sites were identified. 2)Analysis of cDNA library and expression of enzyme system gene: Among the five enzymes involved in the production of gene-17 β, three of them were identified by cDNA library and expression confirmation of cultured cells. This year, we carried out confirmation of enzyme activity of 3β-DNA-related enzymes, 3β-DNA-related enzymes, 3 β-DNA-related enzymes, 4 β-DNA-related enzymes, 3 β-DNA-related enzymes, 3 β-DNA-related enzymes, 4 β-DNA-related enzymes, and 3 β-DNA-related enzymes.