染色体ドメインの機能構造

染色体结构域的功能结构

• 批准号: 02260101
• 负责人: 水野 重樹
• 金额: $ 20.29万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02260101/
• 关键词: ヘテロクロマチン; DNAメチル化; 湾曲DNA; アルフォイド反復DNA; セントロメア抗原タンパク質; 核移行シグナル; ユビキチン活性化酵素; DNAトポイソメラ-ゼII

真核生物の染色体が各種の異なった機能ドメインから成り立つという観点に立ち、この様なドメインの構造を分子レベルで解析することを目的として研究を進めた。<水野>___ーは染色体の凝縮ドメインの構造をニワトリのW染色体が形成するヘテロクロマチンをモデルとして研究し、同染色体DNAの70〜90%が約21bp基本単位が縦列重複した構造からなり、高度にメチル化修飾を受け、高度に湾曲したDNA構造をとることを示し、この様な特徴を示すDNAに高親和性結合する非ヒストタンパク質をニワトリMSBー1細胞および肝臓の核内から部分精製した。<岡崎>___ーはヒト染色体の動原体領域に局在するアルフォイド反復DNAとセントロメア抗原タンパク質の一種であるCENPーBが相互作用することに着目し、アルフフォイドDNA中の17塩基の配列が結合に関与することを明らかにした。さらにCENPーBタンパク質中のDNA結合部位がN末端側にあることを示した。<米田>___ーは核内で染色体の構築等に働くタンパク質が細胞質から核内に移内する機構を調べているが、本研究では分子量69Kのタンパク質を核膜孔複合体画分から部分精製し、このタンパク質が核移行シグナルに結合する性質を持つことを示した。<瀬野>___ーはマウス培養細胞からチミン飢餓条件下でも染色体DNAの特異的切断を生じない高温感受性致死変異株を分離し、この変異がユビキチン活性化酵素のcDNA導入により相補されることを示した。<広瀬>___ーは染色体DNAの超らせん形成の分子機構を調べ、核骨格結合領域(SAR)を含むDNAがDNAトポイソメラ-ゼIIと超らせん化因子の存在下で効率よく超らせん化することを示した。<柴田>___ーは染色体換えの開始反応に働くと予想される、塩基配列特異的2重鎖切断を行う酵素Scelを酵母から精製し、75Kと50Kのサブユニットのヘテロダイマ-であること、75Kの遺伝子は核に、50Kの遺伝子はミトコンドリア中に存在することを示した。

从真核染色体由各种不同功能结构域组成的角度来看，进行研究的目的是分析分子水平的此类结构域的结构。 <Mizuno>_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ <okazaki> ___-重点关注藻类重复DNA的相互作用，该藻定位于人类染色体的丝粒区和CENP-B（一种cenp-b）（一种cenp-b），一种cenp-b（一种丝状抗原蛋白），并揭示了藻类DNA中的17个基本序列与结合。此外，表明CENP-B蛋白中的DNA结合位点位于N末端。 <Yoneda> ___-研究了在细胞核中作用在染色体中作用的蛋白质的机制，从细胞质转移到细胞核。在这项研究中，从核孔复合部分部分纯化了分子量为69K的蛋白质，表明该蛋白具有与核易位信号结合的特性。 <seno> ____分离了一个高温敏感的致死突变体，即使在胸腺剂饥饿条件下，也不会经历特异性的染色体DNA裂解，这表明该突变是通过cDNA引入泛素激活酶的cDNA互补的。 <Hirose> ___-研究了染色体DNA的过度螺旋形成的分子机制，表明含有核骨架结合区（SAR）的DNA在存在DNA拓扑异构酶II和屈服因子的情况下有效地过度齐甲化。 <Shibata>________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

项目成果

N.Morishima: "A subunit of yeast siteーspecific endonuclease <Sce>___ーI is a mitochondrial version of the 70ーkDa heat shock protein" J.Biol.Chem.265. 15189-15197 (1990)

N.Morishima：“酵母位点特异性核酸内切酶 <Sce>___-I 的亚基是 70-kDa 热休克蛋白的线粒体版本”J.Biol.Chem.265 (1990)。

S.Mizuno: "New aspects of the genetics of molecular evolution (eds.M.Kimura and N.Takahata),pp.213ー226" Japan Sci.Soc.Press,Tokyo and SpringerーVerlag,Berlin, 322 (1991)

S. Mizuno：“分子进化遗传学的新方面（M.Kimura 和 N.Takahata 编），第 213-226 页”Japan Sci.Soc.Press，东京和 Springer-Verlag，柏林，322 (1991)

N.ImamotoーSonobe: "A protein recognized by antibodies to AspーAspーAspーGluーAsp shows specific binding activity to heterogeneous nuclear transport signals" J.Biol.Chem.265. 16504-16508 (1990)

N.Imamoto-Sonobe：“Asp－Asp－Asp－Glu－Asp 抗体识别的蛋白质显示出对异质核转运信号的特异性结合活性”J.Biol.Chem.265（1990）。

T.Ohta: "Purification of a DNA supercoiling factor from the posterior silk gland of <Bombyx>___ー <mori>___ー" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 5307-5311 (1990)

T.Ohta：“从 <Bombyx>____ <mori>____ 后丝腺中纯化 DNA 超螺旋因子”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87. 5307-5311 (1990)。

S.Kaneda: "Strucutural and functional analysis of the human thymidylate synthase gene" J.Biol.Chem.265. 20277-20284 (1990)

S.Kaneda：“人胸苷酸合酶基因的结构和功能分析”J.Biol.Chem.265。