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クロマチンの構造変化の解析によるフィブロインH鎖、L鎖遺伝子の転写制御の研究

通过分析染色质结构变化研究丝素H链和L链基因的转录调控

基本信息

批准号：
63620501
负责人：
水野重樹
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

フィブロインH鎖、L鎖両遺伝子の同調的発現制御機構ならびにカイコの脱皮周期に伴うフィブロインH鎖遺伝子のクロマチン構造の変動の解析を目的として研究を行なった。1.フィブロインL鎖の1次構造と遺伝子構造:L鎖CDNACpFL18)の塩基配列決定とL鎖のトリプシンおよびキモトリプシン分解で得られたペプチドのアミノ酸配列決定により、プレL鎖(262残基)から18残基のシグナルペプチドが除かれて244残基(分子量25,800)のL鎖が生成すること、N末はアセチル化されていることなどを示した。一方、コスミドクローンpKYFL139-1、139-2の塩基配列決定によりL鎖遺伝子は7個のエキソンよりなり、全長は約14.4kbで約7.8kbの大きな第1イントロンを含むことが明らかになった。2.フィブロインL鎖遺伝子の5′上流域に結合するタンパク質因子:L鎖遺伝子の5′上流域に3ヶ所存在するH鎖遺伝子の5′上流域と相同性の高い配列のうち-306〜-277の部位の配列に塩基配列特異的に結合する核内タンパク質因子が後部絹糸腺特異性が高いことを見出した。現在この因子の結合配列の特定とDNAアフィニティーカラムなどによる精製を目指している。3.フィブロインH鎖遺伝子のクロマチン構造の変動の解析:既に報告した後部絹糸腺と中部絹糸腺の組織間、カイコの脱皮周期(4令、4眠、5令)の各時点における後部絹糸腺の核内のH鎖遺伝子クロマチン構造の変動をより詳細に解析するため、転写開始点の約6kb上流のEcoRI〜HindIII断片(0.5kb)、-546〜-381、-96〜+66の3ヶ所の非反復配列プローブを作製して、40cmアガロースゲル電気泳動とサザンハイブリッド形成法などによる解析を行った。

In the same way as in the same system, the system is responsible for the peeling cycle and the peeling cycle. the purpose of the study is to analyze the purpose of the research. 1. CDNACpFL18) the base column determines the number of residues (molecular weight 25800), which is generated by the decomposition of the acid column. At the end of the day, please do not know what to do. On the one hand, it is decided that pKYFL139-1,139-2 should be used in the first two years. The total length of the 7.8kb will be about the same as that of the 7.8kb, and the full length of each of them will be determined. two。 In the upper catchment, there are some factors in the upper watershed, which are located in the upper watershed in the upper watershed, which are located in the upper watershed. Now you can use the combination of the specific DNA factors in the column that you want to specify. 3. It was reported that both the central and central glandular tissue in the back of the report, the peeling cycle (4, 4 sleep, 5) at each time point, the exercise in the nucleus of the back of the gland, the exercise in the nucleus of the back of the gland. The EcoRI~HindIII fragment (0.5kb) on the 6kb, the non-reverse configuration device (0.5kb) on-546mm