神経障害時の低分子量分子シャペロンの応答と生理的意義

低分子量分子伴侣在神经系统疾病过程中的反应和生理意义

• 批准号: 09280240
• 负责人: 加藤 兼房
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09280240/
• 关键词: hsp27; カイニン酸; カルシウム結合蛋白質; αクリスタリン; リン酸化; ストレス; MAPキナーゼ; 細胞分裂

カイニン酸誘導痙攣発作ラットにおけるストレス蛋白質の応答を解析し、以下の結果を得た。1)カイニン酸投与後48-96時間で極大値(1.5-2μg/mg protein)を示す30-50倍の顕著なhsp27の誘導が、海馬と内嗅皮質で観察された。また、mRNAレベルも顕著に増加していた。10日後でも数百ng/mg proteinの高いレベルであった。嗅球でも軽度のhsp27の誘導が認められたが、小脳では応答がなかった。2)2種類のカルシウム結合蛋白質、28-kDa calbindin-Dとparvalbumin、が小脳では海馬の10倍以上存在し、これが小脳への障害を防いでいることが示唆された。3)αBクリスタリンも数倍の濃度に上昇していたが、極大値でも50ng/mg protein以下の低濃度であった。一方hsp70も増加していたが、濃度は低くかった。hsc70のレベルは増加していなかった。4)hsp27抗体を用いた免疫組織化学では、海馬、視床、梨状葉皮質、内嗅皮質、脳梁のグリア細胞およびニューロンが強く染色された。正常対照ラットでは、海馬錐体細胞など神経細胞が染色され、グリア細胞はほとんど染色されなかった。以上の結果より、hsp27の顕著な発現誘導はカイニン酸誘導発作後に傷害された組織のグリア細胞で認められ、障害組織の修復に関与していることが推測された。ヒトグリオーマ細胞U373 MGを用いてαBクリスタリンのリン酸化について解析し、以下の結果を得た。1)αBクリスタリンもhsp27と同様、種々のストレスによって、最高三カ所のセリン残基がリン酸化され、その位置はSer19,Ser45とSer59である。2)αBクリスタリンはp38とp44/42 MAPキナーゼカスケードが関与する酵素によってリン酸化される。3)特異抗体を使った解析で、細胞分裂期にはSer45とSer19のリン酸化が特異的・普遍的に高進していることを発見した。

Youdaoplaceholder0 ニ ニ <s:1> acid-induced spasticity produces ラットにおけるストレス protein <s:1> 応 answer を analysis カ, the following <s:1> results を give た. 1) カ イ ニ ン で acid and 48-96 time greatly nt 1.5 2 mu (g/mg protein) を す in 30 to 50 times の 顕 the な hsp27 の induced が, hippocampal と olfactory cortex で 観 examine さ れ た. Youdaoplaceholder0 and mRNAレベ また 顕 顕 顕 に に increase た て た た た. Ten days later, で hundreds of ng/mg protein <s:1> high レベ レベ であった であった であった であった. The olfactory bulb で 軽 軽 degree <s:1> hsp27 <s:1> induces が recognition められたが, small 脳で 応 応 応 がな response がな った った った. 2) 2 kinds の カ ル シ ウ ム binding protein, 28 - kDa calbindin -d と parvalbumin, small が 脳 で は の hippocampus 10 times more し, こ れ が small 脳 へ の handicap of を anti い で い る こ と が in stopping さ れ た. 3) alpha B ク リ ス タ リ ン に rise several times も の concentration し て い た が, great numerical で も ng / 50 mg protein の under low concentration で あ っ た. One side of hsp70 increases て て たが, and the concentration <s:1> is low く った った. hsc70 レベ レベ レベ て て increase て て な った った. 4) を hsp27 antibody with い た immunohistochemical で は and, depending on the bed, piriform cortex, hippocampus entorhinal cortex, 脳 beam の グ リ ア cells お よ び ニ ュ ー ロ ン が strong く dyeing さ れ た. Normal comparison: ラットで されな, hippocampal pyramidal cells な <e:1>, neurogenic cells が staining され, グリア cells <s:1> ほとん <s:1> <s:1> staining されな った った. の above results よ り, hsp27 の 顕 the な 発 now induced は カ イ ニ ン acid induced 発 as に damage after さ れ た organization の グ リ で ア cells to recognize め ら れ, handicap of の repair に masato and し て い る こ と が speculation さ れ た. ヒ ト グ リ オ ー マ cells U373 MG を using い て alpha B ク リ ス タ リ ン の リ ン acidification に つ い て analytical し, the result of the following の を た. 1) alpha B ク リ ス タ リ ン も hsp27 と with others, kind of 々 の ス ト レ ス に よ っ て, highest three カ の セ リ ン residues が リ ン acidification さ れ, そ の position は Ser19, Ser45 と Ser59 で あ る. 2) alpha B ク リ ス タ リ ン は p38 lightning と p44/42 MAP キ ナ ー ゼ カ ス ケ ー ド が masato and す る enzyme に よ っ て リ ン acidification さ れ る. 3) specific antibody を っ た parsing で, cell division period に は Ser45 と Ser19 の リ ン acidification が high specific, common に into し て い る こ と を 発 see し た.

项目成果

Ito,H.,et al.: "Prostaglandins stimulate the stress-induced synthesis of hsp27 and αB crystallin." J.Cell.Physiol.170. 255-262 (1997)

Ito, H., et al.：“前列腺素刺激应激诱导的 hsp27 和 αB 晶状体蛋白的合成。”J.Cell.Physiol.170 (1997)。

Morishita,R.,et al.: "Differential localization of the γ3 and γ12 subunits of G proteins in the mammalian brain." J.Nerurochem.68. 820-827 (1997)

Morishita, R. 等人：“哺乳动物大脑中 G 蛋白的 γ3 和 γ12 亚基的差异定位。J.Nerurochem.68 (1997)”。

Beall,A.C.,et al.: "Cyclic nucleotide-dependent vasorelaxation is associated with the phosphorylation of a small heat shock-related protein." J.Biol.Chem.272. 11283-11287 (1997)

Beall,A.C.等人：“环核苷酸依赖性血管舒张与一种小的热休克相关蛋白的磷酸化有关。”

Ichihara,S.,et al.: "Epitherial hyperplasia of usual type expresses both S100-α and S100-β in a heterogeneous pattern but ductal carcinoma in situ can express only S100-α in a monotonous pattern." Histopathology. 30. 533-541 (1997)

Ichihara,S.,et al.：“普通型上皮增生以异质模式表达 S100-α 和 S100-β，但原位导管癌只能以单调模式表达 S100-α。” 30. 533。 -541 (1997)

Ito,H.,et al.: "Phosphorylation of αB-crystallin in response tovarious types of stress." J.Biol.Chem.272. 29934-29941 (1997)

Ito, H., 等人：“αB-晶状体蛋白对各种类型应激的磷酸化。”J.Biol.Chem.272（1997）。