Aggresomeの構成成分であるリン酸化αBクリスタリンの生理的・病理的意義

Aggresome 成分磷酸化 αB-晶状体蛋白的生理和病理意义

• 批准号: 13210159
• 负责人: 加藤 兼房
• 金额: $ 4.48万
• 依托单位: Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13210159/
• 关键词: αBクリスタリン; Hsp27; リン酸化; 廃用萎縮筋; 細胞内封入体; アグリゾーム; 蛋白質品質管理; プロテアゾーム

平成13年度の研究成果。(1)ヒトグリオーマ細胞U373MGは恒常的にαBクリスタリンとHsp27が高いレベルで発現している。この細胞にプロテアゾーム阻害剤であるMG-132あるいはラクタチスチンを曝露すると、両分子シャペロンの合成の誘導と、分子内セリン残基のリン酸化ご促進され、それらはとくに不溶性分画に蓄積し、形態学的には核周辺部にアグリゾームと思われる封入体が形成され、その構成成分として、両シャペロンおよびそのリン酸化型とともに、ビメンチン、ユビキチン、プロテアゾーム、βチュブリンが検出された。微小管脱重合促進剤であるノコダゾールを共存させるとアグリゾームの形成は阻止されたが、両シャペロンの合成の誘導、不溶性分画への蓄積、リン酸化の促進は影響を受けなかった。また、リン酸化の促進は、p44/42MAPKおよびp38MAPKカスケードの高進に起因し、その阻害剤であるSB203580またはPD169316によって両シャペロンのリン酸化は阻止された。しかし、合成の誘導と不溶性分画への蓄積とアグリゾーム形成は影響を受けなかった。すなわち、アグリゾーム形成にはリン酸化は無関係であることが明らかになった。HeLa細胞でも、MG-132処理により、Hsp27を含んだアグリゾームの形成が認められた。また、NG108-15細胞に、cystic fibrosisの病因遺伝子を発現させると、αBクリスタリンを含んだアグリゾームの形成が観察された。以上の結果より、αBクリスタリンとHsp27が細胞内蛋白質の品質の管理に関与していることが示唆されるが、それらのリン酸化の意義は不明である(2)後肢懸垂によって誘導した廃用萎縮ラットヒラメ筋でのαBクリスタリンとHsp27の応答は、上記の培養細胞系でのプロテアゾーム阻害剤曝露時の応答と極似していた。しかも、懸垂中に坐活神経を片側切断すると、切断側の応答が直ちに消滅することから、これらの応答が神経支配を受けていることが明らかになった。

Research achievements of the year Heisei 13. (1) ヒ ト グ リ オ ー マ cells U373MG は constant に alpha B ク リ ス タ リ ン と Hsp27 が high い レ ベ ル で 発 now し て い る. こ の cells に プ ロ テ ア ゾ ー ム resistance against tonic で あ る MG - 132 あ る い は ラ ク タ チ ス チ ン を exposure す る と, struck molecular シ ャ ペ ロ ン の synthesis induction と の, intramolecular セ リ ン residues の リ ン acidification ご promote さ れ, そ れ ら は と く に insoluble points draw に accumulation し, morphological に は nucleus weeks 辺 に ア グ リ ゾ ー ム と think わ れ る が seal in body Form さ れ, そ の composition と し て, struck シ ャ ペ ロ ン お よ び そ の リ ン acidification model と と も に, ビ メ ン チ ン, ユ ビ キ チ ン, プ ロ テ ア ゾ ー ム, beta チ ュ ブ リ ン が 検 out さ れ た. Tiny tube to take off the overlap promote tonic で あ る ノ コ ダ ゾ ー ル を coexistence さ せ る と ア グ リ ゾ ー ム の form は stop さ れ た が, struck シ ャ ペ ロ ン の synthetic の induction, insoluble へ の accumulation, リ ン acidification の promote は を by け な か っ た. ま た, リ ン acidification の promote は, p44/42 mapk お よ び p38MAPK カ ス ケ ー ド の cause high into に し, そ の resistance against tonic で あ る SB203580 ま た は PD169316 に よ っ て struck シ ャ ペ ロ ン の リ ン acidification は stop さ れ た. The influence of <s:1> on the formation of へ insoluble fractions induced by <s:1> and synthetic <s:1>, the accumulation of とアグリゾ and ム is affected by けな けな った. す な わ ち, ア グ リ ゾ ー ム form に は リ ン acidification は no masato is で あ る こ と が Ming ら か に な っ た. HeLa cells で で, MG-132 processing によ, and Hsp27を containing んだアグリゾ ム ム ム <s:1> form が recognition められた. に ま た, NG108 15 cells, cystic fibrosis の causes heritage 伝 son を 発 now さ せ る と, alpha B ク リ ス タ リ ン を containing ん だ ア グ リ ゾ ー ム の form が 観 examine さ れ た. の above results よ り, alpha B ク リ ス タ リ ン と Hsp27 が intracellular protein の の quality management に masato and し て い る こ と が in stopping さ れ る が, そ れ ら の リ ン acidification は の meaning unidentified で あ る (2) hind legs dangling に よ っ て induced し た 廃 with shrinking ラ ッ ト ヒ ラ メ reinforcement で の alpha B ク リ ス タ リ ン と Hsp27 の 応 は, written answer の culture When the nutrient cell line is exposed to a damage inhibitor, the <s:1> 応 answer と is very similar to the <s:1> て て た た た た. し か も, drape に by the living god 経 を piece cut す る と, cut side の 応 answer が straight ち に eliminate す る こ と か ら, こ れ ら の 応 が 経 dominate を god answer by け て い る こ と が Ming ら か に な っ た.

项目成果

Kato, K.: "Expression and phosphorylation of mammalian small heat shock proteins. in Small Stress Proteins. Progress in Molecular and Subcellular Biology vol28"Springer Verlag, Heidelberg. 22 (2002)

Kato, K.：“哺乳动物小热休克蛋白的表达和磷酸化。小应激蛋白。分子和亚细胞生物学进展第 28 卷”Springer Verlag，海德堡。

Kato, K.: "Protein kinase inhibitors suppress stress-induced dissociation of Hsp27."Cell Stress & Chap.. 6. 16-20 (2001)

Kato, K.：“蛋白激酶抑制剂可抑制应激诱导的 Hsp27 解离。”细胞应激

Kozawa, O.: "Mechanism of prostaglandin D_2-stimulated heat shock protein 27 induction in osteoblasts."Cell Signal.. 13. 535-541 (2001)

Kozawa, O.：“成骨细胞中前列腺素 D_2 刺激的热休克蛋白 27 诱导的机制。”Cell Signal.. 13. 535-541 (2001)

Ueda, H.: "Gα11 induces caspace-mediated proteolytic activation of Rho-associated kinase, ROCK-1, in HeLa cells"J. Biol. Chem.. 276. 42527-33 (2001)

Ueda, H.：“Gα11 在 HeLa 细胞中诱导 caspace 介导的 Rho 相关激酶 ROCK-1 的蛋白水解激活”J. Biol. 276. 42527-33 (2001)

Yamada, K.: "Nonsense and frame shift mutations in ZFHX1B, encoding smad interacting protein-1, cause a complex developmental disorder with a variety of neurocristopathies"Am.J.Hum.Genet.. 69. 1178-1185 (2001)

Yamada, K.：“编码 smad 相互作用蛋白 1 的 ZFHX1B 中的无义突变和移码突变会导致伴有多种神经嵴病的复杂发育障碍”Am.J.Hum.Genet.. 69. 1178-1185 (2001)