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神経組織での低分子量分子シャペロンのストレス応答と生理的意義

神经组织中低分子量分子伴侣的应激反应及其生理意义

基本信息

批准号：
11157236
负责人：
加藤兼房
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11157236/
关键词：
alphaB-crystallin phosphorylation hsp27 Alexauder disease Alzheimer disease

项目摘要

1 αBクリスタリンのSer-59のリン酸化を認識し、immunofluorescenceに応用できる抗体を作製した。この抗体を用いてU373MGヒトグリオーマ細胞およびHeLa細胞を染色すると、分裂期の細胞の中心体・中央体が特異的に染色された。Ser-45のリン酸化型は分裂期細胞のおもに細胞質に存在することから、αBクリスタリンのリン酸化は細胞分裂に何らかの役割を果たしていることが示唆される。2 2症例のアレキサンダー病患者脳と4症例のアルツハイマー患者脳およびage-matchした加齢対照脳について、αBクリスタリンおよびhsp27のレベルとαBクリスタリンのリン酸化状態を、ウェスタンブロット法にて解析して以下の結果を得た。(1)アレキサンダー病脳ではαBクリスタリンとhsp27が、脳抽出液の不溶性分画に多量検出された。(2)リン酸化αBクリスタリンも不溶性分画に存在し、とくにSer-59のリン酸化型が多かった。ついでSer-45のリン酸化も検出されたがSer-19のリン酸化型はわずかであった。(3)このαBクリスタリンのリン酸化状態は髄液中でも検出されるαBクリスタリンにも反映されていた。(4)アルツハイマー病脳および対照加齢脳でも、量的には少ないが、不溶性分画でαBクリスタリンおよびhsp27が検出され、また、おもにSer-59のリン酸化クリスタリンが沈着していた。3 アレキサンダー病脳切片の免疫組織化学的染色では、αBクリスタリン、hsp27およびSer-59のリン酸化型はRosenthal fiber中に検出された。一方、アルツハイマー病脳および加齢脳ではαBクリスタリンとhsp27が、同じように、おもにミエリン線維で検出され、これらの分子シャペロンの脳での沈着は、神経系の加齢変化の一つと考えられた。

1 αBククリスタリンのSer-59 acidification and recognition, immunofluorescence and antibody production. The anti-antibodies were used to stain HeLa cells using いてU373MG ヒトグリオーマcell およびHeLa cells, and mitogen-phase centrosome and centrosome specific にstaining された. Ser-45 acidified type exists in the cytoplasm of dividing cells and αBリスタリンのリン acidification は cell division にらかの Servant cut を fruit たしていることが出憆される. 2 Patients with 2 symptoms of the disease and patients with 4 symptoms of the disease脳およびage-matchしたadd齢対狠愳について、αBクリスタリンおよびhsp27のレベルとαBクリスタリンのリン acid The following results can be obtained by analyzing the status of the chemical state. (1) アレキサンダー disease 脳ではαB クリスタリンとhsp27が, insoluble separation of 脳 extract liquid and a large amount of 検出された. (2) リン-acidified αBクリスタリンも insoluble separation に presence し, とくにSer-59 のリン-acidified type が多かった.ついでSer-45のリンacidified type も検出されたがSer-19のリンacidified type はわずかであった. (3) このαBクリスタリンのリン acidified state, the でも検出されるαBクリスタリンにも reflects the されていた in the liquid. (4) アルツハイマー disease 脳および対毾梢脳でも, the amount of には小ないが, the insoluble separation でαB クリスタリンおよびhsp27が検出され、また、おもにSer-59のリンacidified クリスタリンが综合していた. 3. Immunohistochemistry staining of diseased patient sections: では, αB ククスタリン, hsp27 およびSer-59 のリン acidified type は Rosenthal The fiber is out of the fiber. One side, アルツハイマー disease 脳および加齢脳ではαBクリスタリンとhsp27が, same じように, おもにミエリン线dimensional で検出され, これらのmolecule シャペロンの脳での正は, 神経组の加駢変化の一つと考えられた.