神経組織での低分子量分子シャペロンのストレス応答と生理的意義

神经组织中低分子量分子伴侣的应激反应及其生理意义

基本信息

批准号：
11157236
负责人：
加藤兼房
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11157236/
关键词：
alphaB-crystallin phosphorylation hsp27 Alexauder disease Alzheimer disease

项目摘要

1 αBクリスタリンのSer-59のリン酸化を認識し、immunofluorescenceに応用できる抗体を作製した。この抗体を用いてU373MGヒトグリオーマ細胞およびHeLa細胞を染色すると、分裂期の細胞の中心体・中央体が特異的に染色された。Ser-45のリン酸化型は分裂期細胞のおもに細胞質に存在することから、αBクリスタリンのリン酸化は細胞分裂に何らかの役割を果たしていることが示唆される。2 2症例のアレキサンダー病患者脳と4症例のアルツハイマー患者脳およびage-matchした加齢対照脳について、αBクリスタリンおよびhsp27のレベルとαBクリスタリンのリン酸化状態を、ウェスタンブロット法にて解析して以下の結果を得た。(1)アレキサンダー病脳ではαBクリスタリンとhsp27が、脳抽出液の不溶性分画に多量検出された。(2)リン酸化αBクリスタリンも不溶性分画に存在し、とくにSer-59のリン酸化型が多かった。ついでSer-45のリン酸化も検出されたがSer-19のリン酸化型はわずかであった。(3)このαBクリスタリンのリン酸化状態は髄液中でも検出されるαBクリスタリンにも反映されていた。(4)アルツハイマー病脳および対照加齢脳でも、量的には少ないが、不溶性分画でαBクリスタリンおよびhsp27が検出され、また、おもにSer-59のリン酸化クリスタリンが沈着していた。3 アレキサンダー病脳切片の免疫組織化学的染色では、αBクリスタリン、hsp27およびSer-59のリン酸化型はRosenthal fiber中に検出された。一方、アルツハイマー病脳および加齢脳ではαBクリスタリンとhsp27が、同じように、おもにミエリン線維で検出され、これらの分子シャペロンの脳での沈着は、神経系の加齢変化の一つと考えられた。

1。识别了αb晶体的Ser-59的磷酸化，并制备了可以应用于免疫荧光的抗体。当用这种抗体染色U373MG人神经胶质瘤细胞和HeLa细胞时，在有丝分裂期的细胞的中心体和中心体被特异性染色。 Ser-45的磷酸化形式主要存在于有丝分裂细胞的细胞质中，表明αB晶体蛋白的磷酸化在细胞分裂中起着一定作用。 2通过Western斑点分析了αB结晶蛋白和Hsp27的水平以及αB晶体蛋白的水平，αB晶体蛋白在两例亚历山大病大脑中的水平，四例阿尔茨海默氏症大脑以及年龄匹配的年龄匹配的对照大脑的水平。（1）在亚历山大病的大脑中，在脑提取物的不溶性部分中检测到大量的αB晶体和HSP27。（2）磷酸化的αB晶体也存在于不溶性的部分中，特别是，Ser-59的磷酸化形式很大。另外，检测到Ser-45的磷酸化，但只有一种小磷酸化形式的Ser-19。（3）αb晶体的这种磷酸化状态也反映在αB晶体中，即使在CSF中也被检测到。（4）阿尔茨海默氏病大脑和对照老化的大脑也表现出少量，但是在不溶性的部分中，检测到αB晶体蛋白和HSP27，并主要沉积Ser-59磷酸化结晶蛋白。 3在亚历山大病的脑切片的免疫组织化学染色中，在Rosenthal纤维中检测到αB晶体，Hsp27和Ser-59的磷酸化形式。另一方面，在阿尔茨海默氏病大脑和衰老的大脑（主要是髓磷脂纤维）中类似地检测到αB结晶蛋白和HSP27，并且这些分子伴侣在大脑中的沉积被认为是神经系统中与年龄相关的变化之一。