神経組織での低分子量分子シャペロンのストレス応答と生理的意義

神经组织中低分子量分子伴侣的应激反应及其生理意义

• 批准号: 11157236
• 负责人: 加藤 兼房
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11157236/
• 关键词: alphaB-crystallin; phosphorylation; hsp27; Alexauder disease; Alzheimer disease

1 αBクリスタリンのSer-59のリン酸化を認識し、immunofluorescenceに応用できる抗体を作製した。この抗体を用いてU373MGヒトグリオーマ細胞およびHeLa細胞を染色すると、分裂期の細胞の中心体・中央体が特異的に染色された。Ser-45のリン酸化型は分裂期細胞のおもに細胞質に存在することから、αBクリスタリンのリン酸化は細胞分裂に何らかの役割を果たしていることが示唆される。2 2症例のアレキサンダー病患者脳と4症例のアルツハイマー患者脳およびage-matchした加齢対照脳について、αBクリスタリンおよびhsp27のレベルとαBクリスタリンのリン酸化状態を、ウェスタンブロット法にて解析して以下の結果を得た。(1)アレキサンダー病脳ではαBクリスタリンとhsp27が、脳抽出液の不溶性分画に多量検出された。(2)リン酸化αBクリスタリンも不溶性分画に存在し、とくにSer-59のリン酸化型が多かった。ついでSer-45のリン酸化も検出されたがSer-19のリン酸化型はわずかであった。(3)このαBクリスタリンのリン酸化状態は髄液中でも検出されるαBクリスタリンにも反映されていた。(4)アルツハイマー病脳および対照加齢脳でも、量的には少ないが、不溶性分画でαBクリスタリンおよびhsp27が検出され、また、おもにSer-59のリン酸化クリスタリンが沈着していた。3 アレキサンダー病脳切片の免疫組織化学的染色では、αBクリスタリン、hsp27およびSer-59のリン酸化型はRosenthal fiber中に検出された。一方、アルツハイマー病脳および加齢脳ではαBクリスタリンとhsp27が、同じように、おもにミエリン線維で検出され、これらの分子シャペロンの脳での沈着は、神経系の加齢変化の一つと考えられた。

Alpha 1 B ク リ ス タ リ ン の Ser - 59 の リ ン acidification を し, immunofluorescence に 応 with で き る antibody を cropping し た. を こ の antibody with い て U373MG ヒ ト グ リ オ ー マ cells お よ び HeLa を dyeing す る と, divide の cells の centrosome, central body が specific に dyeing さ れ た. Ser - 45 の リ ン acidification model は cells divide の お も に cytoplasm に exist す る こ と か ら, alpha B ク リ ス タ リ ン の リ ン acidification は cell division に what ら か の "を cut fruit た し て い る こ と が in stopping さ れ る. 2 2 cases の ア レ キ サ ン ダ ー patients 脳 と 4 cases の ア ル ツ ハ イ マ ー patients 脳 お よ び age - match し た plus 齢 polices according to 脳 に つ い て, alpha B ク リ ス タ リ ン お よ び hsp27 の レ ベ ル と alpha B ク リ ス タ リ ン の リ ン acidification を, ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト method に て parsing し て の results under を た. (1) ア レ キ サ ン ダ ー disease 脳 で は alpha B ク リ ス タ リ ン と hsp27 が, 脳 extract の amount more than painting に insoluble 検 out さ れ た. (2)リ <s:1> acidified αB <s:1> リスタリ <s:1> <s:1> <s:1> に insoluble fractions に exist が とくにSer-59 <s:1> リ <s:1> acidified が polyっ た った. Youdaoplaceholder0 でSer-45 <s:1> リ <s:1> acidified わず 検 out されたがSer-19 <s:1> リ <s:1> acidified type わず わず わず であった であった であった. (3) こ の alpha B ク リ ス タ リ ン の リ ン acidification condition は marrow fluid で も 検 out さ れ る alpha B ク リ ス タ リ ン に も reflect さ れ て い た. (4) ア ル ツ ハ イ マ ー disease 脳 お よ び polices according to add 齢 脳 で も, amount of に は less な い が, insoluble で alpha B ク リ ス タ リ ン お よ び hsp27 が 検 out さ れ, ま た, お も に Ser - 59 の リ ン acidification ク リ ス タ リ ン が shen the し て い た. 3 ア レ キ サ ン ダ ー disease 脳 slice の immunohistochemical staining で は, alpha B ク リ ス タ リ ン, hsp27 お よ び Ser - 59 の リ ン acidification model は Rosenthal fiber in に 検 out さ れ た. Side, ア ル ツ ハ イ マ ー disease 脳 お よ び plus 齢 脳 で は alpha B ク リ ス タ リ ン と hsp27 が, with じ よ う に, お も に ミ エ リ ン line d で 検 out さ れ, こ れ ら の molecular シ ャ ペ ロ ン の 脳 で の 経 shen は, god is の plus 齢 variations change の a つ と exam え ら れ た.

项目成果

Kozawa, O.: "Involvement of p42/p44 mitogen-activated protein kinase in prostaglandin F2α-stimulated inductin of heat shock protein 27 in osteoblasts"J. Cell. Biochem.. 75. 610-619 (1999)

Kozawa，O.：“成骨细胞中前列腺素 F2α 刺激的热休克蛋白 27 诱导素中 p42/p44 丝裂原激活蛋白激酶的参与”J. Cell。

Kato, K.: "Responses of hsp27, αB crystallin and hsp70 in rat brain after kainic acid-induced seizure activity"J. Neurochem.. 73. 229-236 (1999)

Kato, K.：“红藻氨酸诱导癫痫发作后大鼠脑中 hsp27、αB 晶状体蛋白和 hsp70 的反应”J. Neurochem.. 73. 229-236 (1999)

Katoh-Semba, R.: "Brain-derived neurotrophic factor, nerve growth factor and neurotrophin-3 in selected regions of the rat brain following kainic acid-induced seizure activity"Neurosci. Res.. 35. 19-29 (1999)

Katoh-Semba, R.：“红藻氨酸诱导癫痫发作后，大鼠大脑选定区域中的脑源性神经营养因子、神经生长因子和神经营养蛋白 3”Neurosci。

Ueda, H.: "Phosphorylation of F-actin-associating G protein γ12 subunit enhances fibroblast motility"J. Biol. Chem.. 274. 12124-12128 (1999)

Ueda, H.：“F-肌动蛋白相关 G 蛋白 γ12 亚基的磷酸化增强成纤维细胞运动性”J. Biol. Chem.. 274. 12124-12128 (1999)

Ito, H.: "αB-crystallin in rat lens phosphorylated at an early postnatal age"FEBS Lett. 446. 269-272 (1999)

Ito, H.：“出生后早期大鼠晶状体中的 αB-晶状体蛋白被磷酸化”，FEBS Lett 446. 269-272 (1999)