冠攣縮性狭心症病因遺伝子としての内皮型NO合成酵素遺伝子異常の分子生物学的解析

内皮NO合酶基因异常作为血管痉挛性心绞痛致病基因的分子生物学分析

• 批准号: 09281217
• 负责人: 斎藤 能彦
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09281217/
• 关键词: eNOS遺伝子; 転写因子; 遺伝的危険因子

冠攣縮性狭心症の危険因子は、欧米人に比べて日本人に高率に発症することにより、遺伝的危険因子の存在が示唆されている。熊本大学の泰江らは、NOの産生が低下していることを見いだし、内皮型NO合成酵素(eNOS)に機能異常が存在するか、発現量が低下している為と仮定した。この様な観点から、熊本大学の泰江らと我々は、すべてのエクソン及び5′転写調節領域(転写開始点より上流1.6Kbp)に対して一本鎖高次構造多型(SSCP)にて遺伝子変異を検索し、第7エクソンにmissense mutation(Glu298Asp)を、また、5′転写調節領域で3カ所の点変異を発見した。本年度はこれらの変異の機能解析を行った。1)第7エクソンのmissense mutationによるeNOS遺伝子の機能解析eNOScDNAの全長を含むクローンを得るために、ヒト胎盤cDNAライブラリーをスクリーニングし、野生型クローンと変異型クローンを得た。これらをCOS細胞へトランスフェクションし、それぞれの細胞におけるNO産生能は野生株と変異株で有為な差は認められなかった。また、これらのクローンを大腸菌にトランスフォーメーションし、リコンビナント蛋白を精製してMichaelis-Mentennoの式を求めて、Kmc値、Vmaxともに両者間で有意の差は認められなかった。2)5′転写調節領域の点変異による転写活性に及ぼす機能解析5′転写調節領域に存在する3つの点変異の転写活性に及ぼす効果を解析するために、野生型と3つの点変異を全て含んでいるeNOS遺伝子5′転写調節領域DNAフラグメントを、リポータージーンに結合し、ヒト血管内皮細胞にトランスフェクションすると変異は有意にルシフェラーゼ活性を低下させていることが明かとなった。

The risk factors of coronary heart disease (CHD) and Omi are higher than those of Japanese. In Kumamoto University, low levels of NO synthase (eNOS) and endothelial NO synthase (EST) were frequently detected in Taijiang and Kumamoto University, and low levels of DNA were found to be stable. You can read a copy of the high-level production of polymorphisms (SSCP) in the field (1.6Kbp) of Kumamoto University, Kumamoto University, Taijiang University, Beijing University, Kumamoto University and Kumamoto University. This year, we will be able to parse the bank account. 1) the full length of the eNOScDNA can be analyzed by using the 7 th missense mutation and eNOS sub-machine, including the full length of the cDNA, the wild type, the wild type, and the wild type. There is no difference in the growth of wild plants, COS plants, wild plants and wild plants. Please tell me that you want to know if you have a problem with Michaelis-Mentenno. 2) in the 5 'domain, there are three points in the field of writing, there are three points in the field, and there are three points in the field. In the field of writing, there are three points in the field, and the results of the analysis, the wild type, the full range of the eNOS, the 5' cluster, the field, the DNA, the server, the server, the DNA, the server, the server. The vascular endothelium

项目成果

Y.Shimasaki et.al.: "Association of the Missense Glu 298 Asp Mutation of the Endothelial Nitric Oxide Synthase Gene With Myocardial Infarction" J.Am.Coll.Cardiol.(in press). (1998)

Y.Shimasaki 等人：“内皮一氧化氮合酶基因的错义 Glu 298 Asp 突变与心肌梗塞的关联”J.Am.Coll.Cardiol.（出版中）。

T.Wallen et.al.: "Brain natriuretic peptide predicts mortality in the elderly." Heart. 77. 264-267 (1997)

T.Wallen 等人：“脑钠肽可预测老年人的死亡率。”

Y.Miyamoto et al.: "Endothelial Nitric Ozide Synthase Genc is Positively Associated With Essential Hypertension" Hypertension. (in press). (1998)

Y.Miyamoto 等人：“内皮一氧化氮合酶 Genc 与原发性高血压呈正相关”高血压。

M.Suda et al.: "Skeletal overgrowth in transgenic mice that overepress brain natriuretic peptide." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (in press). (1998)

M.Suda 等人：“转基因小鼠骨骼过度生长，过度抑制脑钠尿肽。”

M.Yoshibayashi et al.: "Elevated levels of adrenomedullin in primary and secondary pulmonary hypertension in patients <20 years of age." Am J Cardiol. 79. 1556-1558 (1997)

M.Yoshibayashi 等人：“<20 岁的原发性和继发性肺动脉高压患者的肾上腺髓质素水平升高。”