心臓の発生分化・肥大の分子機構における心筋細胞と非心筋細胞とのクロストーク

心肌细胞和非心肌细胞在心脏发育、分化和肥大分子机制中的串扰

• 批准号: 08258214
• 负责人: 斎藤 能彦
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08258214/
• 关键词: Cardiotrophin‐1; エンドセリン‐1; アンジオテンシン‐1; 心房性ナトリウム利尿ペプチド

臓器はその機能に与る機能細胞とその回りに存在するサテライト細胞とから構成されている。心臓でも心筋細胞といわゆる非心筋細胞から構成され、種々の病態での両細胞間での相互関係が重要である。本研究では、心室リモデリングにおける心筋細胞と非心筋細胞のクロストークの意義を明らかにする目的で、液性因子として、エンドセリン‐1(ET‐1),、新しい心筋肥大因子であるCardiotrophin‐1(CT‐1)に注目し肥大の分子機序を心筋細胞培養系を用いて検討した。心筋細胞と非心筋細胞のクロストークを解析するにあたり、まず心筋細胞の培養系で、心筋細胞と非心筋細胞を密度勾配法を用いて、分離培養法を確立した。次に我々のクローニングしたCT‐1cDNAをもとにリコンビナントラットCT‐1を調整した。我々の、培養系では心筋細胞の単培養系にET‐1とCT‐1を添加すると、用量依存的にANP・BNP分泌を亢進させた。しかし、アンジオテンシンやTGF‐βは心筋細胞単培養系に添加しても、全くANP・BNP分泌を亢進させなかった。一方、心筋細胞と非心筋細胞との共培養系では、アンジオテンシンやTGF‐βは用量依存的にANP・BNP分泌を亢進させた。非心筋細胞培養上清では約100pMのET‐1濃度を認めているが、アンジオテンシンやTGF‐βで刺激した共培養系にET‐1特異的受容体であるETA受容体の拮抗剤であるBQ123を添加すると、完全ではないものの有意に(50%以上)ANP・BNP分泌を抑制し、アンジオテンシンやTGF‐βの肥大作用に非心筋細胞から分泌されるET‐1が関与していることが示唆された。心筋の肥大作用には様々な液性因子が関与しており、直接心筋細胞肥大作用を有するものと非心筋細胞の存在が必要であるものとに分類され、後者においては非心筋細胞から分泌されるエンドセリンが重要な働きを担っていることが証明された。

The function of the organ is related to the function of the cell. The relationship between cardiac muscle cells and non-cardiac muscle cells is important. In this study, we aimed to clarify the significance of cardiac muscle cell and non-cardiac muscle cell proliferation in vitro. We investigated the use of cytokinin-1(ET-1), cytotropin-1(CT-1), a novel cardiac hypertrophy factor, in cardiac muscle cell culture systems. Culture system of cardiac muscle cells and non-cardiac muscle cells was established by density matching method. The next step is to adjust CT-1 cDNA. In our culture system, ET-1 and CT-1 are added to the culture system of cardiac muscle cells, and ANP and BNP secretion are increased in a dose-dependent manner. In addition, the secretion of ANP and BNP in cultured cardiac muscle cells was increased. On the one hand, in the co-culture system of cardiomyocytes and non-cardiomyocytes, ANP and BNP secretion were increased in a dose-dependent manner due to the presence of angiotensin and TGF-β. ET-1 concentration in supernatant of non-cardiac muscle cell culture was about 100pM. ET-1 concentration in supernatant of non-cardiac muscle cell culture was about 100 pM. BQ123 was added to ET-1-specific receptor, ETA receptor antagonist was added to ET-1-specific receptor, ANP and BNP secretion were inhibited by 50% or more. The hypertrophic effect of TGF-β on non-cardiac muscle cells is related to the secretion of ET-1. In addition, it is necessary to classify the existence of non-cardiac muscle cells, which are secreted by non-cardiac muscle cells.

项目成果

N.Tamura et.al.: "Two cardiac natriuretic peptide genes (atrial natriuretic peptide and brain natriuretic peptide) are organized in tandem in the mouse and human genomes." Journal of Molecular Cellular Cardiology. Vol.28. 1811‐1815 (1996)

N. Tamura 等人：“两种心脏钠尿肽基因（心房钠尿肽和脑钠尿肽）在小鼠和人类基因组中串联排列。”《分子细胞心脏病学杂志》28。1811-1815（1996 年）。 ）

M.Yoshibayashi et.al.: "Brain ntriuretic peptide versus atrial ntriuretic peptide : Physiological and pathophysiological significance in children and adults." European Journal of Endocrinology. Vol.135. 265‐268 (1996)

M. Yoshibayashi 等人：“脑钠尿肽与心房钠尿肽：儿童和成人的生理学和病理生理学意义。”欧洲内分泌学杂志，第 135 卷，265-268（1996 年）。

M.Ishikawa et.al.: "cDNA cloning of rat cardiotrophin‐1 (CT‐1) : augmented expression of CT‐1 gene in ventricle of genetically hypertesive rats." Biochemical and Biophysical Research Communication. 219 (2). 377‐381 (1996)

M. Ishikawa 等人：“大鼠心肌营养素-1 (CT-1) 的 cDNA 克隆：遗传性高血压大鼠心室中 CT-1 基因的增强表达。” 219 (2)。 381 (1996)

T.Nishikimi et.al.: "Relationship between left ventricular geometry and natriuretic peptides levels in essential hypertension." Hypertension. 28 (1). 22‐30 (1996)

T. Nishikimi 等人：“原发性高血压中左心室几何形状与利尿钠肽水平的关系。”28 (1) (1996)。

K.Yamamoto et.al.: "Superiority of brain natriuretic peptide as a hormonal market of ventricular systolic and diastolic dysfunction and ventricular hypertrophy." Hypertension. Vol.28. 988‐994 (1996)

K. Yamamoto 等人：“脑钠肽作为心室收缩和舒张功能障碍以及心室肥厚的激素市场的优越性。”28. 988-994 (1996)