スタチンによる新たな心不全治療法に関する基礎的研究

他汀类药物治疗心力衰竭新方法的基础研究

• 批准号: 14570664
• 负责人: 田中 光一
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Shimane Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14570664/
• 关键词: スタチン; アポトーシス; PKC; 心筋細胞; 心筋保護

【目的】最近、スタチンが脂質低下作用とは独立した種々の作用、いわゆるpleiotropic effctを有していることが報告されている。我々は心筋細胞のアポトーシスに対するスタチンの作用について検討した。【方法】10週齢雄SDラットより分離・培養した心筋細胞に特異的protein kinase C(PKC)inhibitorであるchelerythrine, rottlerinを加え心筋細胞のアポトーシス、心筋細胞内PKCアイソザイムの局在・caspase-3活性の変化について解析し、それに対するアトルバスタチンの作用について検討した。心筋細胞のアポトーシスの証明・定量はTUNEL assayにより行った。心筋細胞内PKCアイソザイムの局在変化はウエスタンブロット法により解析し、caspase-3活性の測定はcaspase-3特異的発色基質を用いた比色法により行った。【結果】chelerythrine, rottlerinは心筋細胞のアポトーシスを誘導し、心筋細胞内PKC-deltaの局在をparticulate fractionよりsoluble fractionにシフトさせ、また心筋細胞内caspase-3活性を増加させた。アトルバスタチンは、これらの特異的PKC inhibitorにより誘導される心筋細胞のアポトーシス、心筋細胞内PKC-deltaの局在変化、心筋細胞内caspase-3活性の変化を著明に抑制した。【結語】アトルバスタチンがPKC inhibitorにより誘導される培養心筋細胞のアポトーシスを抑制することを証明した。心筋細胞内PKC-deltaの活性化がその機序として重要である可能性が示唆される。

[Objective] Recently, the effct of lipid lowering and the effct of independent species have been reported. We have to investigate the role of muscle cells in the treatment of heart disease. [Methods] 10-week-old male SD rats were isolated and cultured. Specific protein kinase C(PKC)inhibitor was detected by chelerythrine and rottlerin. The changes of PKC-3 activity in cardiac muscle cells were analyzed. Tendon cell test and quantitative TUNEL assay The PKC gene expression in cardiac muscle cells was determined by the colorimetric assay for the determination of caspase-3 activity. [Results] Chelerythrine, rottlerin induced apoptosis in cardiac muscle cells, PKC-delta induced apoptosis in cardiac muscle cells, and caspase-3 activity increased in cardiac muscle cells due to particulate fraction and solution fraction. The expression of PKC-delta in cardiac muscle cells and the expression of caspase-3 in cardiac muscle cells were significantly inhibited by PKC inhibitor. [Conclusion] PKC inhibitor induced apoptosis in cultured cardiac muscle cells was demonstrated. The mechanism of PKC-delta activation in cardiac muscle cells is important and possible.